植物組織培養(yǎng)實驗報告解析

2024年3月28日發(fā)(作者：企業(yè)文化策劃)

實驗一 植物組織培養(yǎng)實驗報告

一 實驗目的

讓植物組織經過脫分化作用，形成愈傷組織，經過再分化作用，愈傷組織又能重新分化為

有結構的組織和器官，最終形成完整的植株。

二 實驗原理

植物組織培養(yǎng)是把植物的器官，組織以至單個細胞，應用無菌操作使其在人工條件下，能

夠繼續(xù)生長，甚至分化發(fā)育成一完整植株的過程。植物的組織在培養(yǎng)條件下，原來已經分化

停止生長的細胞，又能重新分裂，形成沒有組織結構的細胞團，即愈傷組織。這一過程稱為

“脫分化作用”，已經“脫分化”的愈傷組織，在一定條件下，又能重新分化形成輸導系統(tǒng)以及

根和芽等組織和器官，這一過程稱“再分化作用”。植物激素在此過程中起著重要的作用，吲

哚乙酸（ IAA ）和 6 –芐基氨基腺嘌呤（ 6 – BA ）的比例，決定了根和芽的分化。

三 實驗器材

（一）試劑

乙醇、IAA 或 2 ， 4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸鈉）、6- 芐基氨基腺嘌呤（ 6-BA ）

MS 培養(yǎng)基

（二）儀器設備

培養(yǎng)室，高壓滅菌鍋，水浴鍋，解剖刀，三角燒瓶（ 100mL ），燒杯，量筒，培養(yǎng)皿，超

凈工作臺，分析天平，長鑷子，剪刀，橡皮筋等

三 實驗步驟

1. 配制培養(yǎng)基

（ 1 ）愈傷組織誘導培養(yǎng)基： MS 培養(yǎng)基（蔗糖含量為 10 g/L ， 2,4 – D 含量為 2

mg/L ，瓊脂 10 g/L ）。

（ 2 ）試驗培養(yǎng)基：在 MS 培養(yǎng)基中按表 33 – 1 加入 IAA 和 6–BA 。

吲哚乙酸先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 芐基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L

HCl 溶解，然后用蒸餾水稀釋，再加入培養(yǎng)基中。

2. 培養(yǎng)基滅菌

將配好的培養(yǎng)基加入瓊脂加熱溶解，調至 pH 5.8 ，趁熱分裝于 100 mL 三角燒瓶中，

每瓶約 20 mL 。待培養(yǎng)基冷卻凝固后，用兩層稱量紙包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后

在高壓滅菌鍋中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下滅菌 20 min 。取出三角燒瓶放在臺子上，

冷卻后備用。接種操作所需的一切用具（如長鑷子、解剖刀、剪刀等）及滅菌水，需同時滅

菌。

3. 誘導產生愈傷組織

（ 1 ）取健壯的玫瑰、菊花莖數段，每段約 5 cm 長，于燒杯中用 0.1% 氯化汞（升汞）

浸泡 20 min ，取出用無菌水洗 3 ～ 4 次，置于無菌培養(yǎng)皿中，在接種箱中按無菌操作

要求剝去外皮（接種箱事先用紫外燈滅菌 30 min ），用解剖刀切成 5 mm 厚的圓片（棄

去開始一片和最后一片），用長鑷子將它接種在誘導培養(yǎng)基上，注意圓片的切口朝向培養(yǎng)基，

每瓶接種 4 片，接種后扎好瓶口。

（ 2 ）將已接入植物組織（外植體）的三角燒瓶，培養(yǎng)在 25 ℃溫室中，每星期檢查 l ～

2 次，剔除材料已被雜菌污染的三角燒瓶， 3 ～ 4 周后產生愈傷組織。

（ 3 ）選取愈傷組織生長良好的三角燒瓶，用解剖刀將愈傷組織切下，轉移到含有不同激

素的試驗培養(yǎng)基中（也可以連同原來的外植體一起轉移），每瓶放 1 ～ 2 塊，仍培養(yǎng)在

25 ℃溫室中，每周 1 ～ 2 次觀察不同處理的三角燒瓶中，愈傷組織分化情況，直至長出

根和芽。長成的幼小植株即為“試管苗”，可移栽于花盆中。

四 實驗結果

植物分生組織培養(yǎng)室指對植物體的分生組織進行離體培養(yǎng)。 因為時間有限及實驗嚴密

性等問題，大部分都失敗了，但是仍然有小部分分化發(fā)育了出來。已經證明了植物組織能夠

經過脫分化作用，形成愈傷組織，經過再分化作用，愈傷組織又能重新分化為有結構的組織

和器官，最終形成完整的植株。