細胞色素C的標準曲線

更新時間:2023-12-08 02:40:21 閱讀：評論：0

2023年12月8日發(作者：沈先生顧夫人)

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細胞色素C的標準曲線

3.含量測定

所得制品是還原型細胞色素C水溶液，在波長520nm處有最大吸收值，根據這一特性，用721型分光光度計，先作出一條標準細胞色素C濃度和對應的光密度值的標準曲線(圖1)，然后根據測得的待測樣品溶液的光密度值就可以由標準曲線的斜率求出待測樣品的含量。具體操作如下：

⑴ 標準曲線的繪制：

取1毫升標準品(81mg/ml)，稀釋至25ml，從中分別取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，分別置于五支試管中，每管補加蒸餾水至4m1，并加少許聯二亞硫酸鈉作還原劑，然后在520nm處測得各管的光密度，分別為0.179，0.330，0.520，0.700，0.870。以濃度為橫坐標，光密度值為縱坐標，作出標準曲線圖，從圖中求得斜率為l／3.71。

O.D1.000.800.600.400.200.000.000.200.400.600.801.00細胞色素C濃度圖1 細胞色素C標準曲線

⑵ 樣品測定

取1ml樣品，稀釋適當倍數，再加少許聯二亞硫酸鈉，在波長520nm處測定光密度。最后根據標準曲線的斜率計算其細胞色素C的含量。

五、實驗結果

計算公式：細胞色素C的含量=3.71×OD×稀釋倍數×終體積

在本實驗中，500克的豬心原料，應獲得75mg以上的細胞色素C的制品。

(注：在細胞色素C的實際工作中，除了含量測定以外還要測定含鐵量即純度的鑒定和活性，后兩項測定，此處從略)。