復合芽孢桿菌對桑葉發酵品質的影響

2023年12月3日發(作者：讀書月活動)

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122DOI院10.15906/11-2975/s.20210325中國飼料2021年第3期復合芽孢桿菌對桑葉發酵品質的影響朱佳文1袁邱時秀1袁李峪鵬2袁曹衍波2袁凌乙丹2袁謝鐘煒2袁楊淵1.成都市農林科學院畜牧研究所袁四川成都611130曰2.四川農業大學動物醫學院袁四川雅安611130冤雪1袁許禎瑩1*收藏的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌按不同比例制成復合菌液協同發酵桑葉飼料袁并檢測發酵第7天堯第28天和56天的桑葉品質遙桑葉青貯發酵后袁發現枯草芽孢桿菌/地衣芽孢桿菌都具有降解纖維堯分解脂肪袁提高粗蛋白含量的能力袁其中袁H2組的粗纖維含量在發酵第56天較對照組下降了12.69%袁只占(12.217依0.039)%袁說明地衣芽孢桿菌分解纖維的能力可能相對較強袁H3組的粗脂肪含量在發酵第56天較對照組下降了20.99%袁只占(5.884依0.003)%袁說明枯草芽孢桿菌分解脂肪的能力可能相對較強袁不同比例的復合芽孢桿菌H1堯H2和H3組的粗蛋白含量在發酵第56天分別增加8.96%堯7.24%和3.72%袁說明兩種芽孢桿菌均具有提高青貯桑葉蛋白質含量的能力袁能夠提高飼料營養品質的效果遙[中圖分類號]S816.6[關鍵詞]桑葉曰青貯曰復合芽孢桿菌曰發酵品質[文獻標識碼]A[文章編號]1004-3314淵2021冤03-0122-04[摘要]現有的飼料添加劑目錄中袁枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌均被允許用于養殖動物遙因此袁本研究選擇實驗室桑葉在我國資源豐富袁具有非常高的營養價值袁且藥食均可袁粗蛋白質含量為20%~30%袁粗脂肪含量為4%~10%袁粗纖維含量為8%~15%袁無氮浸出物含量為30%~35%淵Zhou袁2011冤袁維生素含量高袁氨基酸種類齊全袁還具有許多天然的活性物質袁能夠抗應激袁增加免疫力淵李瑞雪袁2009冤袁目前已被廣泛應用到動物飼料中淵黃自然袁2006冤遙對桑葉進行青貯發酵可以提高桑葉的保存時間袁通過添加微生物還可以加快消除桑葉中的有毒物質袁提升飼料品質和口感遙研究表明袁混合菌液作用于桑葉發酵能夠改善桑葉的飼料功能淵張鴻袁2015冤遙而枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌均被允許用于動物養殖遙因此袁本試驗選擇實驗室已鑒定出的兩種芽孢桿菌協同發酵桑葉飼料袁研究其對桑葉營養品質的影響袁為篩選良好的復合菌劑配方提供理論基礎遙基金項目院成都市2019年科研創新和集成應用示范淵020207112************冤*通訊作者11.1材料與方法試驗材料Subtilis冤和地衣芽孢桿菌淵BacillusLicheniformis冤均來自成都市農林科學院分離鑒定菌株遙桑葉取自成都市農林科學院羊馬科研實驗基地袁于2019年8月采收遙胰酪胨大豆肉湯培養基淵TSB冤和胰蛋白胨大豆瓊脂培養基淵TSA冤均購自青島高科技工業園海博生物技術有限公司遙青貯飼料發酵袋規格為30cm伊40cm袁22絲遙1.2培養堯活化及擴大培養法遙分別將新鮮的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌于37益用TSB或TSA復蘇擴大培養8h袁搖床轉速為180r/min袁使芽孢桿菌生長速度達到穩定期袁進行計數遙按兩種芽孢桿菌的菌落形成單位淵cfu冤比例淵1:1堯1:4和4:1冤配制成H1堯H2和H3混合制劑遙1.3青貯桑葉試驗設計青貯窖采用青貯飼料復合菌液配方的設計采用常規的微生物試驗所用枯草芽孢桿菌淵Bacillus發酵袋袁將新鮮桑葉和柄切成3~5cm袁混勻袁隨機分為30袋袁每袋1000g遙對照組和處理組淵H12021年第3期中國飼料123組堯H2組和H3組冤每個發酵時間點各3袋袁保證處理組細菌添加量水平為1伊107充分混勻袁人工壓實后系上袋口袁cfu/g并用桑膠葉帶鮮密重封袁袁置于室溫發酵遙在青貯后第7堯28堯56天打開發酵袋袁分析青貯飼料各項指標遙酵1.4時間發點酵袁飼料隨機樣取出品對處照理組分3袋別和在處青理貯組后各不3同袋發袁每袋稱取20g放入250mL錐形瓶袁加入100mL去離子水袁4益浸提24h袁先用雙層紗布過濾袁再用濾紙過濾袁測定各個時期的pH遙將剩余的青貯飼料烘干袁稱重袁測定各個時期的粗蛋白質堯粗脂肪堯粗纖維堯中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量遙煮法1.5袁測參定照指GB/T標及6434-2006方法粗纖葉飼料中維含量粗測纖定維采的用測消定方法曳袁中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維利用Ankom量測定220采用型索纖氏維提分取析法系統袁參進照行測GB/T定曰6433-2006粗脂肪含葉采飼料中用凱氏粗定氮脂肪的法袁測參定照方GB/T法曳曰6432-1994粗蛋白質含量葉飼料中測定粗蛋白質測定方法曳遙22.1結衣芽孢桿菌果種與分菌的析進活行化復蘇對袁試其在驗用TSA枯草芽孢桿培養基上菌的生和地長狀況良好遙2.2間的延青長貯袁桑樣品葉的發酵pH后總的體pH呈下變降化趨勢隨遙著由青表貯1可時知袁桑葉青貯發酵過程中袁H1堯H2和H3組的pH變化和對照組沒有明顯的差異性遙表1復合芽孢桿菌對桑葉青貯過程中pH的影響組別對照組2856H1組6.8370依0.053d5.39375.447依依0.017daH20.184a5.0785.070依5.050依0.092daH3組組5.517依依0.025da0.024a4.992依依0.118a5.5470.050a5.133依依0.025a5.1400.086a依0.065a5.060青貯桑芽孢桿葉營養菌成分對桑的葉鑒粗定依0.049a5.0900.073a2.32.3.1維和酸性復合洗滌纖維的影響隨纖著維青堯貯中性時間洗滌的纖延長袁添加復合芽孢桿菌的樣品粗纖維堯中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均呈下降趨勢遙由表2看出袁桑葉青貯發酵過程中袁添加復合芽孢桿菌H1和H2組在第7天堯28天和56天較對照組的粗纖維含量差異顯著淵P臆0.5冤袁在第56天和對天分照別組下的降粗了纖7.53%維未見明和12.69%顯差異曰遙H3其組中在袁H2第56組的粗纖維含量在第56天下降幅度最大袁只占淵表12.2172復合依0.039芽孢冤%桿遙菌對桑葉青貯過程中粗纖維堯中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的影響項目時間對照組0dH1組10.726依0.456H2組H3組%粗纖維287d13.674依0.543b12.96714.53412.800依依0.040a56d14.07712.287依12.939依0.174a依0.773c13.326依0.248c0.041b12.64012.217依0.287b0d13.992依依0.156a0.466a22.548依1.587依0.257c0.039b12.603依0.091a中性洗滌纖維287dd27.012依0.226c28.479依0.065a56d18.39020.716依依0.1920.170ba18.97728.050依0.039b18.329依依0.235c18.328依0.154c28.460依0.073a0d0.154b16.976依0.234b22.33918.751依依0.078a0.079a酸性洗滌纖維287dd8.3958.567依依0.391ac0.391a8.769依0.14914.360a依0.0228.28856dd8.288依0.571a7.8777.712依依0.8890.394bca8.306依依0.145bc8.367依0.105ac依0.464ac7.5130.340a8.5187.715依依0.282a0.071a添加復合芽孢桿菌H1和H2組從第7天開始均和對照組的中性洗滌纖維含量差異顯著淵P臆組0.5和對冤袁在照第無56明天顯分差別異下遙降了0.33%和7.69%曰H3添加復合芽孢桿菌H1組在第28天和對照組的酸性洗滌纖維含量差異顯著淵P臆0.5冤袁下降了8.05%袁H2堯H3組在桑葉發酵期間酸性洗滌纖維含量變化和對照組無明顯差異遙在第56天時袁添加復合芽孢桿菌H1堯H2和H3的試驗組的酸性洗滌纖維含量和對照組并無顯著差異遙2.3.2青貯時間復的合延芽孢桿長袁添加菌對復桑合葉芽孢桿粗脂肪的菌的影響樣品粗隨脂著肪含量均呈下降趨勢遙由表3可知袁桑葉青貯發酵過程中袁添加復合芽孢桿菌H1組在第28堯56天和對照組的粗脂肪含量差異顯著淵P臆0.5冤袁分別下降了5.77%和5.81%曰H2組在第28天和對照組的粗脂肪含量124中國飼料2021年第3期差異顯著淵P臆0.5冤袁下降了6.70%曰H3組在第280.5堯56天和對照組的粗脂肪含量差異顯著的粗冤袁脂肪分別下含量降了在15.99第56%天下和20.99%降幅度遙最大其中淵P臆袁袁H3只組占淵5.884依0.003冤表%遙3復合芽孢桿菌對桑葉青貯過程中粗脂肪的影響組別對照組0d7d28d7.44856依0.209d%aH1組6.086依0.210a7.041H25.744依0.4286.0776.113依0.060a6.635依依0.194a依0.080b2.3.3H3組組復合芽孢桿菌5.992依對依0.449a0.613a6.5690.140b7.0155桑葉粗5.915蛋白質依0.335c依依0.3720.004b7.236ab的影響5.884依0.003b著青貯時間的延長袁添加復合芽孢桿菌的樣品粗隨蛋白質含量均有增加遙由表4可知袁桑葉青貯發酵過程中袁添加復合芽孢桿菌H1組和H2組從第7天開始均和對照組的粗蛋白質含量差異顯著淵P臆0.5冤袁在第56天分別增加8.97%和7.24%曰H3組在第7天堯28天和對照組無明顯差異袁在第56天和對照組的粗蛋白質含量差異顯著淵P臆0.5冤袁增加了3.73%遙因此袁H1堯H2和H3組的粗蛋白質含量在第56天都有所增加袁分別為淵21.861依0.120冤%堯淵21.515依0.059冤%表和4淵20.810復合依芽孢0.140桿冤%菌對遙桑葉青貯過程中粗蛋白質的影響組別對照組0d7d28d56d%dH119.347依19.726H2組組19.33依0.57依0.393c20.6350.100a20.289依a20.06221.861依0.120H3組19.918依0.198b0.131bc20.217依0.100b19.688依0.046依0.028a0.329b21.515依依0.120a20.810依0.1400.059bc3一3.1討論19.651依類好芽孢桿氧細菌菌袁對兼性桑厭葉氧發袁酵代謝的影響為嚴格芽孢桿的呼吸或發菌是酵代謝遙芽孢桿菌能夠產生淀粉酶堯脂肪酶等多種消化酶袁提高飼料利用率袁而且進入動物體內后能夠消耗宿主腸道內的氧氣袁抑制病原菌生長袁調節腸道菌群的平衡淵張劍偉袁2019曰徐海燕袁2006冤遙玉米青貯飼料發酵過程中添加枯草芽孢桿菌能夠提高粗蛋白質含量淵Shi袁2017冤遙采用枯草芽孢桿菌堯米曲霉堯釀酒酵母堯植物乳桿菌混合發酵桑葉袁能夠提高桑葉蛋白質利用率淵任元元袁菌2016能夠冤遙使朱佳青貯文桑淵葉2020中的冤研究粗纖發維現和袁粗添加脂肪的枯草芽孢桿含量有所下降袁使發酵品質得到一定程度的改善遙3.2影響添加桑葉復青合貯芽孢桿發酵過程中菌對桑袁葉試發驗酵組營養和對成分照組的的pHH1纖維堯變H2化堯粗和沒有明顯的差異袁說明添加復合芽孢桿菌脂肪和H3組對粗桑蛋白質等葉發酵指pH標的的影響檢測不可用大遙于粗評價青貯飼料的營養性質淵馮懷蓉袁2006曰黃榮生袁1984長袁添加冤遙桑復葉合青芽孢桿貯發酵菌過程中H1堯H2袁隨和著H3青貯組時的間樣的品延粗纖維堯中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均呈下降趨勢袁說明枯草芽孢桿菌/地衣芽孢桿菌都具有降解纖維的作用遙在青貯發酵的第56天袁H2組的粗纖維含量和中性洗滌纖維含量下降幅度最大袁分別占淵12.217依0.039冤%和淵16.976依0.234冤%遙而H2加比組例為中的1枯草芽孢桿院4袁說明地菌衣和地芽孢桿衣芽孢桿菌分解菌纖量維的的能添力可能更強遙隨著青貯時間的延長袁添加復合芽孢桿菌的樣品粗脂肪含量均有下降趨勢遙說明枯草芽孢桿菌/地衣芽孢桿菌都具有分解脂肪的作用遙復合芽孢桿菌H3組的粗脂肪含量在第56天下降幅度最大袁只占淵5.884依0.003冤%遙而H3組中的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌量的添加比例為4強院1遙袁隨說著明青枯草芽孢桿貯時間的延菌長分袁解脂肪的能添加復合芽孢桿力可能菌更的樣品粗蛋白質含量均有增加遙在第56天時袁H1堯H2淵21.861和H3依0.120組粗冤蛋白質%堯淵21.515含量都依0.059有所冤%增和加袁淵20.810分別為0.140冤%袁說明枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌都依具有提高青貯桑葉蛋白質含量的能力遙4結桑論葉青貯發酵過程中袁枯草芽孢桿菌/地衣芽孢桿菌都具有降解纖維堯分解脂肪堯提高粗蛋白質含量的能力袁其中袁地衣芽孢桿菌分解纖維的能力2021年第3期中國飼料125可能相對較強袁枯草芽孢桿菌分解脂肪的能力可能相對較強袁不同比例的復合芽孢桿菌提高青貯桑葉蛋白質含量的能力相當袁具有提高飼料營養品質的效果遙參考文獻[1]任元元袁康建平袁黃靜,等.復合菌種混合發酵提高桑蛋白利用率的研究[J].食品與發酵科技袁2016袁1院20~23.[2]朱佳文袁李峪鵬袁許禎瑩袁等.添加枯草芽孢桿菌對桑青貯發酵品質的研究[J].中國飼料袁2020袁3院82~86.[3]黃榮生.粗飼料測定技術的最近動向[J].當代畜牧袁1984袁4院39+41.[4]11.馮懷蓉袁龍濤袁崔衛東,等.利用青貯復合菌劑制作青貯飼料的效果測定[J].新疆農業科學袁2006袁1院79~81.[5]李瑞雪袁汪泰初袁賈鴻英.桑活性成分堯生物活性的研究及其開發應用進展[J].北方蠶業袁2009袁30淵2冤院1~3袁8.[6]黃自然.桑樹作為動物飼料的應用價值與研究進展[J].蠶業科學袁2006袁32淵3冤院80~88.[7]張鴻袁孫波袁王晴芳,等.一種混合菌液用于桑發酵的初報[J].廣東蠶業袁2015袁4院37~37.[8]徐海燕袁曹斌袁張志焱,等.芽孢桿菌發酵代謝產物的研究[J].飼料廣角袁2006袁9院22~23.[9]張劍偉袁王恒志袁張新黨,等.飼料中添加不同梯度珍珠露水草提取物對羅氏沼蝦生長堯蛋白質代謝和肌肉營養成分的影響[J].中國農學通報袁2019袁35淵7冤院158~164.[10]ShiC袁ZhangY袁YinY袁cidandphosphorusdi鄄gestibilityoffermentedcorn-soybeanmealmixedfeedwithandfedtopigs[J].JournalofAnimalScience袁2017袁95淵9冤院3996.[11]ZhouHeDU袁JunFengL袁YanChunZ袁rientcomponentsandutilizationofmulberryasanimalforage[J].ActaPrat鄄aculturaesinica袁2011袁5院192~ofmixtureonthefermentationqualityofmulberryLINYidan2袁XIEZhongwei2袁YANGXue1袁XUZhenying1*Ya爺an袁SichuanProvince611130袁China冤ZHUJiawen1袁QIUShixiu1袁LIYupeng2袁CAOYanbo2袁淵uteofAnimalScience袁ChengduAcademyofAgriculturalandForestrySciences袁Chengdu袁SichuanProvince611130袁China曰eofAnimalMedicine,SichuanAgriculturalUniversity袁[Abstract]Inthecurrentlistoffeedadditives袁Bacillussubtilisaore,inthisstudy袁BacillussubtilisandBacilluslicheniformiswerepreparedindifferentproportionstomakeacompositebacterialsolutiontosynergisticallyfermentmulberryfeed袁andthequalityofmulberryleavesonthe7th袁ermentationofmulberrysilage袁itwasfoundthatBacillussubtilis/Bacilluslicheniformishavetheabilitytodegradefiber袁hem袁H2groupofcrudefibercontentinfermentation56thdaydownby12.69%comparedwithcontrolgroup袁onlyaccountfor淵12.217依0.039冤%%袁thatindicatedtheabilityofBacilluslicheniformisdecomposingfibermayberelativelybetter.H3groupofcrudefatcontentinfermentation56thdaydownby20.99%comparedwithcontrolgroup袁onlyaccountfor淵5.884依0.003冤%袁thatindicatedtdeproteincontentofcompoundbacillusH1袁H2andH3groupsindifferentproportionsincreadby8.96%袁7.24%and3.72%respectivelyonthe56thdayoffermentation袁indicatingthatbothbacillusstrainshadtheabilitytoimprovetheproteincontentofsilagemulberryleavesandcouldimprovetheeffectoffeednutrition.[Keywords]mulberry曰silage曰compositeagentBacillus曰fermentationquality

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