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            滅菌方法(滅菌方法及適用范圍)

            更新時間:2023-03-02 02:53:35 閱讀: 評論:0

            常見的滅菌方式有哪些

            (1)加熱滅菌法

            利用高溫來殺死微生物(超過最高生長溫度)的方法。加熱滅菌的原理:當高溫作用于微生物時,首先引起細胞內生理生化反應速率加快,機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等,隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞,盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞,從而使細胞失去了生活機能上的協調,停止了生長發育。隨著高溫的繼續作用,細胞內原生質便發生凝固,酶結構完全破壞,活動消失,生化反應停止,滲透交換等新陳代謝活動消失,細胞死亡。加熱滅菌可分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。

            1)干熱滅菌 利用灼燒或干熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為干熱滅菌法。由于干熱滅菌使用方便,方法簡單,故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法:直接利用火焰把微生物燒死,故又稱焚燒滅菌法。采用此法滅菌既徹底又迅速,但只適用于金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法:即在電熱恒溫干燥箱中利用干熱空氣來滅菌。

            2)濕熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

            ①高壓蒸汽滅菌 由于高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度,能大大縮短滅菌時間,提高工作效率,加之蛋白質在濕熱條件下容易變性,在熱蒸汽條件下,細菌的芽孢在120℃,經20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大,不易被穿透時,可將壓力增加到0.152兆帕,延長至1~2小時。在高壓蒸汽滅菌中,滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高(圖2-6)。

            圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋

            在使用高壓滅菌鍋時,要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。如果空氣不排除干凈,則鍋內溫度將低于同樣壓力下由純飽和蒸汽產生的溫度,影響滅菌效果。

            此法適用于各種耐熱物品的滅菌,如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。所采用的蒸汽壓力與時間,應根據待滅菌物品的性質、體積與容器類型等決定。

            ②常壓蒸汽滅菌 這是采用自然壓力、100℃蒸汽進行滅菌的方法。它設備簡單、成本低,當前使用最廣泛。只要砌一個爐灶,買1~2只大鍋,上面用磚和水泥砌成,也可用大鐵桶、木桶等,體積大小可自行決定,但不宜過大,以裝800~1500瓶為好。設計常壓灶時應注意的問題:大小根據生產規模來定,灶頂部最好制成拱圓形,這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會打濕棉塞;灶倉內要有層架結構,以便分層裝入滅菌物;灶上應安裝溫度計,可隨時觀察灶內溫度的變化;因滅菌時間長,鍋內水不夠蒸發,故容量大的灶要安裝加水裝置;灶倉的密閉程度要盡可能高,這樣既提高滅菌效果,又節省燃料。菇農在生產中還常用一種小型蒸汽發生裝置,引出蒸汽后直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進行常壓滅菌。這種方法不用建灶,簡便省工(圖2-7)。常壓滅菌一般水燒開后保持8~10小時,悶一夜即可。

            圖2-7 簡易常壓滅菌法

            ③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內,100℃處理1小時左右,殺死微生物的營養細胞,讓其冷卻至30℃左右,此時芽胞會萌發,再以同樣方法加熱處理,反復3次,可達到滅菌目的。該方法可用于不耐高溫的藥品、營養物、特殊培養基的滅菌。

            ④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下,經一定時間,殺死有害微生物的方法。適應于不耐高溫的物品消毒。有些培養基,在高溫下遭到破壞,用此法既可殺死致病微生物的營養體,又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。食用菌生產中培養料堆積發酵工藝,就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。

            (2)過濾除菌法

            又分液體過濾和空氣過濾兩種,就是采用機械的方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過濾器,通過機械過濾,只讓液體培養基或空氣從篩孔流出,各種微生物菌體則留在篩子上,從而達到除菌的目的。這種方法適用于對熱不穩定的體積小的液體培養基(如動物血清、蛋白質、酶、維生素等)及氣體的滅菌。超凈工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣,從風洞中吹出,來造成工作臺范圍的無菌狀態。過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的,也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜制成的。

            (3)輻射滅菌法

            利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種,α-射線、β-射線、γ-射線、X-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射,紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。

            1)紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應,將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體,從而抑制DNA的復制而發生變性、致死。另一方面,空氣在紫外線照射下產生的臭氧(O3),也具有一定的殺菌作用。紫外線的有效作用距離為1.2~2.0米。紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方,個數依房間大小而定,容1~2個人操作的接種室,安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前,應將所需的器具一起放入接種室(箱)內,然后打開紫外燈照射。如果接種室體積較大,開燈照射2小時才能達到滅菌效果;如果較小,只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。由于紫外線穿透力弱,即使是普通玻璃也不能濾過,因此,只適于空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體皮膚,尤其是眼睛有殺傷作用,應避免直視,工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下,能提高殺菌效果。細菌接受致死量紫外線照射后,隨即給予可見光照射,部分細菌有復活的可能。干細胞比濕細胞對紫外線的抗性強,孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。

            2)微波滅菌 由于微生物的細胞中都含有70%~90%的水分,水分子在微波電場中被極化,并隨著電場方向的改變而轉動,在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能,這種熱能不同于外部加熱,可在短時間里使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加,從而達到滅菌效果。用YM7601型微波爐只需60秒鐘就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。

            3)臭氧發生器消毒 臭氧(O3)具有強烈的氧化作用,能破壞微生物的細胞膜與核酸。O3也是一種暫態物質,常溫下能自然分解,還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。


            滅菌方法分為哪幾種類別?

            滅菌方法分為:

            1、熱滅菌法

            熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性,酶活性消失,致使細胞死亡。通常有干熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

            2、干熱滅菌

            把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內,在150~170℃下維持1~2小時后,可達到徹底滅菌(包括細菌的芽孢)的目的。灼燒是一種最徹底的干熱滅菌法,應用范圍僅限于接種環、接種針的滅菌或帶病原菌的材料、動物尸體的燒毀等。

            3、濕熱滅菌

            以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。

            4、間歇滅菌

            間歇滅菌連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用于不能耐 100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃,不致造成糖類等物質的破壞,而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死,從而達到徹底滅菌的目的。



            5、輻射滅菌

            輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法,較常用的有紫外線,其他還有電離輻射。波長在25000~80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力,以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限于某一定材料,因所需設備復雜,難于廣泛使用。

            6、滲透壓滅菌

            滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離,不能進行正常的新陳代謝,結果導致微生物的死亡。

            7、化學試劑滅菌

            大多數化學藥劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性,以便清除滅菌后材料上殘余的藥物。


            滅菌方法是什么?

            1、物理滅菌法

            (1)熱力滅菌法 使用熱力滅菌法,在溫度和壓力等規定的滅菌條件下,要達到一定的加熱時

            (2)過濾滅菌法 過濾滅菌法是用篩除或濾材吸附等物理方式除去微生物,是一種常用的滅菌方法,適用于不能受熱的物品,如含有可溶性或不穩定物質的培養基、試驗液體和液狀醫藥品等,過濾法的最大缺點是不能濾除病毒。

            (3)照射滅菌法放射線滅菌法是包括放射性同位素在內,利用從放射源產生射線進行照射,是殺滅微生物的一種方法。

            2、化學滅菌法

            (1)氣體滅菌法 氣體滅菌法是利用環氧乙烷或甲醛滅殺微生物的一種方法,主要用于玻璃制品、磁制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品、纖維制品等,還可用于設施、設備或粉末狀的醫藥品等。使用氣體滅菌時,其被滅菌的物品以未變質為前提條件。

            (2)藥液滅菌法 通常使用的藥液有乙醇、甲酚、苯酚水或福爾馬林水等,適用于玻璃制品、磁制品、金屬制品、橡膠制品、塑料制品、纖維制品等物品,還可用于手指、無菌箱或無菌設備等。

            擴展資料:

            臨床意義

            1、手術中的應用
            手術器械、敷料、術者手臂及手術環境的滅菌,是手術成功、傷口愈合的關鍵,嚴格無菌操作是防止感染、保證術后患者預期恢復健康的重要條件。

            2、預防疾病
            滅菌法可以預防病原微生物感染,切斷疾病傳播途徑、控制或消滅傳染病。

            參考資料百度百科-滅菌法


            常用6種滅菌方法有哪些,附適用范圍

            回答
            常用6種滅菌方法有干熱滅菌法、濕熱滅菌法、間歇滅菌法、輻射滅菌法、過濾除菌法和化學試劑滅菌法。干熱滅菌法是指在干燥環境(比如火焰或者干熱空氣)進行滅菌的技術。濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法。間歇滅菌法是指利用反復多次的流通蒸汽加熱,從而殺滅所有微生物的方法。
            一、常用6種滅菌方法有哪些
            1、干熱滅菌法:是指在干燥環境(比如火焰或者干熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和干熱空氣滅菌法,適用于干燥粉末、凡士林、油脂等。火焰滅菌法是指用火焰直接燒灼的滅菌方法;干熱空氣滅菌法是指用高溫干熱空氣滅菌的方法。
            2、濕熱滅菌法:是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法,濕熱滅菌法是以高溫高壓水蒸氣為介質,因為蒸汽的潛熱大,而且穿透力強,容易使蛋白質變性或者凝固,從而導致微生物的死亡。該方法的滅菌效率比干熱滅菌法高,而且還是藥物制劑生產過程中比較常用的滅菌方法。
            3、間歇滅菌法:是指利用反復多次的流通蒸汽加熱,從而殺滅所有微生物。間歇滅菌一般在流動蒸汽的滅菌鍋中進行,也可用普通鋁鍋代替。這種方法多用于明膠、牛乳等物質的滅菌,這類物質在100°C以上的溫度下處理比較長時間會被破壞,用間歇滅菌法可以起到殺菌作用,又可以讓被處理的物質免遭破壞。
            4、輻射滅菌法:是利用電離輻射殺死大多數物質上的微生物的一種有效方法,它們都可以通過特定的方式控制微生物生長或者殺死微生物,比如微波可以通過熱產生殺死微生物的作用,該方法可以在常溫或者低溫下進行,處理過程食品溫升很小,這樣有利于維持食品的質量;而且輻射過的食品不會留下任何殘留物。
            5、過濾除菌法:是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去,從而達到無菌目的,過濾除菌的原理有慣性撞擊截留作用、攔截截留作用、布朗擴散截留作用等。
            6、化學試劑滅菌法:是指用化學藥品直接作用于微生物而將其殺死的方法,該方法可以分為氣體滅菌法和液體滅菌法,氣體滅菌法是指采用氣態殺菌劑進行滅菌的方法,比如臭氧、甲醛等;液體滅菌法是指采用殺菌劑容易如進行消毒的方法。
            二、6種滅菌方法的適用范圍
            1、干熱滅菌法:適用于高溫下不損壞、不變質、不蒸發物品的滅菌,不耐濕熱的器械的滅菌,用于蒸汽或者氣體不能穿透物品的滅菌,比如玻璃、油脂、粉劑和金屬等制品的消毒滅菌。
            2、濕熱滅菌法:適用于耐高溫、耐濕熱物品,如培養基、動物尸體等,比如實驗室內常見壓力蒸汽滅菌器。
            3、間歇滅菌法:適用于不耐高溫、熱敏感物料和制劑的滅菌。
            4、輻射滅菌法:適用于食品、化妝品、藥品、日用品、醫療產品和電子塑膠等領域,主要作用是產品消毒滅菌處理,通過射線作用于產品在不拆外包裝的前提下可以有效降低或者殺滅產品內部不同類形的微生物。
            5、過濾除菌法:適用于血清、毒素、抗生素等不耐熱生物制品及空氣除菌。
            6、化學試劑滅菌法:適用于環境消毒以及不耐加熱滅菌的醫用器具、設備和設施等的消毒,也用于粉末注射劑。

            滅菌方法有哪幾種

            高壓滅菌:通過加壓提高蒸汽溫度,然后用高壓蒸汽滅菌。 紫外線滅菌:殺菌范圍廣,但是穿透力較弱。 干熱滅菌:主要是通過灼燒完成,通常用于工具滅菌。 干烤滅菌:利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。

            滅菌的方法有哪些

            1、高壓滅菌

            滅菌時,可以通過加壓提高蒸汽溫度,然后用高壓蒸汽滅菌,這種方法的穿透力強,溫度高,滅菌效果好,但是要注意完全排除高壓滅菌器內的冷空氣,否則滅菌不徹底。

            2、紫外線滅菌

            紫外線滅菌的效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關,這種方法的殺菌范圍廣,但是穿透力較弱,而且受到多種因素的限制,一般紫外燈殺菌以溫度20-40℃、相對濕度40%-60%為宜。

            3、干熱滅菌

            干熱滅菌主要是通過灼燒完成,這種方法通常是用于工具滅菌,將工具放在火焰上灼燒,然后利用火焰對其進行滅菌,阻止工具受到污染,在無菌操作中應用較為廣泛。

            4、干烤滅菌

            干烤滅菌一般是利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌,先把待滅菌的物品用金屬、玻璃、陶瓷制品等包裝好,然后放入烤箱中,加熱至160℃,保溫2h即可完全消滅細菌。


            滅菌的方法有哪些?

            1.干熱滅菌法
            1.1灼燒與火焰滅菌:灼燒主要是用于接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌,火焰滅菌通常用于無菌操作中,將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過火焰數次,利用火焰對管口等進行滅菌,阻止管口污染,作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。
            1.2干烤滅菌:利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后,均可在烤箱內干熱滅菌。通常加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌。但不宜超過170℃,玻璃量具易變形。降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利于熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底。
            2.濕熱滅菌法
            通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,穿透力強,溫度高,滅菌效果最好。
            注意事項:1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除。否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底。
            3.紫外線
            殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制。
            紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關。
            我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過100h,則應更換。表面有塵土,降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜。

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