花色苷的測定

2024年1月4日發(作者：數學試卷家長評語)

4.1.4 材料處理

4.1.4.1 草莓果實中花色苷的提取

按照Orak（2007）的方法，并略作修改，選取多個具有代表性的草莓果實，在液氮保護下迅速研成粉狀，從中準確稱取1.00g轉入10mL離心管，加入5mL甲醇-HCl（95:5）提取劑，超聲30min (功率為100w，溫度為30℃)，靜置30min，12000g離心10min，傾上清液留存，同上再加入5mL提取液，超聲30min，靜置，離心，傾上清液留存，最后用提取劑再洗滌殘渣2次，離心，最后將提取液合并定容至25mL。提取液于-20℃冰箱中保存待液相分析用，液相測定前提取液樣品經0.45μm微孔濾膜過濾。

4.1.5 HPLC色譜條件

LiChrospher 100RP-18e 色譜柱（250×4.0 mm I.D.，5 μm，Merck），保護柱為RP-18（10

mm×4mm，Merck），紫外檢測波長為520 nm，柱溫40℃，進樣量為20 μl。根據保留時間（RT）及吸收光譜與標準品對照定性，以峰面積外標法定量。

流動相A：水—甲酸，體積比100:1.5；

流動相B：水—甲醇體積比25:75，然后用甲酸調整pH值到2.35

把流動相按照比例配好，配好之后過流動相濾膜，然后超聲20分鐘。

洗脫程序：

0min:90%A，10%B；

0min-10min：90%A，10%B；

10-50min：90%A-40%A；10%B-60%B；

50-55min：40%A-10%A；60%B-90%B；

55-60min：10%A-90%A；90%B-10%B

天竺葵素-3-葡萄糖苷標準曲線