shRNA抑制高爾基體α-甘露糖苷酶Ⅱ基因的表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲力的影響及

2023年12月30日發(fā)(作者：怎樣腌制臘八蒜)

shRNA抑制高爾基體α-甘露糖苷酶Ⅱ基因的表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲力的影響及機(jī)制

張璐;楊雅瑩;黃子洋;易永芬

【期刊名稱】《重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》

【年(卷),期】2014(39)3

【摘 要】目的:初步分析高爾基體α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgi alpha-mannosidaⅡ,GMⅡ)在低中不同分化人胃癌細(xì)胞系中的差異表達(dá),以探討GMⅡ在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:應(yīng)用陽(yáng)離子脂質(zhì)體法將合成的靶向GMⅡ基因的pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406質(zhì)粒載體,分別轉(zhuǎn)染至低分化胃癌細(xì)胞MGC-803和中分化胃癌細(xì)胞SGC-7901中,然后熒光倒置顯微鏡觀察并計(jì)算轉(zhuǎn)染率,最后經(jīng)過(guò)G418篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株。應(yīng)用RT-PCR和Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后GMⅡ和E-cadherin、α-catenin的mRNA及蛋白表達(dá)變化情況,同時(shí)利用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定GMⅡ被沉默后兩株細(xì)胞侵襲能力的變化。結(jié)果:GMⅡ短發(fā)卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)轉(zhuǎn)染胃癌MGC-803和SGC-7901細(xì)胞后GMⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)明顯抑制,而E-cadherin和α-catenin的2種因子檢測(cè)結(jié)果明顯升高(P<0.05);細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406組(GMⅡshRNA組)與對(duì)照組(空白對(duì)照組,陰性對(duì)照組)相比,GMⅡ被沉默后的胃癌細(xì)胞的侵襲能力降低(P<0.05);Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)中GMⅡshRNA組胃癌細(xì)胞較空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組細(xì)胞侵襲能力都明顯降低,18 h穿過(guò)小室的細(xì)胞數(shù)分別為:(65±5)、(197±6)、(186±5),(72±4)、(178±4)、(184±5)個(gè)與對(duì)照組相比差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(MGC-

803:P=0.000,SGC-7901:P=0.000)。結(jié)論 :GMⅡ基因沉默后的胃癌細(xì)胞的侵襲能力下降,可能與上調(diào)E-cadherin、α-catenin的表達(dá)有關(guān)。

【總頁(yè)數(shù)】8頁(yè)(P310-317)

【關(guān)鍵詞】高爾基體α-甘露糖苷酶Ⅱ;短發(fā)卡RNA;胃癌;侵襲

【作 者】張璐;楊雅瑩;黃子洋;易永芬

【作者單位】重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室、分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心,重慶400016;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年科,重慶400016

【正文語(yǔ)種】中 文

【中圖分類】R735.2

【相關(guān)文獻(xiàn)】

1.高爾基體α-甘露糖苷酶Ⅱ在不同分化胃癌細(xì)胞和組織中的差異表達(dá)及意義 [J],

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干擾胃泌素基因表達(dá)對(duì)人胃癌細(xì)胞BGC823增殖和遷移能力的抑制作用

[J], 劉燕;耿排力;呂有勇

抑制SGC7901胃癌細(xì)胞綠色熒光蛋白基因的表達(dá) [J], 馬晉平;詹文華;汪建平;彭俊生;高勁松;朱孝峰;殷勤偉

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