培養基中的蛋白胨

2024年3月6日發(作者：永泰云頂)

培養基中的蛋白胨

2019版高中生物學選擇性必修三介紹了“牛肉膏蛋白胨培養基”，期中蛋白胨是最基本的原材料之一。能為微生物提供氮源、氨基酸等。具有易溶解于水、色淺透明、營養豐富、可被微生物直接利用、可耐受濕熱滅菌不凝固、不析出、無沉淀等特點。同時是一種兩性電解質，具有緩沖作用。

那么，什么是蛋白胨？有哪些種類和應用？

蛋白胨是將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后，干燥而成的外觀呈淡黃色的粉劑，具有肉香的特殊氣味。蛋白質經酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。為淺黃色至棕色粉末或顆粒,有肉味,但無腐臭,易溶于水,不溶于乙醇、氯仿和乙醚。

不同來源的蛋白質和不同的水解條件，其水解物中組成可千差萬別。所以蛋白胨往往是一個復雜的多肽混合物。可溶于水，過熱不凝固，在飽和硫酸銨中不發生沉淀但可為蛋白質沉淀劑所沉淀。

蛋白胨從來源上可分為動物性蛋白胨、植物性蛋白胨、微生物蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是動物性蛋白胨，而大豆蛋白胨等是植物性蛋白胨、酵母蛋白胨屬于微生物蛋白胨。

動物性來源的蛋白胨還有：蠶蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。

蛋白質分解產物，如將牛肉、酪蛋白、牛奶粉、白明膠、大豆蛋白、絲蛋白、血纖維蛋白等為原料，經不完全的水解工藝所得的產物。市售產品以淡黃至棕黃色粉劑為主。其分子量介于?和肽之間，約2000左右。不同來源的蛋白質和不同的水解條件，其水解物中組成可千差萬別。所以胨往往是一個復雜的多肽混合物?？扇苡谒^熱不凝固，在飽和硫酸銨中不發生沉淀但可為蛋白質沉淀劑所沉淀。

微生物培養基中常用的蛋白胨

1.細菌蛋白胨

一般是胃蛋白酶或胰蛋白酶消化動物組織所得蛋白胨。目前使用最多的是牛骨蛋白胨。

2.酪蛋白胨

又稱：干酪素、酪朊、乳酪素、胰酪蛋白胨。

是胰蛋白酶水解酪蛋白所得的蛋白胨，其氨基酸比較齊全，特別是色氨酸含量比較高，適用于靛基質和糖發酵實驗，但它缺乏胱氨酸、蛋氨酸等含硫氨酸，不適宜用于硫化氫試驗。酪蛋白是

一種含磷鈣的結合蛋白，對酸敏感，pH較低時會沉淀。酪蛋白是哺乳動物包括牛、羊和人奶中的主要蛋白質。

3.多價蛋白胨

為酪蛋白胨和細菌蛋白胨等量混合的蛋白胨。適用于一般細菌培養和繁殖。

4.牛肉蛋白胨

胰蛋白酶消化新鮮牛肉所得蛋白胨。富含氨基酸、生長促進因子等，營養成分高于細菌蛋白胨。

5.眎蛋白胨

胰蛋白酶低程度消化酪蛋白所得產物，可以部分被硫酸銨沉淀出來。富含大量低分子量肽、游離氨基酸和促生長因子，不含對氨基苯甲酸，適用于配制細菌產毒素的培養基。

6.大豆蛋白胨

為木瓜蛋白酶消化大豆粉所得水解物，維生素含量高，特別是硫氨素（維生素B1），并含有大量的碳水化合物，是一種不含動物源性的優良蛋白胨，適用于真菌和許多營養要求高的細菌，不適用于微生物糖醇發酵試驗。一般與其他類型的蛋白胨混合使用效果更好。

7.酸水解酪蛋白

以優質的酪蛋白為原料，用強酸深度水解、脫色、脫鹽、濃縮、噴霧干燥而成的白色或淡黃色粉狀物。維生素大部分被強鹽酸水解破壞，缺乏胱氨酸和色氨酸。適用于藥敏試驗用培養基和微生

物法維生素測定用培養基。

8.明膠蛋白胨

為胰蛋白酶水解明膠產物。胱氨酸和色氨酸含量低，不含碳水化合物。特別適用于微生物糖醇發酵試驗。

蛋白胨可以作為微生物培養基的主要原料，在抗生素、醫藥工業、發酵工業、生化制品及微生物學科研等領域中的用量均很大，可以用來治療消化道疾??；不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽，因此存在著各種蛋白胨，一般來說，用于蛋白胨生產的蛋白包括動物蛋白（酪蛋白、肉類）、植物蛋白（豆類）、微生物蛋白（酵母）等三種。能為微生物提供C源、N源、生長因子等營養物質。

例、某同學用牛肉膏蛋白胨固體培養基進行大腸桿菌純化培養。下列說法正確的是

A. 牛肉膏蛋白胨培養基需經高壓蒸汽滅菌后調節pH

B. 蛋白胨可為大腸桿菌生長提供氮源、碳源和維生素

C. 倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置

D. 用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌實際數目低

【答案】BCD

【解析】

培養基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化→調節PH→分裝→滅菌→倒平板；微生物分離常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。

A. 牛肉膏蛋白胨培養基應先調pH再經高壓蒸汽滅菌，A錯誤；

B. 蛋白胨可為大腸桿菌的生長提供氮源、碳源和維生素等營養，B正確；

C. 倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，防止冷凝水滴在培養基表面造成污染，C項正確；

D. 因為兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，D正確。