Th細胞（能分泌多種細胞因子的細胞）

Th細胞（能分泌多種細胞因子的細胞）

Th細胞 （能分泌多種細胞因子的細胞） 次瀏覽 | 2022.09.18 10:13:28 更新 來源 ：互聯(lián)網(wǎng) 精選百科 本文由作者推薦 Th細胞能分泌多種細胞因子的細胞

輔助性T細胞（helper T cell)，簡稱Th細胞，能分泌多種細胞因子。Th細胞是根據(jù)功能分類的一個T細胞亞群。Th2細胞主要分泌IL-4，IL-5，IL-6和IL-10等，主要功能為刺激B細胞增殖并產(chǎn)生免疫球蛋白G(immunoglobulinG，IgG)1和免疫球蛋白E(immunoglobulinE，IgE)抗體，與體液免疫有關(guān)。

少數(shù)Th細胞被稱為Th3細胞，它除分泌大量的IL-4和IL-10外，主要高表達TGF-β，但是不分泌IL-2和IFN-γ，可以下調(diào)抗原遞呈細胞(antigenprenting cells，APC)及Th1細胞的活性，起免疫抑制作用。未接觸抗原的T細胞被稱為Th細胞前體(Thcell precursor)，他們通過接觸天然免疫細胞攝取的抗原而分化成一種不確定的狀態(tài)，稱為Th0細胞。

中文名

Th細胞

外文名

helper T cell)

分類

T細胞亞群

功能

刺激B細胞增殖并產(chǎn)生免疫球蛋白G

特性及功能分類

Th細胞是根據(jù)功能分類的一個T細胞亞群。據(jù)其分泌的細胞因子的不同可分為Th0、Th1、Th2和Th3四個亞型。Th1細胞主要分泌白細胞介素(interleukin，IL)-2，干擾素(interferon，IFN)-γ，IFN-a，腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)-β等，主要介導細胞毒和局部炎癥有關(guān)的免疫應答，輔助抗體生成，參與細胞免疫及遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生，故稱為炎癥性T細胞，可被視為相當于遲發(fā)型超敏反應T細胞(TDTH細胞)。因而，Th1細胞在機體抗胞內(nèi)病原體感染中發(fā)揮重要作用。

主要功能

Th0細胞既分泌Th1型細胞因子IL-2和IFN-γ，又分泌Th2型細胞因子IL-4，可在不同信號的刺激下分化為Th1或Th2細胞。Th1和Th2細胞除分泌不同的細胞因子，發(fā)揮不同的免疫作用外，他們各自細胞的表面受體也有許多的不同。

不同的表面受體不僅可以作為分離Th1/Th2細胞的表面標志物，而且直接影響Th1/Th2細胞對一些細胞因子的反應能力，從而調(diào)控著Th1/Th2細胞的分化與功能(表1)。趨化因子受體CXCR-3和CCR-5的表達是Th1細胞的標記(優(yōu)先表達于Th1細胞的分子有b2腎上腺能受體、淋巴細胞激活基因子3、CDW150、CD162、CD49f/CD29等)，而CCR-3，CCR-4，CCR-7和CCR-8只能在Th2細胞表達，CD30也只與Th2細胞有關(guān)。

Th1細胞持續(xù)表達免疫球蛋白黏液素3(T cell immunoglobulin mucin 3，Tim-3)并可能通過半乳凝素類-9(Tim-3-galectin-9)途徑抑制Th1細胞介導的免疫反應和誘導外周免疫耐受。

胞內(nèi)細胞檢測

Schauer等對胞內(nèi)細胞因子的測定作出綜合評價，標本來源包括末梢血單個核細胞、腫瘤細胞、組織細胞等，檢測方法常用免疫組化法，主要為堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶（APAAP）技術(shù)和測定mRNA的熒光原位雜交技術(shù)（FISH），此外還有顯微熒光法，將單個細胞用多聚甲醛固定，皂素滲透后，行間接免疫熒光染色，以及Schauer等介紹的用刺激劑PMA（佛波酯）和Ionomycin刺激細胞，使細胞因子向高爾基體積聚，用BFA或Monensin阻斷細胞因子向胞膜外轉(zhuǎn)運，然后用流式細胞儀檢測的方法。

總的來說TH1型細胞因子的檢測相對容易，因為TH1型細胞能表達大量IL-2或IFN-γ，而TH2型細胞因子如IL-4、IL-5、IL-10的檢測相對困難，主要原因是TH2型細胞在標本中的出現(xiàn)頻率較低，所以有人建議用CD45RO+細胞來代替TH2的檢測。

酶聯(lián)免疫點法

（enzme-linked immunospot assay，ELISA）將抗細胞因子抗體包被反應板，加入待測T細胞，孵育一段時間后，加酶標記抗細胞因子抗體的酶作用底物，通過細胞的比色印跡法檢測信號，最后通過圖像掃描或?qū)Ｓ玫拿笜藘x進行分析。ELISPOT法引入生物素，親合素放大系統(tǒng)后，靈敏度大為提高，在測定產(chǎn)生細胞因子陽性細胞頻度方面，與流式細胞儀法相平行，但后教養(yǎng)可同時描述細胞性質(zhì)和其他因子的產(chǎn)生情況，且結(jié)果更為客觀，ELISPOT法一般雙ELISA夾心法靈敏，因為其充分利用細胞因子在細胞分泌部位聚集濃度高的特點，并且ELISPOT法能夠?qū)γ總€細胞的分泌物定量。

核酸雜交法

這是一類利用細胞因子的基因探針檢測特定細胞因子基因表達的技術(shù)，絕大多數(shù)細胞因子mRNA在T細胞中只短暫存在，其存在的量與T細胞產(chǎn)生細胞因子的量有很好的相關(guān)性，所以，在大多數(shù)情況下，細胞內(nèi)mRNA的量可以反映細胞產(chǎn)生細胞因子的情況，目前反有公認的細胞因子的基因均已克隆化，故能較容易地得到某一細胞因子的cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探行，利用基因探針檢測細胞因子mRNA表達的方法多種多樣，常使用斑點雜交、Northern blot、逆轉(zhuǎn)錄PCR、細胞或組織原位雜交等。

實驗的關(guān)鍵在于制備高質(zhì)量的核酸探針和獲得合格的待測物（提取的mRNA樣品或細胞/組織標本）。核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標記物（如生物素、地高辛等）標記并與目的基因互補的DNA片段或單鏈DNA、RNA。根據(jù)其來源可分為cDNA探針、寡核苷酸探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點雜交及Northerm blot，而RNA探針因穿透性好更適用于原位雜交。

核酸探針技術(shù)的應用已經(jīng)程序化，以cDNA探針為例主要包括：質(zhì)粒DNA的提取；靶DNA自段的分離；靶DNA片段標記；待測樣品mRNA的提取，標記cDNA探針對待檢樣品的雜交；放射自顯影或顯色分析。近年來RT-PCR檢測特異性mRNA的方法廣泛用于細胞因子研究領(lǐng)域。該法具有靈敏、快速等優(yōu)點，甚至從1~10個細胞中就可檢出的特異mRNA，適于科研或臨床檢測。

流式細胞儀檢測法

流式細胞術(shù)（flow cytkmetery，F(xiàn)CM）其基本原理是：用刺激劑PMA、ionomycin（離子霉素）體外激活淋巴細胞，用蛋白轉(zhuǎn)運抑制如黃能霉素（monensin）阻止細胞因子分泌到細胞外，細胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運方式被打亂，引起細胞因子向高爾基體積聚，用流式細胞儀便可測出增強細胞因子。這一技術(shù)的發(fā)展使得以往通過T細胞克隆方式在幾個月才能回答的問題，在幾個小時內(nèi)就能得以解決。該技術(shù)成為單細胞水平上檢測細胞因子產(chǎn)生的標準分析方法，盡管細胞因子標記流式細胞技術(shù)具有其他方法無可比擬的優(yōu)越性，但是在操作過程中，需要對細胞進行刺激、阻斷、固定、穿透和標記，任何一個環(huán)節(jié)都會影響實驗結(jié)果。

流式細胞儀法常用檢測指標為以CD4設門進行FCM分析。通過CD4+細胞中IFN-γ和IL-4的表達來確定TH1/TH2細胞的百分率[9-10]。以CD3/CD8設門，用FCM檢測分析TH1/TH2細胞的表達率，結(jié)果準確可靠，操作方便快捷，是檢測TH1/TH2細胞較理想的方法[11-12]。近年來發(fā)現(xiàn)CD4+T細胞向不同的方向極化，細胞表面表達不同趨化因子受體（chemokine receptor），趨化因子受體CCR5主要表達于TH1細胞表面，是TH1細胞的特異性標記，因此，利用針對趨化因子受體的特異性單克隆抗體來測定TH不同亞群特異笥較高，而且操作較簡單。CCR5和CCR3抗體是最近開發(fā)出來的，但只能反映TH細胞數(shù)量上的變化，其與功能（細胞因子分泌）的變化不否一致，有待進一步的研究。

對體液和細胞免疫的作用

TH細胞起始于能分泌IL-2的前身細胞，經(jīng)最初的刺激，這些細胞發(fā)育為THO細胞，它能分泌幾種細胞因子，包括IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-5和IL-10.根據(jù)細胞因子的作用，THO細胞能發(fā)育成為TH1或TH2細胞。[1]IFN-γ和IL-12有利于TH1的發(fā)育，而IL-4和IL-10有利于TH2的發(fā)育。TH1細胞分泌IFN-γ，TH2分泌IL-4，然而這兩種亞類均等地分泌其他幾種細胞因子（如IL-3，GM-CSF，TNF-α）。一般地說，TH1有利增強細胞免疫，而TH2有利于增強體液免疫。

參考資料