微生物解答

2024年2月21日發(作者：記住這一天)

第一章

1.試述革蘭氏染色機制： 結晶紫液初染和碘液媒染：在細菌的細胞膜內可形成不溶于水的結晶紫與碘的復合物。乙醇脫色：G＋細胞壁較厚、肽聚糖網層次多和交聯致密且不含類脂，把結晶紫與碘的復合物牢牢留在壁內，使其保持紫色；G-細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯度差，結晶紫與碘復合物的溶出，細胞退成無色。復染: G-細菌呈現紅色，而 G+細菌則仍保留最初的紫色。

2.滲透調節皮層膨脹學說是如何解釋芽孢的耐熱機制的？

芽孢的耐熱在于芽孢衣對多價陽離子和水分的滲透很差以及皮層的離子強度很高，這就使皮層產生了極高的滲透壓去奪取芽孢核欣中的水分，其結果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水，正是這種失水的核心才賦予了芽孢極強的耐熱性。

3.何為“栓菌”試驗？

即設法把單毛菌鞭毛的游離端用相應抗體牢固地“栓”在載玻片上，然后在光鏡下觀察該菌細胞的行為，結果發現，該菌只能在載玻片上不斷打轉而未作伸縮“揮動”，因而肯定了“旋轉論”的正確性

4.對細菌細胞一般構造和特殊構造設計表解。

一般構造：包括細胞壁、細胞質膜、擬核、細胞質。特殊構造:糖被、鞭毛芽孢

第二章

1.試列表比較真核生物和原核生物的10個主要差別

比較項目

細胞大小

若有壁，主要成分

細胞膜中甾醇

細胞膜含呼吸或光合組分

細胞器

核糖體（指細胞質核糖體）

核膜

鞭毛運動方式

遺傳重組方式

繁殖方式

真核生物

較大

纖維素、幾丁質等

有

無

有

80S

有

揮鞭式

有性生殖、準性生殖等

有性、無性等多種

原核生物

較小

多數為肽聚糖

無（僅支原體例外）

有

無

70S

無

旋轉式

轉化、轉導、接合等

一般為無性（二等分裂）

2.試對酵母菌的方式作一表解

酵母菌的繁殖方式：

（一） 無性：①芽殖②裂殖③產無性孢子（節孢子、擲孢子、后垣孢子）

（二） 有性（產子囊孢子）

3.試圖示釀酒酵母的生活史，并對其中各主要過程作一簡述

1．子囊孢子在合適的條件下發芽產生的單倍體營養細胞

2．單倍體營養細胞，不斷地進行出芽繁殖

3．兩個性別不同的營養細胞彼此接合，在質配后即發生核配，形成二倍體營養細胞

4．二倍體營養細胞不進行核分裂，而是不斷進行出芽繁殖

5在以醋酸鹽為唯一或主要碳源，同時又缺乏氮源等特定條件下

6子囊經自然或人為破壁后，可釋放出其中的子囊孢子

4.試以表解法介紹霉菌的營養菌絲和氣生菌絲各可分化成哪些特化構造，并簡要說明它們的功能 吸取養料 假根

吸器

附著 ： 附著胞 、 附著枝

菌核

特化的營養菌絲 休眠（或休眠及蔓延）

菌索

延伸：匍匐枝

菌環

捕食線蟲

菌網

菌絲體 無性 分生孢子頭

孢子囊

簡單

有性：擔子

特化的氣生菌絲（子實體） 無性：分生孢子器、分生孢子座

復雜 有性（子囊果）：閉囊殼、子囊殼、子囊盤

簡述功能：

假根：具有固著和吸取養料等功能 吸器：吸取宿主細胞內的養料 附著胞：用以牢固的黏附在宿主表面 附著枝：將菌絲附著于宿主體上 菌核：休眠菌絲組織 菌索：促進菌體蔓延和抵御不良環境 菌環或菌網：捕捉線蟲或其他微小動物

5.試列表比較細菌、放線菌、酵母菌和霉菌細胞壁成分的異同，并提出制備相應原生質體的酶或試劑

細胞壁成分的異同：細菌分為G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量較高，而G-不含磷壁酸；G+類脂質一般無，而G-含量較高；G+不含蛋白質，G-含量較高。放線菌為G-，其細胞壁具有G-所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌，酵母菌的細胞壁外層為甘露聚糖，內層為葡聚糖；而霉菌的細胞壁成分為幾丁質、蛋白質、葡聚糖。

原生質體制備方法：G+菌原生質體獲得：青霉素、溶菌酶 。 G-菌原生質體獲得：EDTA鰲合劑處理，溶菌酶 。 放線菌原生質體獲得：青霉素、溶菌酶。霉菌原生質體獲得：纖維素酶。酵母菌原生質體獲得：蝸牛消化酶。

第三章

1.病毒粒有哪幾種對稱體制？每種對稱又有幾類特殊外形？

①螺旋對稱型—TMV 呈直桿狀，中空 ②二十面體對稱—腺病毒 外形呈典型的二十面體

③復合對稱—T 偶數噬菌體 呈蝌蚪狀

2.什么叫烈性噬菌體？簡述其裂解性生活史。

烈性噬菌體：凡在短時間內能連續完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個階段而實現其繁殖的噬菌體，稱為烈性噬菌體。

①吸附 噬菌體尾絲散開，固著于特異性受點上。

②侵入 尾鞘收縮，尾管推出并插入到細胞壁和膜中，頭部的核酸注入到宿主細胞中，而蛋白質衣殼留在細胞壁外。

③增殖 增殖過程包括核酸的復制和蛋白質的生物合成。注入細胞的核酸操縱宿主細胞代謝機構，以寄主個體及細胞降解物和培養基介質為原料，大

量復制噬菌體核酸，并合成蛋白質外殼。

④成熟（裝配）寄主細胞合成噬菌體殼體(T4 噬菌體包括頭部、

尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。 ⑤裂解（釋放）子代噬菌體成熟后，脂肪酶和溶菌酶促進宿主細胞裂解，從而釋放出大量子代噬菌體。

3.什么是一步生長曲線？它可分幾期？各期有何特點？

一步生長曲線：定量描述烈性噬菌體增殖規律的實驗曲線稱一步生長曲線或一級生長曲線。

潛伏期 從噬菌體吸附細菌細胞至細菌細胞釋放出新的噬菌體的最短時間。又可分為隱晦期和胞內累積期。

裂解期 從被感染的第一個細胞裂解至最后一個細胞裂解完畢所經歷的時間。

平穩期 指被感染的宿主已全部裂解，溶液中噬菌體數達到最高點后的時期。

裂解量 每個被感染的細菌釋放新的噬菌體的平均數 。

4.簡述用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的基本原理和主要步驟。

基本原理： 培養皿底部并非十分平整，注入少量培養基鋪平底部，作為下層，上層為噬菌體和細菌混合物的培養基注入，鋪平，這樣使得觀察物在同一平面，更利于噬菌斑的觀察及分離純化。

主要步驟：

（1） 倒下層瓊脂，。 融化下層培養基，倒平板（約10mL/皿）待用。

（2） 倒上層瓊脂。 融化上層培養基，待融化的上層培養基冷卻至50℃左右時，每管中加入敏感指示菌 (大腸桿菌) 菌液0.2mL，待檢樣品液或上述噬菌體增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上層平板鋪平。

（3） 恒溫培養。30℃恒溫培養6～12h觀察結果。

（4） 觀察結果。如有噬菌體，則在雙層培養基的上層出現透亮無菌圓形空斑——噬菌斑

5.某微生物發酵廠出現感染噬菌體的異常情況，試討論異常現象有哪些？并設計方案證實。

異常現象：1.發酵液光密度開始上升，而后下降。但有時也不上升，當把

1%的噬菌體人為的接入罐中，光密度始終處于最低位

逐漸上升，一般升到不再下降

3.泡沫大、料液略黏

4.鏡檢時發現菌體減少，發胖，革蘭氏染色后呈現紅色碎片。嚴重時，可出現拉絲或網狀，或呈魚刺狀，幾乎看不到完整菌體。

證實：把發酵液點在平板上能看到噬菌斑6.如何防止噬菌體對發酵工業的危害？

（1）不使用可疑菌種 認真檢查斜面、搖瓶及種子罐所使用的菌種，堅決廢棄任何可疑菌種。

（2）嚴格保持環境衛生。

（3）決不排放或隨便丟棄活菌液 環境中存在活菌。

（4）注意通氣質量 空氣過濾器要保證質量并經常進行嚴格滅菌，空氣壓縮機的取風口應設在30～40米高空。

（5）加強管道及發酵罐的滅菌。

（6）不斷篩選抗性菌種，并經常輪換生產菌種。

（7）嚴格執行會客制度

第四章

1.試以能源為主，碳源為輔對微生物的營養方式進行分類，并舉例說明。

答： 有機物：化能異養微生物（大多原核生物，真菌和原生動物）

化學物質（化能營養型）{

無機物：化能自養微生物（硝化、硫化細菌。鐵、氫細菌，）

能源{

光能自養微生物（紫硫細菌、藍細菌、綠硫細菌、藻類）

輻射能（光能營養型）{

光能異養微生物（紅螺菌科的細菌）

2.試述通過基團位移運送營養物質的機制。

答：其機制分兩步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖經磷酸化而進入細胞內。

3.什么是選擇培養基？試舉一實例并分析其中為何有選擇性功能。

答：選擇培養基是一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領域。如酵母富集培養基中的孟加拉紅抑制細菌的生長而對酵母菌無影響，偏酸性的環境有利于酵母菌的生長。

4.什么叫鑒別培養基？試以EMB為例分析其具有鑒別功能的原因。

答：鑒別培養基是一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑，從而達到只須用肉眼鑒別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養基。EMB培養基中的伊紅和美藍可抑制革蘭氏陽性菌和一些難養的革蘭氏陰性菌。產酸菌由于產酸能力不同，菌體表面帶質子，與伊紅美藍結合從而有不同的顏色反應，可用肉眼直接判斷。

第五章

1.在化能異養微生物的生物氧化過程中，其機制的脫氫和產能的途徑主要有幾條？列表比較各途徑的特點

答：1）EMP途徑特點：基本代謝途徑，產能效率低，提供多種中間代謝物作為合成代謝原料，有氧時與TCA環連接，無氧時丙酮酸及其進一步代謝產物乙醛被還原成各種發酵產物，與發酵工業有密切關系。2）HMP途徑3）ED途徑4）TCA循環特點：1、為糖、脂、蛋白質三大物質轉化中心樞紐。2、循環中的某些中間產物是一些重要物質生物合成的前體；3、生物體提供能量的主要形式；4、為人類利用生物發酵生產所需產品提供主要的代謝途徑。如：檸檬酸發酵；Glu發酵等。

第六章

1. 菌落計數法有何優缺點？試對澆注平板法和涂布平板法作比較。

答：（1）平板菌落計數法最大的缺點是速度慢,需要平板上長出菌落一段時間后才能計數.但是由于平板菌落計數法通常做梯度稀釋,所以計數的線性范圍大.由于是菌懸液涂布,所以比較均勻,能較好的反應菌落的疏密程度.重復性,平行性很好,是經典的計數方法；（2）為最常用的分離培養細菌的方法，通過平板劃線后，可使細菌分散生長，形成單個菌落，有利于從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。其目的都要使細菌呈現單個菌落生長，便于同雜菌菌落鑒別。涂布平板法: 由于將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且采用稀釋倒平臺法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長，因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。

2. 延滯期有何特點？實踐上如何縮短？

答：特點（1）生長速率常數為零；（2）細胞形態變大或增長，許多桿菌可成為絲狀；（3）細胞內的RNA尤其是rRNA的含量增高，原生質呈嗜踐行；（4）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP的合成速度，易產生各種誘導酶；（5）對外界不良條件如NaCl溶液濃度、溫度、和抗生素等理化因素反應敏感。

縮短方法（1）以指數期接種齡的種子接種，則子代培養的時間縮短；（2）接種量越大，延滯期越短；（3）培養基越豐富，延滯期越短；（4）種子損傷度越低或沒有損傷，這縮短延滯期。

3. 指數期有何特點？處于此期的微生物有何應用？

答：特點（1）生長速率常數R最大，因而細胞分裂一次所需的時間和原生質增加一倍所需

的倍增時間最短；（2）細胞進行平衡生長，故菌體各部分的成分十分均勻；（3）酶系活躍，代謝旺盛。

該時期微生物的應用：該時期的微生物因具有整個群體的生理特性較一致、細胞各成分的平衡增長和生長速率恒定等優點，故是用作代謝、生理、和酶學等研究的良好材料，是增值噬菌體的最適宿主，也是發酵工業中用作種子的最佳材料。

4. 穩定期有何特點？穩定期到來的原因有哪些？

答：特點（1）細胞開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內含物；（2）芽孢桿菌一般在這時開始形成芽孢；（3）有些微生物開始以出生代謝產物作前體，通過復雜的次生代謝途徑合成抗生素對人類有用的各種次生代謝物。

到來原因（1）營養物尤其是生長限制因子的耗盡；（2）營養物比例失調（3）酸、醇、毒素或者H2O2等有害代謝產物的累積；（4）PH、氧化還原電勢等物理化學條件越來越不適宜。

5. 試根據的代時來說明夏季食物容易變質的原因，提出防范措施。

答：在指數時期，原生質增加一倍的時間最短，大腸桿菌在隨溫度升高代時越短，生長越快，導致食品變質加快。防范措施：在低溫和無菌的環境下保存食品

6. 試列表比較兩類連續培養器的特點和應用范圍。

答：

裝置 控制對象 生長限制因子

無

培養液流速

不恒定

生長速度 產物 應用范圍

恒濁器 菌體密度

（內控制）

培養液流速（外控制）

最高生長速度

低于最高生長速度

大量菌體或菌體生長相平行的代謝產物

生產為主

恒化器 有 恒定 不同生長速度的菌體

實驗為主

7 試述McCord和fridovich關于厭氧菌癢毒害的超氧化物歧化酶假說。

凡嚴格厭氧菌就無sod活力，一般也無過氧化氫酶活力；所有具細胞色素系統的好氧菌都具有sod和過氧化氫酶；耐氧性厭氧菌不含細胞色素系統，但具有sod活力而無過氧化氫酶活力。（在此基礎上，他們認為，sod的功能就是保護好氧菌免受超氧化物陰離子自由基的毒害，從而提出了缺乏sod的微生物必然只能進行轉性厭氧生活的學說。

8在微生物的培養過程中，培養基的ph變化有何規律？如何合理調整以利微生物更好的生長和產生大量代謝產物？

升高或降低

加入生理酸性鹽或生理堿性鹽，作為其培養基成分

9比較滅菌、消毒、防腐和化療的異同。

滅菌指采用強烈的理化因素使任何物體內外部的一切微生物永遠喪失生長繁殖能力的措施。

消毒是指采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內部一部分對人體或動、植物有害的病原菌而對被消

毒對象基本無害的措施。

防腐是指利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖的措施。

化療是指利用對病原菌具有高度毒力而對其宿主基本無毒的化學物質來抑制宿主體體內病原微生物的生

長繁殖，借以達到治療該宿主傳染病的一種措施。

滅菌完全殺死微生物，而其它方法則是抑制微生物的生長繁殖。

10利用加壓蒸汽對培養基進行滅菌時，常易招致哪些不利影響？如何防治？

a形成沉淀物 b破壞營養，提高色澤 c改變培養基ph（一般為降低） d降低培養基的濃度

方法：a采用特殊加熱滅菌法（a 對易破壞的含糖培養基進行滅菌的時候，應將糖液與其他成分分別滅菌，滅菌后在合并b 含ca離子和fe離子的培養基與磷酸鹽成分分別滅菌，在混合 c 對含有易被高溫破壞成分的培養基，應采用低壓滅菌活簡寫滅菌 d 在大規模發酵工廠中，采用連續加壓蒸汽滅菌法） b過濾除菌法 c其他方法：配置培養基的時候，對配方逐一添加并使之溶解，還可以加入0.01%EDTA活0.01%nta，防止重金屬形成沉淀

11 影響加壓蒸汽滅菌的主要因素有哪些？在實踐中應該如何正確處理？

1被滅菌物質含菌量 2滅菌鍋內空氣排盡程度 3滅菌對象的ph 4滅菌對象的體積 5加熱與散熱速度

12抗生素對微生物的作用機制有哪幾種？試舉一例

a一直細胞壁的合成 b 引起細胞壁的降解 c 干擾細胞膜的功能 d抑制蛋白質的合成 e抑制DNA的合成 f抑制DNA的復制 g抑制RNA的轉錄 h抑制RNA的合成

13 試以磺胺及其增效劑tmf為例，說明這類化學治療劑的作用機制。

A 與正常代謝物一起共同競爭酶的活性中心，從而使微生物正常代謝所需的重要物質無法正常合成 b 假冒正常代謝物，使微生物合成出無正常生理活性的假產物 c某些抗代謝藥物與某一生化合成途徑的終產物的結構類似

14 抗藥性是如何產生的？其作用類型有哪幾種？試各舉一例

a產生一種能使藥物失去活性的酶 抗青霉素 b把藥物作用的靶位加以修飾和改變 抗鏈霉素的酶株 c 形成救護途徑即通過被藥物阻斷的代謝途徑發生變異 金黃色葡萄球菌 d使藥物不能透過細胞膜 委內瑞拉鏈霉菌 e 通過主動外排系統把進入細胞內的藥物磊出細胞外 銅綠假單胞菌

第七章

1.歷史上證明核酸是遺傳物質基礎的經典實驗有幾個？實驗者是誰？工作發表在何時？分別用何種模式菌種？各有何重要意義？

1、經典轉化實驗。1928年英國學者th以肺炎鏈球菌作為研究對象說明加熱殺死的S型細菌，在其細胞內可能存在一種具有遺傳轉化能力的物質，能通過某種方法進入R型細胞，并使R型細胞獲得表達S型莢膜性狀的遺傳特性。 2、噬菌體感染實驗。1952年y和利用大腸桿菌證明了在噬菌體的DNA中，存在著包括合成蛋白質外殼在內的整套遺傳信息。 3、植物病毒的重建實驗。1956年el-Comrat 用煙草花葉病毒證明在RNA病毒中，遺傳的物質基礎也是核酸，只不過是RNA

2.什么是Luria的變量實驗？試圖示其過程并指出該實驗的關鍵創新點

[1]實驗要點:取對噬菌體T1敏感的大腸桿菌對數期肉湯培養物,用新鮮培養液稀釋成濃度為10^3/ml的細菌懸液,然后在甲、乙兩試管中各裝10ml。接著把甲管中的菌液先分裝在50支小試管中(每管裝0.2ml),保溫24～36小時后,即把各小管的菌液分別倒在50個預先涂有T1的平板上, 經培養后計算各皿上所產生的抗噬菌體的菌落數;乙管中的10ml菌液不經分裝先整管保溫24 ～ 36小時,然后才分成50份加到同樣涂有噬菌體的平板上,適當培養后,同樣分別計算各皿上產生的抗性菌落數。

3.什么是Nwecomb的涂布試驗？試圖示其實驗過程并指出該實驗的關鍵創新點

先在12只培養皿平板上各涂以數目相等(5×10^4)的大量對噬菌體T1敏感的大腸桿菌,經5小 時的培養,約繁殖12.3代，于是在皿上長出大量微菌落(這時每一菌落約含5100個細胞)。取其中6皿直接噴上T1噬菌體，另6皿則先用滅菌玻棒把上面的微菌落重新均勻涂布一次，然后同樣噴上相應的T1。經培養過夜后，計算這兩組培養皿上所形成的抗噬菌體菌落數。

4.什么是Lederberg等的影印培養試驗？試指出該實驗的關鍵創新點。此法在微生物學研究中還有什么應用？

影印平板培養法是一種通過在固體培養基表面“蓋印章”的接種方式，達到在一系列培養皿平板的相同位置上出現相同遺傳型菌落的接種和培養方法

其他應用：在遺傳學基礎理論的研究中發揮了重要作用，在育種實踐和其他研究中也具有重要的應用

5.試述用Ames法檢測微量致癌、致突變、致畸變物質的理論依據、方法要點和優缺點

方法大致是在含待測可疑“三致”物質的式樣中，加入鼠肝勻漿液，經過一段時間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放入上述平板中央，經培養后，出現3種情況：a.在平板上無大量菌落產生，說明式樣中不含誘變劑；b.在紙片周圍有一抑制圈，其外圍出現大量菌落，說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在；c.在紙片周圍長有大量菌落，說明式樣中有濃度適當的誘變劑存在。

方法要點：1.試驗中要先加入鼠肝勻漿液保溫2.所用的菌株除需要用營養缺陷型外，還應是DNA修復酶的缺陷型

優點：簡便快速，準確，費用低

6.什么是瓊脂塊培養法？這種設計思路有何創新處？

要點：把誘變后的菌的分生孢子懸液均勻涂在營養瓊脂平板上，待長出稀疏的小菌落后，用打孔器一一取出長有單菌落的瓊脂小塊，并分別把它們整齊地移入滅過菌的空培養皿內，在合適的溫濕度下繼續培養4~5d，然后把每一長滿單菌落的瓊脂塊再轉移到已混有供試菌種的大塊瓊脂平板上，以分別測定各個小塊的抑制圈并判斷其抗生素效價，然后擇優選取之。

創新處：用打孔器取出含有一個小菌落的瓊脂塊并對它們作分別培養，在此條件下，各個脂塊所含養料和接觸空氣面積基本相同，且產生的抗生素等代謝產物不致擴散出瓊脂塊外，因此測得的數據與搖瓶試驗結果相似而工作效率大大提高

7.試用表解法概括一下篩選營養缺陷型菌株的主要步驟和方法

（1）抗生素法：

細菌用青霉素法：細菌細胞壁的主要成分為肽聚糖，而青霉素能抑制細胞壁肽聚糖鏈之間的交鏈，阻止合成完整的細胞壁。處在生長繁殖過程的細菌對青霉素十分敏感，因而被抑制或殺死，但不能抑制或殺死處休止狀態的細菌。將誘變處理后的菌懸液分離加有抗生素的基本培養基上，

培養后野生型細胞由于正常生長繁殖而被殺死，營養缺陷型細胞因不能生長而被保留下來，達到富集目的。酵母菌用制霉素法：制霉素作用于真菌細胞膜上的甾醇，引起細胞膜的損傷，殺死生長繁殖過程的真菌，起到富集營養缺陷型的作用。

（2）菌絲過濾法

真菌和放線菌等絲狀菌的野生型孢子在基本培養基中能萌發長成菌絲，而營養缺陷型的孢子則不能萌發。把誘變處理后的孢子移入到基本培養液中，振蕩培養10h左右，使野生型孢子萌發的菌絲剛剛肉眼可見，用滅菌的脫脂棉、濾紙或玻璃漏斗除去菌絲。繼續培養，每隔3~4h過濾一次，重復3~4次，最大限度地除去野生型細胞。然后稀釋、涂皿分離。

（3）高溫殺菌法

利用芽孢桿菌類的芽孢和營養體對熱敏感性的差異，讓誘變后的細菌形成芽孢，然后把處芽孢階段的細菌移到基本培養液中，振蕩培養一定時間，野生型芽孢萌發，而營養缺陷型芽孢不能萌發。此時將培養物加熱到80℃，維持一定時間，野生型細胞大部分被殺死，缺陷型則得以保留，起到了濃縮作用。

8.抗生素法和菌絲過濾法為何能“濃縮”營養缺陷型菌株？

抗生素法：1.青霉素法適用細菌，青霉素能抑制細菌細胞壁的生物合成，因而可殺死能正常生長繁殖的野生型細菌，但無法殺死正處于休止狀態的營養缺陷型細菌，從而達到“濃縮”后者的目的。制霉菌素法適合真菌，制霉菌素可與真菌細胞膜上的甾醇作用，從而引起膜的損傷。因為它只能殺死生長繁殖著的酵母菌或霉菌的真菌，故也可用于淘汰相應的野生型菌株和“濃縮”營養缺陷型菌株

菌絲過濾法：適用于進行絲狀生長的真菌和放線菌。在培養基中，野生型菌株的孢子能發芽成菌絲，而營養缺陷型的孢子則不能。因此，將誘變劑處理后的大量孢子放在基本培養基上培養一段時間后，再用濾孔較大的擦鏡紙過濾。如此重復數遍后，就可去除大部分野生型菌株，從而達到了“濃縮”營養缺陷型的目的

9.菌種衰退的原因是什么？如何區別菌種究竟是衰退，還是發生污染或飾變？

菌種衰退的原因：1、自發突變 菌種退化的主要原因是有關基因的負突變。2、通過誘變獲得的高產菌株本身不純.高產突變只發生在一個核上，隨著核的分離，原來未變異的低產性狀逐漸恢復。單核微生物由于高產突變只發生在一條DNA鏈上，也往往發生分離回復的現象。3、培養保藏條件可以通過對自發突變率的影響來表現，也可在不改變基因現的情況下表現

衰退可通過測定典型性狀(如形態，芽孢，伴胞晶體等)和生產性能(衰退的菌株大多發生負突變，產量性狀大大下降)等，并可進一步分離出該菌株的純種并進一步鑒別。)污染可通過純種分離和隨后的鑒別培養基進行鑒定等來判斷

第九章

1.干擾素有幾類？它對病毒抑制的機制是怎樣的？

答：有4類，IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω。機制：病毒侵染人或動物細胞甲后，在其中復制并產生dsRNA，由它再誘導產生IFN-RNA，進一步翻譯出IFN。這時，宿主細胞甲死亡。所產生的IFN對同種細胞乙上的相應的受體有極高的親和力，兩者相結合后，可刺激該細胞合成抗病毒蛋白AVP。這種AVP與侵染病毒的dsRNA發生復合后，活化了AVP，由活化的AVP降解病毒的mRNA。其結果阻止了病毒衣殼蛋白的翻譯，于是抑制了病毒正常增值殖。

2.具有哪些特點的生物分子才能作為抗原？

答：1、分子量大;2.分子結構復雜。3.異物性。

3.補體結合試驗的基本原理是什么？它有何優缺點？

答：試驗由兩個階段組成：首先將經過56℃處理30分鐘使補體滅活的抗血清，與抗原及補體（通常將豚鼠血清作適當稀釋后使用）混合使起反應。第二是加入已同抗綿羊紅細胞抗體相結合的綿羊紅細胞（致敏紅細胞）。在最初階段對消耗補體建立起足夠的抗原抗體反應時，沒有發生致敏紅細胞的溶血，但補體剩余下來則引起溶血反應。 補體結合試驗的優點為靈敏度高、特異性強、應用面廣、易于普及。缺點為試驗參與反應的成分多，影響因素復雜，操作步驟繁瑣并且要求十分嚴格，容易出現錯誤。