牛腸激酶基因工程菌的構建、高密度發酵、純化及活性鑒定

2023年12月12日發(作者：樹狀圖怎么做)

牛腸激酶基因工程菌的構建、高密度發酵、純化及活性鑒定

牛腸激酶基因工程菌的構建、高密度發酵、純化及活性鑒定

腸激酶(enterokina, EK)是一種專一識別DDDDK氨基酸序列、并水解K后肽鍵的絲氨酸蛋白水解酶.根據GenBank序列進行人工合成牛腸激酶輕鏈基因cDNA,測序正確后將其插入甲醇酵母分泌型載體pPICZαA,得到重組質粒pPICZαA/EKL,重組載體經線性化后轉化Pichia pastoris SMD 1168H,篩選得到重組牛腸激酶輕鏈工程菌.分別對重組酵母工程菌進行高密度發酵、 rEKL (recombinant

enterokina light chain, rEKL) 純化、 N端序列測定、生物學活性鑒定等研究工作.結果表明,發酵上清中rEKL含量高,純化的rEKL專一性強、無其他雜酶活性、 N端15個氨基酸序列與文獻報道一致. 圖5 參17

作 者：李德華 茍興華 胡海洋 徐琦 劉忠榮 吳洽慶 余曉東 LI

Dehua GOU Xinghua HU Haiyang XU Qi LIU Zhongrong WU

Qiaqing YU Xiaodong 作者單位：李德華,LI Dehua(重慶師范大學生命科學院,重慶,400047;成都地奧制藥集團有限公司,成都,610041)

茍興華,胡海洋,劉忠榮,GOU Xinghua,HU Haiyang,LIU

Zhongrong(成都地奧制藥集團有限公司,成都,610041)

徐琦,XU Qi(成都地奧制藥集團有限公司,成都,610041;四川大學化工學院,成都,610065)

吳洽慶,WU Qiaqing(成都地奧制藥集團有限公司,成都,610041;中國科學院成都生物研究所,成都,610041)

余曉東,YU Xiaodong(重慶師范大學生命科學院,重慶,400047)

刊 名：應用與環境生物學報 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE

JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY 年，卷(期)：2006 12(6) 分類號：Q78 關鍵詞：腸激酶(enterokina,EK) 甲醇酵母(Pichia pastoris) 高密度發酵