5-Fu在新一代結(jié)腸癌PDX模型中治療劑量的研究

2024年3月31日發(fā)(作者：奇聞趣事)

10

［

文章編號(hào)

］

1000-2200(2021)01-0010-05

J

Bengbu

Med

Coll

,

January

2021

,

Vol.

46

,

No.

1

?

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

?

5-Fu

在新一代結(jié)腸癌

PDX

模型中治療劑量的研究

劉

靖

1

，

陳

戰(zhàn)

1

，

李

鵬

2

，

李

迪

2

，

涂永久

1

［

摘要

］

目的

:

建立結(jié)直腸癌病人來(lái)源的異種移植

(

PDX)

模型

，

探討氟尿嘧啶

(

5-fluorouracil,5-Fu)

的藥效

、

毒性與給藥劑量之

間的關(guān)系

。

方法

:

將新鮮的結(jié)直腸癌手術(shù)標(biāo)本移植至免疫缺陷小鼠皮下

，

建立

PDX

模型并穩(wěn)定傳代

,

檢測(cè)模型的溯源性

;

分別

給予

5

、

10

、

20

、

40

、

60

mg/kg

濃度的

5-Fu,

測(cè)量腫瘤體積

、小鼠體質(zhì)量變化和死亡情況等

。

結(jié)果

:

成功建立

PDX

模型

，

溯源性高

達(dá)

99.

96%

。

5-Fu

5

、

10

、

20

、

40

、

60

mg/kg

劑量組對(duì)應(yīng)的腫瘤抑制率分別為

33%

、

49%

、

68%

、

92%

,100%

。

其中

,40

mg/kg

劑量

組小鼠體質(zhì)量劇減

,60

mg/kg

劑量組死亡率達(dá)

100%

o

結(jié)論

：

5-Fu

的體內(nèi)抑瘤效果及毒性與劑量密切相關(guān)

,10

~

20

mg/kg

劑量

的

5-Fu

較適合

PDX

模型的藥效評(píng)價(jià)。

［

關(guān)鍵詞

］

結(jié)直腸腫瘤

;

氟尿嘧啶

;

病人來(lái)源腫瘤異種移植

［

中圖法分類號(hào)］

R

735.

3

［

文獻(xiàn)標(biāo)志碼

］

A

DOI

：

10.13898/.

issn.

1000-2200.

2021

.

01

.

003

Study

on

the

therapeutic

do

of

5-fluorouracil

in

a

new

generation

PDX

model

of

colon

cancer

LIU

Jing

1

,CHEN

Zhan

1

,LI

Peng

2

,LI

Di

2

,TU

Yong-jiu

1

(1.

Department

of

General

Surgery

,

Chenggong

Hospital

Affiliated

to

Xiamen

University

,

Xiamen

Fujian

361000

；

2.

Department

of

General

Surgery

,

Xiang

'

an

Hospital

Affiliated

to

Xiamen

University,

Xiamen

Fujian

361102

,

China)

［

Abstract

］

Objective

:

To

establish

the

patient-derived

tumor

xenografts

(

PDX

)

model

of

colorectal

cancer

(

CRC

)

,

and

explore

the

relationship

among

the

anticancer

effects,

toxicity

and

do

of

5-fluorouracil

(

5-Fu)

.

Methods

：

The

fresh

human

CRC

tissues

were

subcutaneously

transplanted

into

immunodeficient

mice

to

establish

a

PDX

model,and

the

traceability

of

the

test

model

was

detected.

The

mice

were

treated

with

5,10,20,40

and

60

mg/kg

of

5-Fu,

respectively,

and

the

tumor

volume

,

body

mass

and

mortality

were

measured.

Results

：

The

PDX

model

was

successfully

established,and

the

traceability

was

99.

96%

.

The

tumor

inhibition

rates

of

5,10,

20,40

and

60

mg/kg

of

5-Fu

were

33%

,49%

,68%

,92%

and

100%

,

respectively.

Among

them

,

the

body

weight

of

mice

significantly

lost

in

40

mg/kg

do

group

,

and

the

mortality

of

60

mg/kg

do

group

was

100%

.

Conclusions

:

The

efficacy

and

toxicity

of

5-Fu

are

cloly

related

to

the

dos

,

and

the

10

-

20

mg/kg

of

5-Fu

is

suitable

for

the

efficacy

evaluation

of

PDX

model.

［

Key

words

］

colorectal

neoplasms

；

5-fluorouracil

；

patient-derived

tumor

xenografts

結(jié)腸癌為臨床常見(jiàn)的消化類疾病

，

屬于惡性腫

瘤之一

，

發(fā)病率較高

［

l

］

o

早期結(jié)腸癌手術(shù)治療后

5

性

、

分子多樣性以及微環(huán)境

,

為評(píng)估藥效

、

解決臨床

治療難題奠定研究基礎(chǔ)

，

是新型的有效的腫瘤研工

具⑷

。

臨床常用的抗結(jié)腸癌藥物

，

如氟尿嘧啶

（5-

fluorouracil,5-Fu

）

、

奧沙利鉑

、

吉西他濱和伊立替康

等都有一定的不良反應(yīng)

。

其中

,5-Fu

常被用作陽(yáng)性

年生存率可達(dá)

90%

~95%

,

而晚期僅有

5%

⑵

。

因

此

，

對(duì)于晚期結(jié)腸癌的病人

，

根治術(shù)治療已經(jīng)不再適

合

，

臨床多用化療藥物來(lái)減小病灶

、

緩解癥狀

，

以達(dá)

到延長(zhǎng)病人生存期

、

提高生活質(zhì)量的目的

。

新型化

療藥物及靶向藥物不斷出現(xiàn)

，

但新藥在進(jìn)入芋期臨

床試驗(yàn)過(guò)程中超過(guò)

95%

會(huì)被淘汰

［

3

］

，

因此

，

更精準(zhǔn)

的臨床前體內(nèi)試驗(yàn)是必要的

。

新一代動(dòng)物模型

—

—

藥對(duì)照來(lái)間接評(píng)價(jià)新藥的藥效

，

但不同研究者采用

5-Fu

作為陽(yáng)性藥時(shí)使用的藥物劑量不一

，

藥效與毒

性差異很大

。

本研究對(duì)

5-Fu

在

PDX

模型中的藥效

與毒性進(jìn)行研究

，

評(píng)價(jià)

5-Fu

的藥效和毒性與給藥劑

病人來(lái)源腫瘤異種移植模型

（

patient-derived

tumor

xeno

grafts,PDX

）

應(yīng)運(yùn)而生

。

PDX

是將病人的腫瘤直

接接種到高度免疫缺陷小鼠體內(nèi)而建立起來(lái)的動(dòng)物

模型,該模型能夠保持原代腫瘤的異質(zhì)性

、

組織學(xué)特

［

收稿日期

］

2019

-09

-06

［

修回日期

］

2020

-05

-27

量之間的關(guān)系

，

以期為

5-Fu

在

PDX

模型中作為陽(yáng)

性藥對(duì)照時(shí)的劑量選擇提供參考

。

現(xiàn)作報(bào)道

。

1

材料與方法

1

.

1

試劑與動(dòng)物

5-Fu

為

Sigma

公司

（

美國(guó)

）

產(chǎn)

［

作者單位

］

1.

廈門(mén)大學(xué)附屬成功醫(yī)院普通外科

，

福建廈門(mén)

品

。

青霉素鏈霉素溶液

、

RPMI-1640

培養(yǎng)基為

Gibco

公司

（

美國(guó)

）

產(chǎn)品

。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取

SPF

級(jí)雌性

NCG

小鼠

（

4

~6

周齡

,

體質(zhì)量

15

~20

g

）

,SPF

級(jí)雌性

361000

；

2.

廈門(mén)大學(xué)翔安附屬醫(yī)院普通外科

，

福建廈

門(mén)

361102

［

作者簡(jiǎn)介

］

劉靖

（

1982

-

）

,

男

，

碩士研究生

，

主治醫(yī)師

.

［

通信作者

］

涂永久

，

博士

，

主任醫(yī)師

.

E-mail

:

707581

937@

qq.

com

BALB/c

裸鼠

（

6~7

周齡

,

體質(zhì)量

22

~25

g

）

,

均購(gòu)自

蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)

2021

年

1

月第

46

卷第

1

期

11

南京大學(xué)南京生物醫(yī)藥研究院

:

SCXK(

蘇

)2015-

后續(xù)實(shí)驗(yàn)

。

取各代組織

，

進(jìn)行基因分型及組織病理

檢測(cè)

，

分析腫瘤組織的溯源性

。

0001

]

,

飼養(yǎng)于廈門(mén)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心

SPF

級(jí)屏障

設(shè)施中

[

SYXK

(

閩

)

2018-0009

]

,

環(huán)境溫度

23

~

25

益

，

相對(duì)濕度

40

%

,12

h

晝夜交替

,

飼料經(jīng)輻照處

理

，

飲用水經(jīng)高壓滅菌處理

，

動(dòng)物自由攝食和飲水

。

1.2

樣本收集

腫瘤標(biāo)本來(lái)自廈門(mén)大學(xué)附屬成功

1.4

分組與給藥

將選取的荷瘤鼠腫瘤剪切成均

勻的小塊

，

分別接種于裸鼠皮下

。

當(dāng)

3

代移植瘤

(

P3)

增長(zhǎng)至約

150

mm

3

時(shí)

，

選取瘤體大小均一的裸

鼠

30

只

，

隨機(jī)分為

6

組

(

n

=6)

。

空白對(duì)照組腹腔

醫(yī)院接受手術(shù)的結(jié)直腸癌病人

，

經(jīng)腸鏡病理明確診

斷為結(jié)直腸癌

，

行手術(shù)切除結(jié)直腸癌病灶

。

經(jīng)過(guò)病

人本人及家屬同意

，

僅供實(shí)驗(yàn)研究

。

病人新鮮的腫

注射

0.9%

氯化鈉溶液

，

另外

5

組分別腹腔注射

5

、

10

、

20

、

40

、

60

mg/kg5-Fu,

每天

1

次

，

連續(xù)

5

d

。

1.5

觀察指標(biāo)

治療開(kāi)始后

,

每天觀察動(dòng)物一般狀

況并記錄

，

間隔

2

d

測(cè)一次小鼠體質(zhì)量

、

腫瘤體積

。

游標(biāo)卡尺測(cè)量皮下腫瘤的長(zhǎng)度記為

(L)

,

寬度記為

瘤組織命名為

P0

代

。

P0

代組織應(yīng)在標(biāo)本離體

30

min

內(nèi)于手術(shù)室采集完成

，

避開(kāi)液化壞死區(qū)域

，

將

腫瘤組織切成小塊

，

置于含

1%

青霉素鏈霉素的

(W)

,

根據(jù)公式

1/2

x

(W

2

XL)

計(jì)算腫瘤體積

。

當(dāng)

瘤體積達(dá)到約

2

000

mm

3

或飼養(yǎng)時(shí)間達(dá)到

48

d

，

無(wú)

論哪個(gè)數(shù)據(jù)先達(dá)到即終止該組實(shí)驗(yàn)

。

分離各組腫

RPMI-1640

培養(yǎng)基中

，

冰浴保存

，

用于構(gòu)建動(dòng)物

模型

。

1.3

PDX

模型的建立

于超凈工作臺(tái)

，

用無(wú)菌器

械去凈腫瘤周?chē)Y(jié)締組織和液化壞死區(qū)域

，

組織修

瘤

，

稱量瘤體質(zhì)量,計(jì)算抑制率

。

抑瘤率

(％)=(

對(duì)

照組平均瘤質(zhì)量

-

實(shí)驗(yàn)組平均瘤質(zhì)量)

/

對(duì)照組平

剪成

3

mm

X

3

mm

X

3

mm

左右小塊

,

再用含

1%

青

霉素鏈霉素的

RPMI-1640

培養(yǎng)基洗滌

3

次

,

每次約

5

min

。

用

75%

乙醇消毒已麻醉的

NCG

小鼠側(cè)部皮

膚

，

輕拉皮膚

，

套管針刺入皮下

，

輕推針心將組織塞

均瘤質(zhì)量

X

100%

。

摘取肺

、

脾

、

胸腺

、

肝稱量質(zhì)量

,

分析各臟器變化

。

其中

，

脾

(

胸腺

/

肺

/

肝

)

指數(shù)

(

mg/

10

g)

=

脾

(

胸腺

/

肺

/

肝

)

質(zhì)量

/

小鼠體質(zhì)量

X10

。

1.6

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用方差分析和

q

檢驗(yàn)

。

2

結(jié)果

2.1

PDX

建模情況

連續(xù)測(cè)定移植瘤體積

，

結(jié)果

入皮下

，

消毒穿刺點(diǎn)

。

種植部位發(fā)現(xiàn)明顯腫瘤生長(zhǎng)

為種植成功

(

命名為

P1

代

)

，

按照

V

=

1/2

X

長(zhǎng)

X

寬

2

計(jì)算腫瘤體積

，

待腫瘤體積長(zhǎng)至

1

000

mm

3

左右時(shí)

無(wú)菌條件下頸椎脫臼法處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并取腫瘤

。

病

人來(lái)源腫瘤組織移植成瘤率關(guān)鍵環(huán)節(jié)

,

P1

代實(shí)驗(yàn)動(dòng)

顯示

PDX

原代模型

(

P1

)

在接種后

20

d

左右成功形

成瘤體

，

在接種部位觸及結(jié)節(jié)質(zhì)硬

、

活動(dòng)度差

,49

~

物選用高度免疫鼠

NCG

小鼠

,

有助于提高成瘤率

。

成瘤后

，

移植瘤的生長(zhǎng)就相對(duì)穩(wěn)定

，

后續(xù)實(shí)驗(yàn)則改用

BALB/c

裸鼠作為動(dòng)物模型

。

同樣方法種植于

56

d

腫瘤體積可以達(dá)到傳代要求

。

腫瘤傳代后

(P2)

生長(zhǎng)速度明顯快于

P1

代

(

P

<0.01)(

見(jiàn)表

1

、

圖

1A),

符合腫瘤生長(zhǎng)的特點(diǎn)

。

基因檢測(cè)結(jié)果顯示

,

經(jīng)過(guò)傳代后

,

腫瘤組織與病人術(shù)后

P0

代腫瘤組織同

源性為

99.96%

。

組織病理切片染色

，

也顯示各代

BALB/c

裸鼠

，

每例

P1

代腫瘤種植

2

只小鼠

，

種植

部位發(fā)現(xiàn)明顯腫瘤生長(zhǎng)為種植成功

(

命名為

P2

代)

。

從

P2

代中選出生長(zhǎng)良好的荷瘤鼠腫瘤

，

進(jìn)行

腫瘤組織差異不大

(

見(jiàn)圖

1B)

。

A

：

P1

代荷瘤小鼠

；

B

：

P2

代荷瘤小鼠

；

C

：

P1

代荷瘤小鼠腫瘤組織HE染色

；

D

：

P2

代荷瘤小鼠腫瘤組織

HE

染色

圖

1

PDX

模型生長(zhǎng)情況

2.2

5-Fu

抗腫瘤效果

與空白對(duì)照組比較

,5

mg/

死

，

有復(fù)發(fā)的趨勢(shì)

。

40

mg/kg

劑量組與空白對(duì)照組

相比差異顯著

(

P

<0.01),

較早出現(xiàn)壞死

，

與

20

mg/

kg

劑量組腫瘤體積增長(zhǎng)變緩

(

P

<0.01)

。

10

mg/kg

劑量組腫瘤體積抑制較

5

mg/kg

組更加明顯

(

P

<

0.01),

但瘤體未出現(xiàn)壞死

。

20

mg/kg

劑量組腫瘤

kg

劑量組比較壞死周邊無(wú)殘留瘤組織

，

繼而出現(xiàn)結(jié)

痂

，

在

39

d

時(shí)出現(xiàn)治愈情況

。

60

mg/kg

劑量組的腫

瘤體積基本沒(méi)有增長(zhǎng)的趨勢(shì)

，

抑制效果最顯著

,

但同

細(xì)胞主要聚集于腫瘤塊周?chē)?/p>

，

中央的細(xì)胞大部分壞

12

J

Bengbu

Med

Coll

,

January

2021

,

Vol.

46

,

No.

1

時(shí)不良反應(yīng)也大

，

小鼠日漸消瘦

，

10

d

內(nèi)出現(xiàn)死亡

（

見(jiàn)表

2

、

圖

2

）

。

實(shí)驗(yàn)終止時(shí)

，

剝離腫瘤稱質(zhì)量

，

計(jì)

算抑制率

,5、

10

、

20

、

40

、

60

mg/kg

劑量組對(duì)應(yīng)的腫

質(zhì)量變化率逐漸降低

（

P

<0.01

）

（

見(jiàn)表

3

）

。

40

mg/

kg

劑量組小鼠體質(zhì)量先下降

，

小鼠狀態(tài)較差

、

消瘦

、

活動(dòng)能力減弱

，

但后期有逐步恢復(fù)的趨勢(shì)

。

60

mg/

瘤抑制率分別為

33%

、

49%

、

68%

、

92%

和

100%

。

表

1

P1

和

P2

代小鼠不同時(shí)間點(diǎn)移植瘤體積變化情況

（

n

=6

；

x

士

s

）

分組

------------------

小鼠移植瘤體積/訕

3

kg

劑量組小鼠體質(zhì)量急劇下降

，

出現(xiàn)嚴(yán)重便秘現(xiàn)

象

，

在

12

d

就開(kāi)始出現(xiàn)死亡

，

在

21

d

全組小鼠均死

亡

，

死亡率為

100%

。

2.4

5-Fu

對(duì)荷瘤小鼠各組織毒性

5

、

10

mg/kg

組

小鼠肺

、

脾

、

胸腺和肝指數(shù)與空白對(duì)照組差異均無(wú)統(tǒng)

7

d

21

d

35

d

340.99

±31.88

49

d

P1

代

26.

91

±0.67116.76±17.45

839.07

±54.83

—

—

計(jì)學(xué)意義

（

P

>0.

05

）

；

20

mg/kg

組小鼠脾指數(shù)明顯

巴

代

t

86.32

±1.65

360.26±18.81

1243.39

±45.86

39.

58

<0.01

高于空白對(duì)照組

，

胸腺指數(shù)明顯低于空白對(duì)照組

（

P

<0.01

）

；

40

mg/kg

組小鼠肺

、

脾

、

胸腺和肝指數(shù)

與空白對(duì)照組

、

20

mg/kg

組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

81.

72

23.

25

<0.

01

P

<0.01

—

2.3

5-Fu

對(duì)荷瘤小鼠體質(zhì)量和存活率的影響

隨

（

P

<0.05

~

P

<0.01

）

（

見(jiàn)表

4

）

。

5-Fu

劑量增加

，

10

、

20

、

40

、

60

mg/kg

劑量組小鼠體

表

2

各組小鼠不同時(shí)間點(diǎn)的腫瘤體積比較

（

n

；

=6

;

x

士

s

;

mm

3

）

分組

3

d

288.47

±6.03

213.95

±3.93

*

*

217.71

±7.06

*

*

9d

507.

25

士

26.

13

371.45

士

15.09

*

270.84

士

12.04

*

*##

*##

15

d

876.

60

士

29.

22

580.38

士

13.24

*

*

21

d

空白對(duì)照組

1

349.46

±43.02

831.03

±43.42

*

*

594.35

±10.45

*

*##

5

mg/kg

組

10

mg/kg

組

20

mg/kg

組

436.64

士

17.29

*

*##

190.

71

士

4.

61

*

168.62

±4.08

*

*

##▲銀

*

##▲▲△△

*

##▲▲△△

257.

85

士

6.

31

*

234.

29

士

7.

29

*

356.50

士

31.95

*

278.75

士

15.07

*

—

*

##

▲銀

*

##▲

▲△吟

482.66

±53.68

*

373.10

士

22.90

*

—

*##▲

*##▲▲△

40

mg/kg

組

60

mg/kg

組

*

##▲

*

##▲▲△△

▽

160.73

±2.69

*

262.

00

<

0.

01

192.

43

士

4.

38

*

204.

60

<

0.

01

39

830.

000

F

322.

70

<

0.

01

310.

70

<

0.

01

P

MS

組內(nèi)

分組

6

408.

000

27

d

1

715.05

±74.87

1

272.22

±45.63

*

*

821.81

±29.29

*

583.

33

士

28.

91

*

166

300.

000

33

d

1

966.

49

士

82.

70

1

620.73

±36.82

*

*

1

087.

14

士

85.

19

**##

668.52

±34.50

*

*##

▲銀

—

—

450

600.

000

39

d

空白對(duì)照組

2

384.

00

士

67.

37

1

823.

92

士

53.

7

**

1

269.

14

士

27.

59

**##

733.05

±35.43

**##▲▲

—

—

5

mg/kg

組

10

mg/kg

組

20

mg/kg

組

*##

*

##▲銀

*

##

▲▲吟

40

mg/kg

組

60

mg/kg

組

439.71

±37.46

*

—

F

382.

20

<

0.

01

237.

00

<

0.

01

642.

50

<

0.

01

P

MS

組內(nèi)

824

300.

000986

100.

000

1

517

000.

000

q

檢驗(yàn)

：

與空白對(duì)照組比較

*

*P

<0.01

；

與

5

mg/kg組比較

##

P

<0.01

；與

10

mg/kg

組比較

▲

”

<0.05

，銀

▲P

<0.01

；

與

20

mg/kg

組比較

△

P

<0.05,AAP

<0.01

；

與

40

mg/kg

組比較

▽

P

<0.05

空白對(duì)臆組

5

mg/kg

組

10

mg/kg

組

20

mg/kg

組

40

mg/kg

組

60

mg/kg

組

圖

2

各組小鼠瘤體典型圖片

蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)

2021

年

1

月第

46

卷第

1

期

表

3

各組小鼠體質(zhì)量變化情況比較

（

n

：

=6

;

x

±

s

)

分組

13

小鼠體質(zhì)量變化率

/%

6

d

12

d

18

d

120.66±4.20

24

d

30

d

空白對(duì)照組

106.28

±5.42

110.19±2.76

116.21

±3.70

119.41

±2.58

126.

97

±4.53

131.53±3.25

*##

*##

133.29

±6.18

5

mg/kg

組

10

mg/kg

組

125.51

±2.81

*

*##

134.69±4.22

*##

*##

104.53

±3.16

##

102.70±2.52

##

97.80

±2.16

*

*##

銀▲△吟

106.34±3.83

*

106.67

±2.69

*

111.30±3.41

*

110.28±2.44

*

117.17±3.63

*

113.54±2.26

*

120.76

±4.57

*

*

##

20

mg/kg

組

*

##

▲銀

*

##▲▲△△

118.80±2.34

*

*

##

40

mg/kg

組

60

mg/

kg

組

87.91

±2.04

*

_

91.89±2.08

*

*

:##

▲▲△△

▽▽

82.48

±1.54

*

*##

▲▲△△

▽▽

75.57

±2.08

*

*

##▲

▲△吟

▽▽

95.98

±2.45

*

90.17±2.14

*

*

##▲▲△△

*

##▲▲

△△

g]

65

±

1

91

*

*##▲▲△△

—

F

24.31

<0.01

1

042.

00

146.

50

161.60

<0.

01

160.60

P

MS

組內(nèi)

<0.01

7

606.

000

<0.01

<0.01

10.457

1

370.

000

1

734.

000

2

762.

000

q

檢驗(yàn)

:

與空白對(duì)照組比較*

P

<0.05,

*

*P

<0.01

；

與

5

mg/kg

組比較##

P

<0.

01

；

與

10

mg/kg

組比較

銀銀

卩

<0.01

；

與

20

mg/kg

組比較

吟吟

卩

<0.01

；

與

40

mg/kg

組比較

▽

▽

P

<0.

01

表

4

各組小鼠各臟器質(zhì)量指數(shù)比較

（

x

±

s

）

分組

n

6

6

6

6

肺指數(shù)

脾指數(shù)

胸腺指數(shù)

0.21

±0.02

0.19±0.03

肝指數(shù)

1.26±0.

12

1.24±0.

10

空白對(duì)照組

0.19±0.02

0.18

±0.02

0.18

±0.03

1.2±0.09

5

mg/kg

組1.2±0.11

1.4±0.15

2.

1

±0.

18

**##▲▲

10

mg/kg

組

20

mg/kg

組

0.18

±0.03

1.32±0.15

1.37

±0.120.19±0.01

0.12±0.02

*

*

##

▲銀

40

mg/kg

組

F

P

4

—

—

—

0.14±0.01

…

##

▲

▲△吟

4.

34

4.4±0.12

*

*

##

▲

▲△吟

441.

40

<0.01

0.06±0.01

**##

▲

▲△吟

27.

19

<0.01

1.04±0.09

*^▲△吟

5.14

<0.01

0.

01

0.

002

MS

組內(nèi)

△

吟

P

<0.01

8.

161

0.

187

0.

073

q

檢驗(yàn)

：

與空白對(duì)照組比較

*

P

<0.05,

*

*P

<0.01

；

與

5

mg/kg

組比較

##

P

<0.01

；

與

10

mg/kg

組比較

銀銀

尸

<0.01

；

與

20

mg/kg

組比較

3

討論

PDX

模型較好地保持了原發(fā)性瘤中大多數(shù)的

模型中采用

5-Fu

作為陽(yáng)性藥

，

其劑量為

33

mg/kg,

腹腔注射

，

每周

2

次

,

周期為

32

d

。

CIOMEI

等

［

9

］

在

人結(jié)腸癌細(xì)胞株

HCT-116

裸鼠腫瘤模型研究中采

用了

50

mg/kg

的劑量

。

HARRIS

等

［

10］

在人結(jié)腸癌

關(guān)鍵基因和信號(hào)通路活性

，

能夠更好地模擬腫瘤病

人親本基因?qū)W特征

，

且不同腫瘤病人來(lái)源的

PDX

模

型其生物學(xué)和遺傳學(xué)特性會(huì)有所不同

,

恰好滿足靶

細(xì)胞株

HT29

裸鼠腫瘤模型研究中采用了

65

mg/kg

的劑量

。

不同文獻(xiàn)報(bào)道的劑量

、

給藥方式

、

給藥周期

等都各有差異

。

但是

,

在新一代模型一

PDX

模型

上尚未有研究

。

向藥物篩選和個(gè)體化治療的要求

［

5

］

。

因此

,PDX

模

型的應(yīng)用具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)

。

傳統(tǒng)評(píng)價(jià)新藥藥效的體內(nèi)試驗(yàn)

,

模型常選用腫

本研究首次探討

5-Fu

在

PDX

模型中的適宜用

瘤細(xì)胞株異種移植模型

，

化療方案的陽(yáng)性對(duì)照藥物

量

，

結(jié)果顯示

，

模型動(dòng)物的抑瘤效果與

5-Fu

的劑量

關(guān)系密切

，

毒性也是如此

。

60

mg/kg

高劑量表現(xiàn)為

常選用

5-Fu

。

但是

，

不同劑量的

5-Fu

所表現(xiàn)的藥效

與毒性差異很大

,

若試驗(yàn)中選用的劑量不合適

，

可能

會(huì)因藥效不好或毒性過(guò)大引起動(dòng)物死亡率過(guò)高進(jìn)而

高毒性

，

模型動(dòng)物出現(xiàn)死亡

，

不適合應(yīng)用

。

40

mg/kg

抑瘤效果好

,

但毒性也較大

，

預(yù)測(cè)動(dòng)物需要有一段時(shí)

間的機(jī)體機(jī)能恢復(fù)期

。

20

mg/kg劑量抑瘤效果好

,

毒性小

，

模型動(dòng)物體質(zhì)量

、

組織變化小

，

尤其是對(duì)免

發(fā)揮不了陽(yáng)性藥的對(duì)照效果

。

已有報(bào)道

［

6

］

對(duì)

5-Fu

在小鼠結(jié)腸癌模型中的藥

效與毒性做了研究

，

為該藥作為陽(yáng)性藥時(shí)的劑量選

疫系統(tǒng)一脾

、

胸腺及肝臟等組織影響小

。

根據(jù)本

擇提供參考

。

朱磊等

［7

］

在人結(jié)腸癌細(xì)胞株

CT26

裸

研究結(jié)果

，

推測(cè)在用藥療程上做細(xì)致研究

，

有望達(dá)到

治愈療效

。

而

10

mg/kg

劑量有抑制效果

，

但較

鼠結(jié)腸癌模型中采用

5-Fu

作為陽(yáng)性藥

，

其劑量為

20

mg/kg,

灌胃給藥

，

每天

1

次

，

周期

10

d

。

CLSACK

等

［

8

］

在人結(jié)腸癌細(xì)胞株

LoVo

裸鼠結(jié)腸癌

20

mg/kg

劑量療效弱

。

（

下轉(zhuǎn)第

17

頁(yè)

）

蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)

2021

年

1

月第

46

卷第

1

期

17

Anesthesiology

,2012,116(5)

：

1104.

[9]

WL

J,

YAN

Z,

SCHWARTZ

DE,

et

al. Activation

of

NLRP3

inflammasome

in

alveolar

macrophages

contributes

to

mechanical

stretch-induced

lung

inflammation

and

injury

[

J].

J

Immunol

,

綜上

，

丙泊酚對(duì)

LPS

誘導(dǎo)的急性肺損傷的保護(hù)

作用可能與抑制

NLRP3

信號(hào)通路有關(guān)

。

[

參考文獻(xiàn)

]

[1]

Y

L

JB

, YAO

SL.

Effect

of

heme

oxygena-endogenous

carbon

monoxide

on

mortality

during

ptic

shock

in

rats

[J].

Ir

J

Med

Sci,2009,178(4)

：

491.

2013,190(7)

：

3590.

[10]

TSCHOPP

J,SCHRODER

K.

NLRP3

inflammasome

activation

:

[2]

吳麗麗

，

余劍波

,

宮麗榮

，

等

.

活化蛋白

-1

在大鼠內(nèi)毒素性肺

損傷時(shí)血紅素加氧酶

-1

上調(diào)中的作用

[J].

中華麻醉學(xué)雜志

，

the

convergence

of

multiple

signaling

pathways

on

ROS

production

?

[J].

Nat

Rev

Immunol

,2010,10(3)

：

210.

[11]

2012,32(9):1146.

GLLCIN

I,

ALICI

HA

,

CESLR

M.

Determination

of

in

vitro

[3]

[4]

王宏

，

劉剛

，

符煒

.Nrf2

在丙泊酚抑制內(nèi)毒素性急性肺損傷中

的作用

[J].

中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)

,2013,29(9)

：

1286.

GRAILER

JJ,CANNING

BA

,

KALBITZ

M,et

al.

Critical

role

for

antioxidant

and

radical

scavenging

activities

of

propofol[

J]

.

Chem

Pharm

Bull,2005,53

(3)

：

281.

[12]

KOBAYASHI

K,

YOSHINO

F,

TAKAHASHI

SS,

et

al.

Direct

the

NLRP3

inflammasome

during

acute

lung

injury

[

J

] .

J

asssments

of

the

antioxidant

effects

of

propofol

medium

chain

triglyceride/long

chain

triglyceride

on

the

brain

of

stroke-prone

Immunol

,2014,192(12)

：

5974

.

[5]

LLO

G,

ZHL

G,

YLAN

D,

et

al.

Propofol

alleviates

acute

lung

injury

following

orthotopic

autologous

liver

transplantation

in

rats

spontaneously

hyperternsive

rats

using

electron

spin

resonance

spectroscopy[

J]

.

Anesthesiology,2008,109(3)

:423.

[13]

via

inhibition

of

the

NADPH

oxida

pathway

[J]

.

Mol

Med

Rep

,

XL

JJ

,

WANG

YL.

Propofol

attenuation

of

hydrogen

peroxide

-

2015,11(3)

：

2348.

[6]

mediated

oxidative

stress

and

apoptosis

in

cultured

cardiomyocytes

involves

haeme

oxygena-1

[

J

]

.

Eur

J

ZHOL

R,

TARDIVEL

A,

THORENS

B,

et

al.

Thioredoxin

-

interacting

protein

links

oxidative

stress

to

inflammasome

activation

[

J

].

Nat

Immunol,2010

,11(2)

:

136.

Anaesthesiol,2008,25(

5)

:395.

[14]

LLO

G,

ZHL

G,

YLAN

D,

et

al.

Propofol

alleviates

acute

lung

injury

following

orthotopic

autologous

liver

transplantation

in

rats

[7]

DOLINARY

T

,

KIM

YS,

HOWRYLAK

J,

et

al.

Inflammasome-

regulated

cytokines

are

critical

mediators

of

acute

lung

injury[

J]

.

via

inhibition

of

the

NADPH

oxida

pathway[

J]

.

Mol

Med

Rep,

2015,11(3)

:2348.

Am

J

Respir

Crit

Care

Med,2012

,185(11)

:

1225.

[8]

KLIPERS

MT,ASLAMI

H,JANCZY

JR,et

al.

Ventilator-induced

lung

injury

is

mediated

by

the

NLRP3

inflammasome

[

J

]

.

(

本文編輯盧玉清

)

(

上接第

13

頁(yè)

)

[6]

唐雪蓮

，

付京劃

,

楊新穎

，

等

.5

-氟尿嘧啶在小鼠結(jié)腸癌模型中

的藥效與毒性評(píng)價(jià)研究

[J].

華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)

,2012,33

綜上

，

10

~20

mg

/kg

劑量的

5-Fu

較適合于

PDX

模型的藥效評(píng)價(jià)

，

可為其他

PDX

模型應(yīng)用

(4)

:535.

[7]

5-Fu

治療時(shí)提供用藥參考

。

[

參考文獻(xiàn)

]

[1]

朱磊

，

盧靜波

,

陳靠山

.5

-

氟尿嘧啶聯(lián)用擬康氏木霉胞外多糖

對(duì)結(jié)腸癌移植瘤小鼠的抑瘤作用

[J].

皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)

,

2016,35(2):117.

MATTHEW

B,

TIMOTHY

P,

CHRISTOS

SK.

First-line

therapy

for

metastatic

colorectal

cancer:

Current

perspectives

and

future

[8]

CLSACK

JC,

LIL

R,

XIA

LJ,

et

al.

NPI-0052

enhances

tumoricidal

respon

to

conventional

cancer

therapy

in

a

colon

cancer

model[

J]

.

Clin

Cancer

Res,2006,12(22)

:6758.

directions[

J]

.

Asia

Pac

J

Clin

Oncol,2019,15(1)

:3.

[2]

毛躍偉

，

楊松鵬

，

高磊

，

等

.

奧沙利鉑聯(lián)合卡培他濱治療晚期

結(jié)腸癌的臨床研究

[J].

中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志

,2016,32(14)

:

1286.

[

9

]

CIOMEI

M,CROCI

V,CIAVOLELLA

A,

et

al.

Antitumor

efficacy

of

edotecarin

as

a

single

agent

and

in

combination

with

chemotherapy

agents

in

a

xenograft

model[

J]

.

Clin

Cancer

Res,

[3]

[4]

張家洧

，

楊云柯

.

結(jié)直腸癌人體腫瘤移植小鼠模型的研究進(jìn)

展

[J].

復(fù)旦學(xué)報(bào)

,2018,45(4)

：

561.

2006,12(9)

:2856.

[10]

HARRIS

SM,MISTRY

P,FREATHY

C,

et

al.

Antitumour

activity

MAGNOTTI

E,

MARASCO

WA.

The

latest

animal

models

of

of

XR5944

in

vitro

and

in

vivo

in

combination

with

5-fluorouracil

and

irinotecan

in

colon

cancer

cell

lines[

J]

.

Br

J

Cancer,

2005

,

92(4)

:722.

ovarian

cancer

for

novel

drug

discovery

[

J

]

.

Expert

Opin

Drug

Discov,2018,13(3)

:249.

[5]

師長(zhǎng)宏

.

腫瘤患者來(lái)源的異種移植

(

PDX)

模型

[J].

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

與比較醫(yī)學(xué)

,2018,38(3)

：

165.

(

本文編輯盧玉清

)