乳酸菌素Gasricin T基因的合成及其在大腸桿菌中的融合表達

2024年3月16日發(作者：滿足澳大利亞)

維普資訊

４１６　

技　術　通　訊ｖ　０１．１８一，．３　Ｍ　２００７

生

ＬＥ　幾Ｅ　ＲＳ　ＩＮ　ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　ＶｏＩ．　Ｎｏ　?ｊ【ｖｌａｙ，　　

Ｅ１廣１　

Ｌ

文章編號：１００９—０００２（２００７）０３－０４１６—０３　研究報告　

乳酸菌素Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ基因的合成及其在大腸桿菌中的融合表達　

劉麗凡　，趙建增　，雷連成　，韓文瑜　

１．吉林大學農學部，吉林長春１３００６２；２．北京寰宇天康生物科技有限公司，北京１０００６１　

［摘要］　目的：在大腸桿菌系統中表達有抗菌活性的乳酸菌素Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ。方法：根據乳酸菌素Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ的基因序列，　

把Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ的結構基因ｇａｔＡ編碼的氨基酸的密碼子轉換成大腸桿菌偏愛的形式；用人工合成的寡核苷酸片段，通過重　

疊ＰＣＲ法擴增得到ｇａｔＡ片段（倒基因）；將合成的　基因插入ｐＧＥＸ一４Ｔ一１，構建ｐＧＥＸ一４Ｔ一１一ｇａｔ融合表達載體，轉化大　

腸桿菌ＤＨ５ａ株，ＩＰＴＧ誘導表達，經超聲裂解后獲得包涵體蛋白，經溶解、變性、復性處理后獲得ＧＳＴ－Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ融合蛋　

白；用瓊脂擴散法測定其對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、李斯特菌、枯草桿菌等的抗菌活性。結果與結論：采用ｐＧＥｘ一４Ｔ一１　

融合表達系統在大腸桿菌中表達了有活性的Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ，融合蛋白以包涵體形式存在。復性的融合蛋白對金黃色葡萄球菌　

和大腸桿菌有明顯的抑制作用，對李斯特菌的抑制作用不明顯。　

［關鍵詞］　乳桿菌素；Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　基因合成；融合表達；抗菌活性　

［中圖分類號］Ｑ７８　［文獻標識碼］Ａ　

Ｆｕｓｉｏｎ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　Ｇｅｎｅ　ｉｎ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　

ＬＩＵ　Ｌｉ－ｆａｎｌ，ＺＨＡ０　Ｊｉａｎ－ｚｅｎ　，ＬＥＩ　Ｌｉａｎ－ｃｈｅｎ　，ＨＡＮ　Ｗｅｎ－ｙｕｌ　

１．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｊｉｌｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ　１３００６２；２．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｃｏｓｍｏ－Ｄａｙ－Ｈｅａｈｈｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｌｉｍｉｔｅｄ　Ｃｏｍｐａｎｙ，　

Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００６１；Ｃｈｉｎａ　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｅｘｐｒｅｓｓ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ　Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＤＮＡ　ｆｒａｇ—　

ｍｅｎｔ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍａｔｕｒｅ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｏｆ　Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｔｈｒｅｅ　ｒｏｕｎｄｓ　ｏｆ　ＰＣＲ　ｆｒｏｍ　ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　ｓｉｘ　５９　ｎｔ　ｏｌｉｇｏｅｓ　

ａｆｔｅｒ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｏｎａｌ　ｃｏｄｏｎ　ｕｓａｇｅ　ｏｆ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｃｌｏｎｅｄ　ｉｎｔｏ　ｐＧＥＸ　Ｔ一１．Ｃｌｏｎｅｓ　

ｃａｒｒｙｉｎｇ　ｐＧＥＸ一４Ｔ一１一ｇａｔ　ｗａｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＩＰＴＧ．Ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｂｍｋｅｎ　ｄｏｗｎ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｂｏｄｉｅｓ　

ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｕｎｄｅｒｗｅｎｔ　ｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎ，ｒｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｏｂｔａｉｎ　ＧＳＴ－ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｆｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　

ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｗａｓ　ａｓｓａｙｅｄ　ｂｙ　ａｇａｒ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：　Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｗａｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ａｓ　ＧＳＴ—ｆｕｓｉｏｎ　

ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　ｐＧＥＸ一４Ｔ一１　ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｅ　ｆｕｓｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｗａｓ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｙｓａｔｅ　ａｓ　ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　ｂｏｄｉｅｓ．　

Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｇｒａｍ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ．ｓ．　ｒｅ　ａｎｄ　ａｇａｉｎｓｔ　ｇｒａｍ—ｎｅｇａｔｉｖｅ　Ｅ．ｃｏｌｉ．　Ｃｏｎ－　

ｃｌｕｓｉｏｎ：Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗａｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｉｎ　ｐＧＥＸ一４Ｔ一１　ｆｕｓｉｏｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ．　

【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ；ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ；ｇｅｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ｆｕｓｉｏｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　

細菌素是細菌在代謝過程中通過核糖體合成機制產生的一　

類具有抑菌活性的多肽或蛋白質組分，產生菌對其細菌素有自　

身免疫性【ｌ，２１。乳酸菌素是由乳酸菌產生的細菌素，其抑菌范圍主　

要是與產生菌種屬相近的其他細菌【３－５］，但也有一些革蘭陽性菌　

Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ為疏水性肽，只有Ｃ端為親水性，二硫鍵的形成可　

能與其活性有關，但對其作用機理及遺傳機制都不是很明確。為　

了研究Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ作用的分子機制，我｛ｆｌＡｒｅ合成了ｇａｔＡ片　

段，　并在大腸桿菌中高效表達了ＧｓＴ—Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ融合蛋白。　

融合表達產物經復性后獲得了有抗菌活性的蛋白。　

產生的細菌素對革蘭陰性菌起抑制作用。乳酸菌已被公認為安　

全無毒的細菌。在過去的幾年里，人們對乳酸菌細菌素進行了廣　

泛的基礎和應用性研究，主要是因為它們能有效地抑制食品及　

１材料和方法　

１．１材料　

其產品中的病原菌，是潛在的生物防腐劑和飼料添加劑，在食品　

和飼料的發酵和儲藏過程中起著重要的作用。近年來，隨著乳酸　

菌素的不斷發現，相關的研究也越來越多。乳酸菌素Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　

Ｔ是一種由加氏乳桿菌（Ｌａｃｔｏｂ　ｉｌｌｕｓ　ｇａｓｓｅｒｉ）ＳＢＴ２０５５分泌的廣　

表達質粒ｐＧＥｘ一４Ｔ＿１、大腸桿菌ＤＨ５ａ株、金黃色葡萄球菌　

ＡＴＣＣ６５３８株、鏈球菌、沙門氏菌等標準菌株均由本實驗室保存。　

譜抗菌的細菌素閻，其相對分子質量為５　４００，含有６個ＯＲＦ。其　

中第４個ＯＲＦ　ｇａｔＡ基因（簡稱ｇａｔ基因）編碼活性蛋白。ｇａｔＡ編　

碼的蛋白由７５個氨基酸殘基組成，分子內含２個Ｃｙｓ殘基，可　

形成分子內的二硫鍵，在第１７和第１８位有１個ＧＧ基序的切割　

限制性內切酶、　ＤＮＡ聚合酶為ＴａＫａＲａ公司產品；丙烯酰　

胺、Ｎ，Ｎ２一亞甲雙丙烯酰胺、過硫酸胺、ＳＤＳ、ＤＴＴ、溴酚藍、考馬斯　

［收稿日期］２０ｏ６一ｌＯ—ｌ３　

［作者簡介］劉麗凡（１９８ｌ一），女，碩士研究生　

［通訊作者］韓文瑜，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｈａｎｗｙ＠ｊｌｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　

位點，前體蛋白通過切割產生含５７個氨基酸殘基的成熟蛋白。　

維普資訊

維普資訊

維普資訊

ｐ　

生

４２２　

ＬＥ　ｒＩ１Ｅ　　?　１８Ｎｏ　一－．?３一一ｊ　Ｍａｙ，２００／　　２００７

ｒＩ１　

ＲＳ　ＩＮ　ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　Ｖｏｌ

．

技　術　通　訊…

ｌｅｎｇｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｖａｃｃｉｎｅ，１９９４，１２（１５）：１４６７　

【５】Ｅｐｓｔｅｉｎ　ＳＬ．Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ｖｉｒｕｓ　ｉｆｅｃｔｎｉｏｎ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｉ?　

ｔｙ　ｔｏ　ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ　ｖｉｒａｌ　ｆｅａｔｕｒｅｓ【Ｊ】．　Ｅｘｐｅａ　Ｒｅｖ　Ａｎｔｉｉｆｅｃｔｎ　

Ｔｈｅｒ，２００３，１（４）：８９　

【６】　Ｂｉｓｗａｓ　ＳＫ，Ｐａｕｌ　Ｌ．Ｉｌｕｅｎｚａ　ｖｉｆｎｕｓｒ　ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎｔｅｒａｃｔｓ　

ｗｉｔｈ　ｉｌｕｅｎｚａ　ｖｉｆｎｕｓｒ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ】．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，１９９８，　

８：５４９３　

ｉｆｌｉｎｇ　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｈｏｓｔ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏ　ｂａｃｔｅｒｉｌ　ｉａｆｅｃ?　ｎ

ｔｉｏｎ［］．ＣｕｒＪｒ　Ｏｐｉｎ　Ｍｉｃｏｂｉｒｏｌ，２００４，７：３３　

【１０］Ｎａｋａｇａｗａ　Ｙ，Ｋｉｍｕｒａ　Ｎ，Ｔｏｙｏｄａ　Ｔ，ｅｔ　．Ｔｈｅ　ＲＮＡ　ｐｏｌｙ?　

ｍｅｒａｓｅ　ＰＢ２　ｓｕｂｕｎｉｔ　ｉｓ　ｎｏｔ　ｒｅｑｕｉｒｅｄ　ｆｏｒ　ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎ—　

ｌｆｕｅｎｚａ　ｖｉｕｓ　ｇｅｎｏｍｅ　ｂｕｔｒ　ｉｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｃａｐｐｅｄ　ｍＲＮＡ　

ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｖｉｏｌｒ，１　９９５，６９（２）：７２８　

【１１】Ｓｔｅｌｚｌ　Ｕ，Ｗｏｒｍ　Ｕ，Ｌａｌｏｗｓｋｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｈｕｍａｎ　ｐｒｏｒｅｉｎ－　

ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎｔｅｒ　ａｃｔｉｏｎ　ｎｅｔｗｏｒｋ：　Ａ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　ａｎｎｏｔａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　

【７】Ｓｈｉｍｉｚｕ　Ｋ，Ｋｕｒｏｄａ　Ｋ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｏｓｔ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｉｌｕｅｎ—ｆｎ　

ｚａ　ｖｉｕｓｒ　ｉｆｅｃｔｎｅｄ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｕｉｕｓｒｕ，２００４，５４（２）：１　８９　

【８】Ｖｉｓｅｓｈａｋｕｌ　Ｎ，Ｔｈａｎａｗｏｎｇｎｕｗｅｃｈ　Ｒ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｏｍｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　

ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｈ５Ｎ１　ａｖｉａｎ　ｉｌｕｅｎｚａ　Ａ　ｖｉｆｎｕｓｒ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　

ｐｒｏｔｅｏｍｅ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，２００５，１２２（６）：９５７　

【１２１　Ｗｅｂｓｔｅｒ　ＲＧ，Ｋａｗａｏｋａ　Ｙ，Ｔａｙｌｏｒ　Ｊ，ｅｔ　．Ｅｆｉｃａｃｙ　ｏｆｆ　ｎｕ?　

ｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　

ｏｕｔｂｒｅａｋ　ａｍｏｎｇ　ｐｏｕｌｔｒｙ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｔｈａｉｌａｎｄ［Ｊ］．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，　

２００４，３２８（２）：１　６９　

【９】Ｗａｌｄｕｃｋ　Ａ，Ｒｕｄｅｌ　Ｔ，Ｍｅｙｅｒ　ＴＦ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ　ａｎｄ　ｇｅｎｅ　ｐｒｏ一　

ｏｗｌｆｐｏｘ　ｖｉｕｓｒ　ａｓ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｆｏｒ　ｉｌｕｅｎｚｆｎａ　ｉｎ　ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］．Ｖａｃ—　

ｃｉｎｅ，１９９１，９（５）：３０３　

（上接第４１８頁）　

Ｂｌａｃｋｉｅ　Ａｃａｄｅｍｉｃ　ａｎｄ　Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａ１．１　９９４　

【５】Ｊａｃｋ　ＲＷ，Ｔａｇｇ　ＪＲ，Ｒａｙ　Ｂ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ　ｏｆ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｂａｃｔｅｒｉ．　

參考文獻　

Ｃｉｎｔａｓ　ＬＭ，Ｃａｓａｕｓ　ＭＰ，Ｈｅｒｒａｎｚ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ　ｏｆ　

ａ【Ｊ】．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｒｅｖ，１９９５，５９：１７１　

【７】　Ｍｕｒｉａｎａ　ＰＭ，　Ｋｌａｅｎｈａｍｍｅｒ　ＴＲ．Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐａｒｔｉｌａ　

ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｃｔａｃｉｎ　Ｆ，　ａ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　

ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈ　Ｉｎｔ，２００１，７（４）：２８１　

Ｇａｎｚｌｅ　ＭＧ，Ｈａｍｍｅｓ　ＷＰ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｎ　

Ｌａｃｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　１　１０８８［Ｊ］．Ａｐｐｌ　Ｅｎｖｉｏｎｒ　Ｍｃｒｏｂｉｏｌ，　

１９９１，５７：１１４—１２１　

ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ａｎｄ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ［Ｊ】．Ｉｎｔ　Ｊ　

Ｆｏｏｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９９，４６：２０７　

【８】Ｍｏｒｔｖｅｄｔ　ＣＩ，Ｎｉｓｓｅｎ—Ｍｅｙｅｒ　Ｊ，Ｓｌｅｔｔｅｎ　Ｋ，ｅｔ　．Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ　

ａｎｄ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｌａｃｔｏｃｉｎ　Ｓ，ａ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ　ｐｒｏ．　

Ｓｕｍａ　Ｋ，Ｍｉｓｒａ　ＭＣ，Ｖａｒａｄａｒａｊ　ＭＣ．Ｐｌｎｔａａｒｉｃｉｎ　ＬＰ８４。ａ　

ｂｒｏａｄ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｈｅａｔ—ｓｔａｂｌｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ　ｏｆ　Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　

ｐｌａｎｔａｒｕｍ　ＮＣＩＭ　２０８４　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ａ　ｓｉｍｐｌｅ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｂｒｏｔｈ　

ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓａｋｅ　Ｌ４５［Ｊ］．Ａｐｐｌ　Ｅｎｖｉｏｎ　Ｍｃｒｒｏｂｉ—　

ｏｌ，１９９１，５７：１８２９　

【９】　Ｋａｌｃｈａｙａｎａｎｄ　Ｎ，Ｓｉｋｅｓ　Ａ，Ｄｕｎｎｅ　ＣＰ，ｅｔ　．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　

ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　ｐｒｅｓｓｕｒｉｚａｔｉｏｎ　

ｍｅｄｉｕｍ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９８，４６：１７　

Ｙａｓｕｓｈｉ　Ｋ．Ｐｒｉｍａｒｙ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　

Ｇａｓｓｅｒｉｃｉｎ　Ｔ，　ａ　ｌａｃｔａｃｉｎ　Ｆ—ｆａｍｉｌｙ　ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｖ　

ａｎｄ　ｐｅｄｉｏｃｉｎ　ＡｃＨ　ｏｎ　ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｏｄｂｏｒｎｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ】．　

Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９９８，６１：４２５　

Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｇａｓｓｅｄ　ＳＢＴ２０５５［Ｊ】．　

Ｂｉｏｃｈｅｍ．２Ｏ００．６４（１０）：２２０１　

Ｂｉｏｓｃｉ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　

【１０】Ｓｔｅｖｅｖｓ　ＫＡ，Ｓｈｅｌｄｏｍ　ＢＷ，Ｋｌａｐｅｓ　ＮＡ，ｅｔ　．Ｎｉｓｉｎ　ｔｒｅａｔ．　

ｍｅｎｔ　ｆｏｒ　ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　

ｄｅ　Ｖｕｙｓｔ　Ｌ，Ｖａｎｄｍｍｅ　ＥＪ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ　ｏｆ　ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｂａｃ．　

Ｇｒａｍ—ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ【Ｊ】．Ａｐｐｌ　Ｅｎｖｉｏｎ　Ｍｉｒｃｒｏｂｉｏｌ，１９９１，　

５７：３６１３　

ｔｅｒｉａ　ｍｉｃｏｂｉｒｏｌｏｇｙ，ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ【Ｍ】．Ｌｏｎｄｏｎ：