靈芝三萜類藥理作用研究

2024年4月1日發(作者：心太累)

靈芝三萜類藥理作用研究

1．靈芝屬三萜類新化合物

對靈芝脂溶性成分的研究在20世紀80年代達到了高潮，1982 年

Kubota等

[ 2 ]

首次分離到靈芝酸A(ganoderic acid A)和靈芝酸

B(ganoderic acid B) ，1988年從靈芝屬中分離得到103種三萜類新

化合物

[ 3 ]

。

自1991年以來，從靈芝屬真菌的子實體、孢子粉和菌絲體中先后

又分離到19個三萜類新化合物

[ 4～14 ]

，用波譜技術對其化學結構進行

了鑒定。

2．藥理作用

2. 1 保肝作用 王明宇等

[ 15 ]

從赤芝子實體中得到粗組分GT ，

進一步經硅膠柱色譜得5個組分(GT1～GT5) ，經HPLC檢測證實該

GT和GT2 主要含靈芝酸A和赤芝酸A(lucidenic acid A) 。實驗表明

GT和GT2 對四氯化碳、氨基半乳糖苷和卡介苗+脂多糖所致的3種肝

損傷模型小鼠有較好的保肝作用，可明顯降低模型動物的血清ALT和

肝臟TG含量，并不同程度減輕動物肝損傷。在小鼠免疫性肝損傷

(BCG + LPS)原代肝細胞體外培養試驗中，作者觀察到GT(015 ， 510 ，

50 ， 100μg·mL- 1)和GT2(015 ， 210 ，10 ，50μg·mL- 1)可不同

程度地降低損傷肝細胞上清液中ALT活性和NO的含量，與陽性對照

藥馬洛替酯(malotilate)作用相似。

2. 2 抗腫瘤作用 Toth等

[ 16 ]

首先報道了靈芝三萜類化合物的藥

理活性。作者從赤芝菌絲體中提取得到6個有細胞毒活性的三萜類化

合物ganoderic acidU ，V ，W ，X ， Y和Z ，體外實驗表明能明顯

抑制小鼠肝肉瘤(HTC)細胞的增殖。Lin等[ 17 ]從赤芝子實體中分離到

2個三萜類化合物靈芝醛A和雙氫靈芝醛A ，體外實驗表明兩者有較

強的抑瘤活性，對人肝肉瘤細胞和KB細胞ED50值均在1～11μg·mL-

1，以靈芝醛A作用最強。

2. 3 抗HIV21及HIV21蛋白酶活性 Min等

[ 6 ]

從赤芝孢子粉

中分離得到ganoderic acidβ，lucidumol B ，ganodermanondiol ，

ganodermanontriol和ganolucidic acidA。體外試驗表明對HIV21

蛋白酶活性有明顯抑制作用，其IC50分別為20 ，50 ，90 ，70和

70μmol·L- 1;此外，ganoderic acid A ，ganoderic acid B 和

ganoderic acidC1 亦 有 中 度 的 抑 制 作 用， 其IC50 為140～

430μmol·L- 1。作者認為羊毛甾烷型母核C23或C224 ，C225位上

的羥基是其抗HIV21蛋白酶活性的必需基團。Sahar等

[ 5 ]

用生物活性

追蹤法從赤芝子實體的甲醇提取物中分離得到13個化合物。在抗

HIV21活 性 的 初 篩 實 驗 中， 化 合 物ganoderiol F 和

ganodermanontriol可抑制由HIV21誘導的MT24細胞的細胞毒效

應，兩者IC100均為718μg·mL- 1，而且此濃度僅為其細胞毒濃度的

50 %。抗HIV21蛋白酶實驗采用受試物與重組HIV212PR及其合成底

物體外共孵育，15 min 后三氟乙酸(TFA)終止反應，經HPLC方法檢測

水解產物和剩余底物，根據相對峰面積計算IC50值。結果發現

ganoderic acid B和ganoderiol B的抑 制 作 用 最 強( IC50 均 為

0117 mmol·L- 1) ;ganoderiol F ， ganoderic acid C1 ， 3β， 5

α2dihydroxy26β2methoxyergosta27 ，222diene ， ganoderic

acidα， ganodericacid H和ganoderiol A 有中度抑制作用，其

IC50 在0118～0132mmol·L- 1。在對HIV21反轉錄酶的實驗中，13

個化合物在濃度低于0125mmol·L- 1時，均無抑制活性。盡管實驗對

所試化合物的構效關系未能得到明確的結論，但作者認為有Δ7(8)，

Δ9(11)雙鍵結構的羊毛甾烷型三萜化合物與抗HIV21活性密切相關，

而甾醇類化合物(compound 10～12)則無此活性。

2. 4 抑制血管緊張素轉化酶( ACE) Morigiwa

[ 19 ]

報道用

Friedland和Silverstein方法測定10個靈芝三萜類化合物在體外對

ACE酶的作用，發現ganodericacid F 對ACE有抑制作用，其IC50

為417×10- 6mol·L- 1，其他9個化合物IC50在1×10- 5～1×10-

4mol·L- 1范圍內。

2. 5 抑制膽固醇合成 Komoda等

[ 20 ]

報道，用大鼠肝細胞

1×104×g離心得到的亞細胞上清液為體外反應體系，發現羊毛甾醇類

衍生物72酮2羊毛甾282烯23β2醇、14α2甲基2膽甾272烯23β，

15 α2二醇和羊毛甾272烯23β，15 α2二醇均可抑制由羊毛甾或24 ，

252二羥基羊毛甾至膽固醇的生物合成。認為C27位羰基或C215位

α2羥基是抑制膽固醇合成的必需基團。此外，作者經由methyl

ganoderate C人工合成了化合物

VI(252demethyl2lanost272oxo282en27β，15 α2diol) ，證實其在

體外能抑制膽固醇生物合成，藥物終濃度為20和40μmol·L- 1時，

抑 制 率 分 別 為72 %和84 %。Shiao等[ 21 ]在大鼠的高膽固醇飼料

中加入靈芝的菌絲體，可顯著降低血清和肝臟中膽固醇和甘油三酯的

含量，并指出其有效成分是三萜類，主要是ganodermicacid R和S ，

可抑制食物中的膽固醇吸收。目前認為，靈芝中的氧化三萜類化學結

構與哺乳動物膽固醇生物合成途徑中羊毛甾醇后的中間體類似，可抑

制胃腸道吸收食物中的膽固醇。這些氧化三萜類還抑制膽固醇合成過

程中的限速酶 32羥232甲戊二酸單酰輔酶A(HMG2CoA)還原酶，并

因此而抑制膽固醇合成。體外實驗，在考萊烯胺(cholesteramine)預

處理的大鼠肝切片培養中加入靈芝所含的氧化三萜類，可使[ 223H ]醋

酸鹽和[ 2214C ]羥基戊酸參入膽固醇合成減少。可見這些氧化三萜類

還影響膽固醇生物合成過程中羥基戊酸后的環節。

2. 6 鎮痛作用 Koyama等

[ 22 ]

報道，用醋酸扭體法為活性篩選

指標，從靈芝子實體的二氯甲烷提取物部分經硅膠柱色譜和HPLC制

備得到4個具有鎮痛活性的靈芝三萜類化合物：ganoderic acids A ，

B ， G和H。按劑量3～5mg·kg- 1sc 給藥可產生較好的鎮痛效果，

扭體反應抑制率在30 %～64 %( P< 0105) ，其中以ganoderic acid

H效果好。同時，作者對比分析了ganoderic acid H 和 與 其 結 構 十

分 相 似 的compound C6 的鎮痛作用，認為ganoderic acid H作用

強的原因是其C212位上的羥基被乙酰化，由此增加了該化合物的吸收

度，而compound C6 的C212位上的取代基為羥基。

2. 7 對 血 小 板 聚 集 的 影 響 Su 等[ 23～24 ]報 道

ganodermic acid S (GAS ，化學名：lanosta27 ，9(11) ，

242triene23β，15 α2diacetoxy2262oic acid)對TXA2 在人源血小板

中信號傳導途徑的影響。發現GAS對TXA2 擬似物U46619所誘導的

人源硅膠過濾處理的血小板(GFP)聚集具有明顯抑制作用，可延遲血小

板發生形態改變的時間，減少血小板的初始聚集并降低其聚集 百 分 率，

該 抑 制 作 用 有 劑 量 依 賴 性。2μmol·L- 1GAS抑制率即可達到

50 % ;當濃度增加至715和10μmol·L- 1時，可完全抑制血小板聚集，

但不能對抗TXA2 所致血小板形態改變。細胞內[ Ca2 +]i測定顯示

GAS能明顯抑制U46619誘導的血小板內[ Ca2 +]i增加;此外，可強烈

抑制由U46619誘導的二乙酰甘油的形成。這表明GAS可能抑制了

U46619對PLCβ1的誘導活化。TXB2 生成測定實驗顯示GAS可顯著

抑制由U46619誘導的TXB2 生成，提示GAS可能抑制PLA2 的活化。

作者還測定了血小板內cAMP水平，發現單用GAS不影響靜息血小板

細胞的cAMP水平，但是能劑量依賴性地升高PGE1 誘導的血小板內

cAMP水平;U46619能夠抑制PGE1 或PGE1 + GAS誘導的血小板

cAMP水平增高，其抑制率可達40 % ，表明GAS不能對抗U46619

的這一抑制作用。作者采用蛋白免疫印跡法檢測了血小板中蛋白2酪

氨酸磷酸化的形成，結果顯示GAS對早期的蛋白2酪氨酸磷酸化無抑

制作用，但可明顯抑制第2、第3期的磷酸化反應，對p53～58及

p51的抑制率可達30 % ;與此同時，對其余蛋白質磷酸化反應的抑制

率則超過70 %。提示GAS可能抑制了與整合蛋白αII b β3 啟動及血

小板聚集有密切相關的蛋白2酪氨酸磷酸化過程。根據這些實驗研究

結果，作者認為GAS是通過抑制血小板2TXA2 反應系統中

TXRα2Gq2PLCβ1信號傳導通道的蛋白2酪氨酸磷酸化過程，使二乙

酰甘油和[ Ca2 +]i水平降低，最終抑制血小板的脫顆粒和聚集; GAS并

不影響血小板2TXA2 反應系統中的另一信號傳導通道TXRβ2Gi。推測

這兩個通道的脂質微環境有所不同， GAS 可能更易于與前者的微脂質

區結合，從而抑制該通道的信號傳導。

2. 8 抑制真核細胞D NA多聚酶活性 Mizushina等

[ 29 ]

從赤芝

中分離得到2個新三萜類化 合 物lucidenic acid O 和lucidenic

lactone ，兩者在體外對真核細胞DNA多聚酶的活性都有選擇性抑制

作用。Lucidenic acid O和lucidenic lactone 不僅對小牛DNA多聚

酶α和大鼠DNA多聚酶β，而且對HIV21反轉錄酶亦有抑制作用，

但是對原核細胞DNA多聚酶和其他DNA代謝酶，如T7 RNA多聚酶、

DNA酶I的活性沒有影響。

3.展望

有悠久藥用歷史的靈芝是中醫藥學寶庫中的珍品，擁有廣泛的生

物活性。靈芝所含的三萜類化合物結構復雜，分子中功能基團較多，

目前除了少數化合物進行了藥理活性研究之外，多數未進行活性研究。

有必要采用現代科學技術方法對其藥理作用、構效關系、作用機理等

方面進行深入和系統地研究，為開發利用靈芝資源打下堅實的基礎。