分子雜交技術

DNA分子雜交技術

在高中生物教材中，多次提到DNA分子雜交技術，但愛倫坡短篇小說集 對于DNA分子雜交技術所用到的工具、

依據的原理及應用領域等都只是一帶而過，讓許多教師和學生深感疑惑，從而導致對此知識

理解不深，造成教學和學習上的困難。在此，筆者對其在高中生物教材中出現過的一些內容

進行補充介紹，以期加深理解，達到解疑釋惑的目的。

1、什么叫DNA分子雜交技術？

DNA分子雜交技術又稱DNA探針技術，是利用DNA分子的變性、復性以及堿基互補

配對的高度精確性，對某一特異甜糯米飯 性DNA序列進行探查的新技術。

2、DNA分子雜交技術的原理

DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形

成穩定的雙鏈區。在進行DNA分子雜交前,先要將兩種生物的DNA分子從細胞中提取出來,

再通過加熱或提高pH的方法,將雙鏈DNA分子分離成為單鏈,這個過程稱為變性。然后,將兩

種生物的DNA傳遞的英文 單鏈放在一起雜交,其中一種生物的DNA單鏈事先用同位素進行標記。如果兩

種生物DNA分子之間存在互補的部分,就能形成雙學校鑒定 鏈區。由于同位素被檢出的靈敏度高,即使

兩種生物DNA分子之間形成百萬分之一的雙鏈區,也能夠被檢出。

3、DNA分子雜交技術的工具軍官職業化 ------ＤＮＡ探針

DNA探針是利用放射性同位素(如32P)、熒光分子等標記的特定DNA片斷，該片斷可大至寄

生蟲基因組DNA，小至20個堿基。DNA探針具有特異性；由于用放射性同位素（如32P）或

生物素標記探針，使雜交試驗同時具有高度的敏感性。

4、DNA分子雜交技術的應用

(1)不同種生物之間親緣關系的判斷

不同種生物之間親緣關系的判斷，常采用比較不同生物DNA分子差異來進行,常用DNA分子

雜交法。二百字的日記 將兩種生物的DNA分子單鏈放在一起剪紙動物 ,如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列,就會形

成雜合雙鏈區。互補的堿基序列越多，形成的雜合雙鏈區就越多，說明兩種生物間的親緣關南京吃喝玩樂

系就越近(如圖)。或者是把兩個物種的DNA單鏈融合在一起，然后對這條新的DNA加熱。兩

個物種DNA序列的相似程度越高，讓這條DNA雙鏈解開的溫度也就越高。用這種方法，科學

家推測出黑猩猩和人的DNA相似程度是大約98．5％，黑猩猩是與人類親緣關系最近的動物。

(2)基因診斷

基因診斷是上世紀70年代末迅速發展一項診斷技術，不僅及時推廣應用于臨床，并且也很

快的被公安部門采用來偵破刑事案件。基因診斷是利用DNA分子雜交等分子學技術直接探查

人體基因組DNA存在的缺損或基因表達產物的異常以及患病毒、細菌、寄生蟲、真菌等感梁

性疾病時，病原體的基因組織或其基因的表達產物作出迅速正確診斷；并取量相微。病毒，

細菌等原體得入人體內后需要潛伏一定時間才能出現顯示癥狀，因此采用通常形態學、生化

學或血清方法診斷很難及時診斷出來，往往延遲了有效的治療時間；只有基因診斷技術才能

做到病原體尚沒有出現癥狀前，就能作出準確的診斷。基因診斷是用放射性同位素(如32P)、

熒光分子等標記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測標本上的遺傳信息，

達到檢測疾病的目的。例如，如何浪漫的表白 利用DNA探針可以迅速地檢出肝炎患者的病叉燒是什么肉 毒，為肝炎的診

斷提供了一種快速簡便的方法。目前用基因診斷方法已經能夠檢測出腸道病毒、單純皰疹病

毒等許多種病毒。目前核酸分子雜交不但用來檢測急性病人標本中的病毒DNA，也用于檢測

不易分離培養的慢性感染、潛伏感染、整合感染病人標本中的病毒DNA。

(3)環境監測。

據報道，用DNA探針可以檢測飲用水中病毒的含量。具體的方法是使用一個特定的DNA片段

制成探針，與被檢測的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測出來。此方法的特點是快速、靈敏。

用傳統方法進行檢測，一次需要耗費幾天或幾個星期的時間，精確度也不高。用DNA探針只

需要花費一天的時間，并且能夠大幅度地提高檢測精度。

Southern雜交──DNA和DNA分子之間的雜交。目的基因是否整合到受體生物的

染色體DNA中，這在真核生物中是目的基因可否穩定存在和遺傳的關鍵。如何證

明這一點，就需要通過Southern雜交技術。基本做法是：第一步，將受體生物

DNA提取出來，經過適當的酶切后，通過瓊脂糖凝膠電泳，將不同大小的片段分

開；第二步，將凝膠上的DNA片段轉移到硝酸纖維素膜上；第三步，用標記了放

射性同位素的目的DNA片段作為探針與硝酸纖維素膜上的DNA進行雜交；第四步，

將X光底片壓在硝酸纖維素膜上，在暗處使底片感光；第五步，將X光底片沖洗，

如果在底片上出現黑色條帶（雜交帶），則表明受體植物染色體DNA上有目的基

因。