
微生物檢驗實驗室致病性大腸埃希菌標準操作規程
1.概述
致病性大腸埃希菌包括腸產毒型大腸埃希菌、腸致病型大腸
埃希菌、腸侵襲型大腸埃希菌、腸出血型大腸埃希菌和腸凝
聚型大腸埃希菌5群。與普通大腸埃希菌的生化反應相似,
應結合血清反應(O、H和K抗原)、毒性試驗(ST和LT
腸毒素)和臨床癥狀,分別鑒定5型致病性大腸埃希菌。
2.標本類型
糞便標本。
3.鑒定
3.1形態染色與一般大腸埃希菌相同。
3.2培養特性在麥康凱瓊脂平板上形成不透明、粉紅色或
無色菌落。
3.3生化反應與普通大腸埃希菌相似。
3.4鑒別要點在山梨醇麥康凱瓊脂平板上形成無色菌落。
IMViC++--,
3.5不發酵或遲發酵山梨醇,為本菌的主要特征。
3.6操作步驟
3.6.1氧化酶試驗參見氧化酶試驗標準操作規程。
3.6.2致病型大腸埃希菌的鑒定
腸致病型大腸埃希菌(EPEC)嬰幼兒水樣或蛋花湯樣分
型。O:H分型血清作EPEC便,鑒定為大腸埃希菌后用.
腸產毒型大腸埃希菌(ETEC)水樣便,鑒定為大腸埃希
菌后需要測定ST和LT兩種腸毒素及血清分型。ST的檢查
可用兔腸段結扎試驗,免疫學或分子生物學方法(DNA探針)
檢測。
腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC)細菌性痢疾樣便,生化特性
與志賀菌相似,不發酵或遲發酵乳糖,賴氨酸脫羧酶陰性,
無動力,符合EIECO:H血清分型,豚鼠眼結膜試驗、HELA
細胞侵入試驗陽性。
腸出血型大腸埃希菌(EHEC)早期為水樣便后為血便,有
50多個血清型,最具代表性的是O157:H7不發酵或遲發酵
山梨醇,在山梨醇麥康凱瓊脂平板上形成無色菌落,可用
EHECO:H診斷血清進行分型。
4.藥敏
參見藥物敏感性試驗標準操作規程及CLSI
M100-S20最新版本文件。
5.質量控制
參見質量管理程序。
6.檢驗結果解釋與分析
疑似致病性大腸埃希菌感染,分離菌應先鑒定為大腸埃希菌,
再通過不同的方法鑒定到種型,如分離到上述4種腹瀉病原
菌,應立即向臨床發出報告。
臨床意義7.
7.1EHEC主要引起嚴重的出血性腸炎,臨床表現為低熱、
痙攣性腹痛,開始水樣便,繼而血樣便。
7.2EPEC主要引起嬰兒腹瀉,伴有低熱、嘔吐和腹瀉,黏液
便不帶血。輕
者不用抗生素治療,嚴重者需用抗生素治療。
7.3ETCC引起旅游者和嬰幼兒腹瀉的主要病原菌,臨床表
現為水樣腹瀉、惡心、嘔吐、寒戰,有時發生脫水及中毒癥
狀。輕者不用抗生素治療,嚴重者需用抗生素治療。
7.4EIEC要侵入結腸粘膜上皮,引起志賀菌樣腹瀉(粘液
膿血便),引起痢疾樣腹瀉,發熱和腸炎,黏液血便,便中
有紅、白細胞。
8.鑒定流程
挑菌落與分組
血清分型鑒定抗原不加熱活菌與
分型血清作玻片凝集:加熱抗原:100
1h與某型血清凝集必要時可作定型凝集
試驗報告檢出
糞便或肛拭子片凝
山梨醇平板
無色菌落
OK凝集
多價血清作玻
報告未
檢出
不凝集
EPEC
及移種KIAMIU上的菌液與分型血清作玻片凝集)型EPECOL(
B××××.
不凝集報告未檢出
糞、尿、殘余
EPEC
符合大腸埃希菌
考參文獻
.CNAS-CL23:2008[1]中國合格評定國家認可委員會
醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床微生物學檢驗領
域.2008的應用說明
BBB編寫人:AAA、操作人:本室操作人員
批準人:
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