牛肉膏蛋白胨培養基配方

2024年3月6日發(作者：假如我是什么作文)

牛肉膏蛋白?胨培養基配?方：

牛肉膏蛋白?胨培養基是?一種應用最?廣泛和最普?通的細菌基?礎培養基，有時又稱為?普通培養基?。它含有牛肉?膏、蛋白胨和N?aCl。其中牛肉膏?為微生物提?供碳源和能?源，磷酸鹽、蛋白胨主要?提供氮源，而NaCl?提供無機鹽?。在配制固體?培養基時還?要加入一定?量瓊脂作凝?固劑。瓊脂在常用?濃度下96?℃時溶化，一般實際應?用時在沸水?浴中或下面?墊以石棉網?煮沸溶化，以免瓊脂燒?焦。瓊脂在40?℃時凝固，通常不被微?生物分解利?用。固體培養基?中瓊脂的含?量根據瓊脂?的質量和氣?溫的不同而?有所不同。

由于這種培?養基多用于?培養細菌（葷食），因此，要用稀酸或?稀堿將其p?H調至中性?或微堿性，以利于細菌?的生長繁殖?。

牛肉膏蛋白?胨培養基的?配方如下：

牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、瓊脂 15—20g、水 1000m?l、pH 7．4—7．6（7.0—8.0）

三、器材

牛肉膏，蛋白胨， NaCl，瓊脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；

試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養基分裝?器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅?菌鍋，pH試紙（ pH 5．5—9．0），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。

四、操作步驟

1．稱量

按培養基配?方比例依次?準確地稱取?牛肉膏、蛋白胨、NaCl放?入燒杯中。牛肉膏常用?玻棒挑取，放在小燒杯?或表面皿中?稱量，用熱水溶化?后倒入燒杯?。也可放在稱?量紙上，稱量后直接?放入水中，這時如稍微?加熱，牛肉膏便會?與稱量紙分?離，然后立即取?出紙片。蛋白胨很易?吸潮，在稱取時動?作要迅速。另外，稱藥品時嚴?防藥品混雜?，一把牛角匙?用于一種藥?品，或稱取一種?藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一?藥品，瓶蓋也不要?蓋錯。

2．溶化

在上述燒杯?中可先加入?少于所需要?的水量，用玻棒攪勻?，然后，在石棉網上?加熱使其溶?解。待藥品完全?溶解后，補充水分到?所需的總體?積。如果配制固?體培養基，將稱好的瓊?脂放入已溶?化的藥品中?，再加熱溶化?，在瓊脂溶化?的過程中，需不斷攪拌?，以防瓊脂糊?底使燒杯破?裂。最后補足所?失的水分。

3．調pH

在未調pH?前，先用精密p?H試紙測量?培養基的原?始pH值，如果pH偏?酸，用滴管向培?養基中逐滴?加入1mo?l/L NaOH，邊加邊攪拌?，并隨時用p?H試紙測其?pH值，直至pH達?7．6。反之，則用1mo?l/L HCl進行?調節。注意pH值?不要調過頭?，以避免回調?，否則，將會影響培?養基內各離?子的濃度。

對于有些要?求pH值較?精確的微生?物，其pH的調?節可用酸度?計進行（使用方法，可參考有關?說明書）。

4．過濾

趁熱用濾紙?或多層紗布?過濾，以利結果的?觀察。一般無特殊?要求的情況?下，這一步可以?省去（本實驗無需?過濾）。

5．分裝

按實驗要求?，可將配制的?培養基分裝?入試管內或?三角燒瓶內?。分裝裝置見?圖Ⅴ-1。

分裝過程中?注意不要使?培養基沾在?管口或瓶口?上，以免沾污棉?塞而引起污?染。

(1)液體分裝分?裝高度以試?管高度的1?/4左右為宜?。

(2)固體分裝分?裝試管，其裝量不超?過管高的1?/5，滅菌后制成?斜面，如圖Ⅴ-2。分裝三角燒?瓶的量以不?超過三角燒?瓶容積的一?半為宜。

(3)半固體分裝?試管一般以?試管高度的?1/3為宜，滅菌后垂直?待凝。

6．加塞

培養基分裝?完畢后，在試管口或?三角燒瓶口?上塞上棉塞?，以阻止外界?微生物進入?培養基內而?造成污染，并保證有良?好的通氣性?能（棉塞制作方?法附本實驗?后面）。

7．包扎

加塞后，將全部試管?用麻繩捆扎?好，再在棉塞外?包一層牛皮?紙，以防止滅菌?時冷凝水潤?濕棉塞，其外再用一?道麻繩扎好?。用記號筆注?明培養基名?稱、組別、日期。三角燒瓶加?塞后，外包牛皮紙?，用麻繩以活?結形式扎好?，使用時容易?解開，同樣用記號?筆注明培養?基名稱、組別、日期。

8．滅菌

將上述培養?基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分鐘高?壓蒸汽滅菌?。如因特殊情?況不能及時?滅菌，則應放入冰?箱內暫存。

9．擱置斜面

將滅菌的試?管培養基冷?至50℃左右，將試管棉塞?端擱在玻棒?上，擱置的斜面?長度以不超?過試管總長?的一半為宜?。

10．無菌檢查

將滅菌的培?養基放入3?7℃的溫室中培?養24—48小時，以檢查滅菌?是否徹底。

PDA培養?基配方：

特點及用途?

PDA培養?基是人們對?馬鈴薯葡萄?糖瓊脂培養基的簡?稱，即Pota?to Dextr?o Agar

（Mediu?m），依次對應馬?鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文?。

一種常用的?培養基，宜培養酵母?菌、霉菌、蘑菇等真菌（?素食）。酵母菌PH?（3.8~6.0），霉菌（4.0~5.8）等。

按物理性狀?劃分：固體培養基? ，按培養基成?分劃分：半合成培養?基

配方

馬鈴薯 200克 葡萄糖 20克 瓊脂 15~20克 自來水 1000毫?升 自然PH

配制步驟

其做法是稱?取200g?馬鈴薯，洗凈去皮切?成小塊，加水煮爛（煮沸20~30分鐘，能被玻璃棒?戳破即 可），用四層紗布?過濾，再據實際實?驗需要加葡?萄糖和瓊脂?，繼續加熱攪?拌混勻，稍冷卻后再?補足水分至?1000毫?升，分裝試管，加塞、包扎，（121℃）滅菌20分?鐘左右后取?出試管擺斜?面，冷卻后貯存?備用。

其他事項

1.培養基經滅?菌后，必須放在3?7C溫箱培?養24h，無菌生長者?方可使用。

培養?基一般不需?要調pH。對于要調節?pH的培養?基，一般用pH?試紙測定其?pH。如果培養基?偏酸或偏堿?時，可用lmo?l／LNaOH?或lmol?／LHCL溶?液進行調節?。調節

時應逐?滴加入Na?OH或HC?l溶液，防止局部過?酸或過堿破?壞培養基成?分。

3.培養基在使?用時也可以?做成不含瓊?脂的液體培?養基，用于菌類的?震蕩培養。

4.培養基也可?以加入氯霉?素或土霉素?，加入量為0?.1g/L培養基，主要是為了?抑制細菌的?生長，減少干擾性?

高氏1號培?養及配方：

培養放線菌?用 ，改良的高氏?

可溶性淀粉? 2g ，KNO3 0.1g ，K2HPO?4 0.05g ，MgSO4?? 7H2O 0.05g ，NaCl 0.05g ，FeSO4?? 7H2O 0.001g （母液），瓊脂 2g ，自來水 100mL? ，pH 7.2～7.4 ，滅菌

1.05kg/cm2，20min?

配制時，先用少量冷?水，將淀粉調成?糊狀，倒入少于所?需水量的沸?水中，在火上加熱?，邊攪拌邊依?次逐一溶化?其他成分，溶化后，補足水分到?100ml?，調pH，121℃滅菌20m?in。

高溫滅菌后?，倒平皿前加?入10%酚2滴至1?00ml培?養基中混勻?，將培養基倒?入平皿內約?15ml/皿。

高氏1號：

可溶性淀粉?（20g），KNO3（1g），K2HPO?4（0.5g），MgSO4?? 7H2O（0.5g），NaCl（0.05g），FeSO4?? 7H2O（0.01g），瓊脂 20g，pH=7.4-7.6

和改良的差?別就在于有?沒有FeS?O4? 7H2O 高氏常常配?完后變成褐?色也是由于?Fe2+氧化為Fe?3+的關系，所以常常有?人用螯合的?FeSO4?，防止氧化。