5-Fu尿嘧啶對人體胚胎腎細胞的抑制作用

2024年3月31日發(作者：大全郵箱)

5-Fu尿嘧啶對人體胚胎腎細胞的抑制作用

摘要：

運用MTT測定細胞活力的方法，檢測經過不同濃度的5-氟尿嘧啶培養2天細胞的生

長狀況，計算不同濃度5-FU對細胞生長的抑制率。實驗結果表明，在一定的濃度范圍內，

隨著5-FU濃度的提高，細胞的抑制率也提高；而10ug/ml的5-FU已經對細胞有比較明

顯的抑制作用。5-FU濃度達到150ug/ml左右時對細胞的抑制作用趨于最大，濃度再增

大對細胞的抑制率基本穩定在75%左右不再上升。

5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)，是尿嘧啶5位的氫被氟取代的衍生物，是以抗代

謝物而起作用，在細胞內轉化為有效的氟尿嘧啶脫氧核苷酸后，通過阻斷脫氧核糖尿苷酸

受細胞內胸苷酸合成酶轉化為胸苷酸，而干擾DNA的合成。氟尿嘧啶同樣可以干擾RNA

的合成。常用于治療腫瘤。但由于5-FU對用藥的患者有比較大的毒副作用，為治療結果

帶來更多的不利影響，且此藥通常用于治療胃癌[5]，對宮頸癌細胞會有多大療效，用藥的

濃度等基本的藥理信息還比較缺乏。本實驗用宮頸癌細胞做體外藥物抑制效果實驗，嘗試

探討5-FU對細胞的抑制作用大小以及其用藥濃度，為臨床用藥量研究提供基礎資料。

關鍵詞：5-氟尿嘧啶、細胞、MTT法、抑制率

引言：

MTT法作用原理

MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，

漢語化學名為 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一

種黃顏色的染料。

MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥

珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色（或藍色）結晶甲瓚（Formazan）

并沉積在細胞中；在通常情況下，甲臜生成量與活細胞數成正比。二甲基亞砜（DMSO）

能溶解細胞中的甲瓚，因此用酶聯免疫檢測儀在490nm或570nm波長處測定其光吸收值，

可間接反映活細胞數量。由于死細胞中不含琥珀酸脫氫酶，因此加入MTT不會有反應。該

方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗

以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細胞絕對數。在用酶標儀檢

測結果的時候，為了保證實驗結果的線性，MTT吸光度最好在0-0.7范圍內。同時，利用

已知濃度細胞培養后的吸光度可以生成細胞生長趨勢曲線，通過該曲線可推測出某一未知

濃度細胞的原始接種濃度。

5-氟尿嘧啶抑制癌細胞生長原理

惡性腫瘤患者由于腫瘤細胞無止境地分裂、增殖而不斷地消耗宿主的營養物質，以及

宿主因荷瘤狀態所存在的代謝紊亂，機體常存在不同程度的營養不良，嚴重者導致惡液質，

體質下降。5-氟尿嘧啶能夠抑制癌移植瘤的生長并誘導瘤細胞的凋亡。5-氟尿嘧啶能選擇

性地攻擊DNA堿基的氮原子，特別是鳥嘌呤的第7位氮原子，和胞嘧啶的第3位氮原子

結合。由于和DNA呈交叉聯接，對DNA的構型有明顯影響，使雙螺旋解旋使分子變短；

可與DNA形成鏈內交聯，也可形成鏈間交聯或DNA-蛋白質間的交叉聯結，由于其可使

DNA的模板作用失活，從而抑制DNA合成而抑制腫瘤的生長。