硫酸銨鹽析法沉淀蛋白質

2024年3月15日發(作者：中華二十四孝)

硫酸銨鹽析法沉淀蛋白質

硫酸銨鹽析法是一種分離純化蛋白質的常用方法，它是利用硫酸銨

的沉淀能力將蛋白質從溶液中分離出來。本文將詳細介紹硫酸銨鹽

析法的原理、步驟和注意事項。

一、硫酸銨鹽析法的原理

硫酸銨是一種常用的沉淀劑，它在水中溶解度隨溫度的升高而增加。

利用這個特性，可以通過逐漸加入硫酸銨，使蛋白質逐漸從水溶液

轉移到硫酸銨溶液中，最終沉淀出來。硫酸銨鹽析法的原理是蛋白

質和硫酸銨形成復合物，使溶液中蛋白質的溶解度降低，從而沉淀

出來。

二、硫酸銨鹽析法的步驟

1.制備蛋白質溶液：將需要分離純化的蛋白質加入緩沖液中，使其

溶解。

2.加入硫酸銨：逐漸加入一定比例的硫酸銨至蛋白質溶液中，攪拌

均勻。

3.離心：將混合液離心，使蛋白質沉淀。

4.洗滌：用冷硫酸銨水洗滌沉淀，去除雜質。

5.再溶解：用適量的緩沖液再次溶解沉淀的蛋白質。

三、硫酸銨鹽析法的注意事項

1.硫酸銨的加入應逐漸進行，以免過飽和而導致蛋白質不完全沉淀。

2.離心速度和時間應根據所用離心機的不同而確定。

3.洗滌次數應足夠多，以免殘留的硫酸銨對蛋白質產生影響。

4.蛋白質的再溶解要充分，以保證蛋白質的活性和穩定性。

5.硫酸銨鹽析法不能用于分離具有相似結構的蛋白質，因為它們的

沉淀能力相似。

四、總結

硫酸銨鹽析法是一種簡單有效的蛋白質分離方法，適用于大多數蛋

白質的純化。它的優點是操作簡單，成本低廉，同時可以同時去除

雜質和離子。但是，硫酸銨鹽析法也有其局限性，比如不能分離具

有相似結構的蛋白質。因此，在選擇分離方法時，應根據實驗要求

和蛋白質的特性來確定最適合的方法。