大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備原理、步驟以及重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
一、目的1.了解感受態(tài)細(xì)胞生理特性及制備條件,掌握大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備方法。2.掌握質(zhì)粒DNA 轉(zhuǎn)化大腸桿菌的方法,了解轉(zhuǎn)化的條件和利用半乳糖苷酶基因插入失活選擇重組質(zhì)粒DNA 的原理。二、原理〔一〕大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備的原理所謂感受態(tài),是指細(xì)菌生長過程中的某一階段的培養(yǎng)物,只有某一生長階段中的細(xì)菌才能作為轉(zhuǎn)化的受體,能承受外源DNA而不將其降解的生理狀態(tài)。感受態(tài)形成后,細(xì)胞生理狀態(tài)會發(fā)生改變
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