常用25種培養基詳細配方

2024年3月6日發(作者：勤勉的意思)

一、牛肉膏蛋白胨培養基(培養細菌用)

牛肉膏 3g

蛋白胨 10g

NaCl 5g

瓊脂 15—20g

水 1000ml

pH 7．0—7．2

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

二、淀粉瓊脂培養基(高氏1號培養基，培養放線菌用)

可溶性淀粉 20g

KNO3 1g

NaCl 0．5g

K2 HPO4 0．5g

MgSO4 0．5g

FeSO4 0．01g

瓊脂 20g

水 1000ml

pH 7．2—7．4

配制時，先用少量冷水，將淀粉調成糊狀，在火上加熱，邊攪拌邊加水及其他成分，溶化后，補足水分至1000ml。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

三、查氏培養基(培養霉菌用，實驗16)

NaNO3 2g

K2 HPO4 1g

KCl 0．5g

MgSO4 0．5g

FeSO4 0．01g

蔗糖 30g

瓊脂 15—20g

水 1000ml

pH 自然

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

四、馬丁氏(Martin)瓊脂培養基(分離真菌用)

葡萄糖 10g

蛋白胨 5g

KH2 PO4 1g

MgSO4 ·7H2 O 0．5g

1/3000孟加拉紅(ro bengal，玫瑰紅水溶液)

100ml

瓊脂 15—20g

pH 自然

蒸餾水 800ml

0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。

臨用前加入0．03%鏈霉素稀釋液100ml，使每毫升培養基中含鏈霉素30μg。

五、馬鈴薯培養基 (實驗16)

馬鈴薯 200g

蔗糖(或葡萄糖) 20g

瓊脂 15—20g

水 1000ml

pH 自然

馬鈴薯去皮，切成塊煮沸半小時，然后用紗布過濾，再加糖及瓊脂，溶化后補足水至1000ml。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

六、麥芽汁瓊脂培養基 (實驗15)

1．取大麥或小麥若干，用水洗凈，浸水6—12小時，置15℃陰暗處發芽，上蓋紗布一塊，每日早、中、晚淋水一次，麥根伸長至麥粒的兩倍時，即停止發芽，攤開曬干或烘干，貯存備用。

2．將干麥芽磨碎，一份麥芽加四份水，在65℃水浴鍋中糖化3—4小時，糖化程度可用碘滴定之。

3．將糖化液用4—6層紗布過濾，濾液如混濁不清，可用雞蛋白澄清，方法是將一個雞蛋白加水約20ml，調勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。

4．將濾液稀釋到5—6波美度，pH約6．4，加入2%瓊脂即成。

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

七、葡萄糖-醋酸鹽培養基 (實驗15)

葡萄糖 1g

酵母浸膏 2．5g

醋酸鈉 8．2g

瓊脂 15g

蒸餾水 1000ml

pH 4．8

分裝試管，0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘后制成斜面。

八、半固體肉膏蛋白胨培養基 (實驗26)

肉膏蛋白胨液體培養基 100ml

瓊脂 0．35—0．4g

pH 7．6

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

九、合成培養基 (實驗36，39)

(NH4 )2 PO4 1g

KCl 0．2g

MgSO4 ·7H2 O 0．2g

豆芽汁 10ml

瓊脂 20g

蒸餾水 1000ml

pH 7．0

加12ml0．04%的溴甲酚紫(pH5．2—6．8，顏色由黃色變紫色，作指示劑)。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

十、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培養基 (實驗37，38)

黃豆芽 100g

蔗糖(或葡萄糖) 50g

水 1000ml

pH 自然

稱新鮮豆芽100g，放入燒杯中，加水1000ml，煮沸約半小時，用紗布過濾。用水補足原量，再加入蔗糖(或葡萄糖)50g，煮沸溶化。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

十一、油脂培養基 (實驗40)

蛋白胨 10g

牛肉膏 5g

NaCl 5g

香油或花生油 10g

1．6%中性紅水溶液 1ml

瓊脂 15—20g

蒸餾水 1000ml

pH 7．2

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

注：1．不能使用變質油。

2．油和瓊脂及水先加熱。

3．調好pH后，再加入中性紅。

4．分裝時，需不斷攪拌，使油均勻分布于培養基中。

十二、淀粉培養基 (實驗40，45)

蛋白胨 10g

NaCl 5克

牛肉膏 5克

可溶性淀粉 2g

蒸餾水 1000ml

瓊脂 15—20g

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

十三、明膠培養基 (實驗40)

牛肉膏蛋白胨液 100ml

明膠 12—18g

pH 7．2—7．4

在水浴鍋中將上述成分溶化，不斷攪拌。溶化后調pH7．2—7．4。

0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。

十四、蛋白胨水培養基 (實驗42)

蛋白胨 10g

NaCl 5克

水 1000ml

pH 7．6

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

十五、糖發酵培養基 (實驗41)

蛋白胨水培養基 1000ml

酸性復紅水溶液① 2—5ml

pH 7．6

另配20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10ml。

制法：

1．將上述含指示劑的蛋白胨水培養基(pH7．6)分裝于試管

中，在每管內放一倒置的小玻璃管，使充滿培養液。

2．將已分裝好的蛋白胨水和20%的各種糖溶液分別滅菌，蛋白胨水1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘；糖溶液0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。

3．滅菌后，每管以無菌*作分別加入20%的無菌糖溶液0．5ml(按每10ml培養基中加入20%的糖液0．5ml，則成1%的濃度)。

配制用的試管必須洗干凈，避免結果混亂。

①0．5%酸性復紅水溶液100ml加1mol/LNaOH16ml即成。

十六、葡萄糖蛋白胨水培養基 (實驗42)

蛋白胨 5g

葡萄糖 5g

K2 HPO4 2g

蒸餾水 1000ml

將上述各成分溶于1000ml水中，調pH7．0—7．2，過濾。分裝試管，每管10ml，0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。

十七、H2 S試驗用培養基 (實驗42)

蛋白胨 20g

NaCl 5g

檸檬酸鐵銨 0．5g

Na2 S2 O3 0．5g

瓊脂 15—20g

蒸餾水 1000ml

pH 7．2

先將瓊脂、蛋白胨溶化，冷至60℃加入其他成分。分裝試管，0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌15分鐘，備用。

十八、檸檬酸鹽培養基 (實驗42)

NH4 H2 PO4 1g

K2 HPO4 1g

NaCl 5g

MgSO4 0．2g

檸檬酸鈉 2g

瓊脂 15—20g

蒸餾水 1000ml

1%溴麝香草酚藍酒精液 10ml

將上述各成分加熱溶解后，調pH6．8，然后加入指示劑，搖勻，用脫脂棉過濾。制成后為黃綠色，分裝試管，1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘后制成斜面。

十九、土霉素效價測定用培養基 (實驗44)

培養基Ⅰ(供培養試驗菌用)

蛋白胨 5g

酵母膏 3g

牛肉膏 1．5g

NaCl 3．5g

葡萄糖 1g

K2 HPO4 3．68g

KH2 PO4 1．32g

瓊脂 20—25g

蒸餾水 1000ml

pH 7．2

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

培養基Ⅱ(供攤布雙碟的上，下層用)

蒸餾水 1000ml

pH 7．0—7．2

先稱取4g酪素，再加入0．5mol/LNaOH約2ml，將酪素溶解；然后依次加入其他藥品，最后調pH7．0—7．2。0．56kg/cm2

(8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。

二十一、完全培養基(TYEG培養基) (實驗47)

蛋白胨 6g

酵母膏 6g

牛肉膏 1．5g

葡萄糖 1g

瓊脂 15—18g

蒸餾水 1000ml

pH 6．8

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

二十、酪蛋白培養基 (實驗46)

KH2 PO4 0．36g

Na2 HPO4 ·12H2 O 1．3g

NaCl 0．1g

ZnSO4 ·7H2 O 0．02g

CaCl2 ·2H2 O 0．002g

酪素 4g

酪素水解氨基酸 0．05g

瓊脂 15—20g

胰蛋白胨 10g

酵母浸膏 5g

K2 HPO4 3g

葡萄糖 1g

瓊脂 15—20g

蒸餾水 1000ml

pH 7．0

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

二十二、基本培養基(MM培養基) (實驗47)

(NH4 )2 SO4 1g

K2 HPO4 7g

KH2 PO4 3g

檸檬酸鈉 0．5g

MgSO4 ·7H2 O 0．1g

葡萄糖 5g

瓊脂 15—20g

蒸餾水 1000ml

1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。

二十三、復紅亞硫酸鈉培養基(遠藤氏培養基) (實驗60，61)

蛋白胨 10g

乳糖 10g

K2 HPO4 3．5g

瓊脂 20—30g

蒸餾水 1000ml

無水亞硫酸鈉 5g左右

5%堿性復紅乙醇溶液 20ml

先將瓊脂加入900ml蒸餾水中，加熱溶解，再加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，使溶解，補足蒸餾水至1000ml，調pH至7．2—7．4。加入乳糖，混勻溶解后，0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。稱取亞硫酸鈉置一無菌空試管中，加入無菌水少許使溶解，再在水浴中煮沸10分鐘后，立刻滴加于20ml5%堿性復紅乙醇溶液中，直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性復紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持溶化狀態的培養基中，充分混勻，倒平皿，放冰箱備用。貯存時間不宜超過2周。

二十四、伊紅美藍培養基(EMB培養基) (實驗60，61)

蛋白胨水瓊脂培養基 100ml

20%乳糖溶液 2ml

2%伊紅水溶液 2ml

0．5%美藍水溶液 1ml

將已滅菌的蛋白胨水瓊脂培養基(pH7．6)加熱溶化，冷卻至60℃左右時，再把已滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液及美藍水溶液按上述量以無菌*作加入。搖勻后，立即倒平板。乳糖在高溫滅菌易被破壞必須嚴格控制滅菌溫度，一般是0．70kg/cm2

(10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。

二十五、乳糖蛋白胨培養液(“水的細菌學檢查”用) (實驗60、61)

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

乳糖 5g

NaCl 5g

1．6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml

蒸餾水 1000ml

將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及Nacl加熱溶解于1000ml蒸餾水中，調pH至7．2—7．4。加入1．6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，充分混勻，分裝于有小倒管的試管中。0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。