苯丙氨酸解氨酶（生成反式桂皮酸所需酶）

苯丙氨酸解氨酶（生成反式桂皮酸所需酶）

苯丙氨酸解氨酶 （生成反式桂皮酸所需酶） 次瀏覽 | 2022.08.21 12:43:45 更新 來源 ：互聯網 精選百科 本文由作者推薦 苯丙氨酸解氨酶生成反式桂皮酸所需酶

苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialya，PAL）催化苯丙氨酸的脫氨反應，使NH3釋放出來形成反式肉桂酸。此酶的在植物體內次生物質（如木質素等）代謝中起重要作用。

中文名

苯丙氨酸解氨酶

英文名

phenylalanine ammonialya

存在部位

高等植物、酵母、菌類可溶性部分

發現時間

1961年在大麥中發現的

簡介

是催化直接脫掉L-苯丙氨酸上的氨而生成反式桂皮酸的酶。EC．4．3．1．5。是1961年J．Koukol，E．Conn在大麥中發現的。存在于高等植物、酵母、菌類的可溶性部分。推測分子量為30萬。這是一個可把苯丙氨酸用于酚類化合物合成的酶。在很多情況下，其反應成為酚類化合物合成的有步驟的速率階段。

在組織中的活性可隨外界因素而發生顯著變化，用光照，病傷害，植物激素處理等會使活性顯著增加。另外有時還受光敏色素所支配。在多數情況下，在組織中活性增加的同時，酶發生失活作用，這時組織中具有活性酶的量很快就會減少，據認為，這種失活是與類蛋白質物質作用有關。此外也已指出有非活性的酶的存在。

活性測定

原理

苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialya，PAL）催化苯丙氨酸的脫氨反應，使NH3釋放出來形成反式肉桂酸。此酶的在植物體內次生物質（如木質素等）代謝中起重要作用。根據其產物，反式肉桂酸在290nm處吸光度的變化可以測定該酶的活性。

材料、儀器設備及試劑

（一）材料：馬鈴薯塊莖

（二）儀器設備：1.紫外分光光度計；2.離心機；3.研缽；4.吸濾瓶；5.紅光裝置；6.打孔器。

（三）試劑：1.0.05mol/L硼酸鹽緩沖溶液（pH8.8）；2.0.02mol/L苯丙氨酸（用0.1mol/LpH8.8硼酸緩沖液配制）；3.5mmol/L巰基乙醇硼酸緩沖液。

實驗步驟

馬鈴薯圓片制備

將馬鈴薯塊莖洗凈、削皮，用打孔器（直徑1.5cm）取圓柱，切除兩頭近表皮處，中間部分切成2mm厚的圓片。先用自來水漂洗，最后用蒸餾水洗一次，用紗布吸干表面的水。

2.光誘導將圓片平鋪在濕潤濾紙的培養皿中，置20～30℃紅光下處理24h以誘導PAL（也可接種病原菌誘導等）。

3.酶粗提液的制備

經誘導處理的馬鈴薯圓片5g，加10ml含5mmol/L的巰基乙醇的硼酸緩沖液、0.5g聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或PolyclarAT（除去酚類物質毒害，防止顏色的干擾、少量石英砂在研缽中研磨。勻漿抽氣過濾，濾液10，000rpm離心15min，上清液為酶粗提液。上述操作均在0～4℃下進行。

4.活性測定與計算

1ml酶液加1ml0.02mol/L苯丙氨酸，2ml蒸餾水，總體積為4ml。對照不加底物，多加1ml蒸餾水；反應液置恒溫水浴30℃中保溫，0.5h后用紫外分光光度計在290nm處測定吸光度。以每小時在290nm處吸光度變化0.01所需酶量為一單位（相當每毫升反應混合物形成1μg肉桂酸）。蛋白質含量用Folin－酚法進行測定。

參考資料