如何制作牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基?

2024年3月6日發(作者：元宵節彩燈)

如何制作牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基？

牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基是一種廣泛應用于培養細菌的培養基，其主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl。其中的牛肉膏為微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨主要提供氮源和維生素，而NaCl提供細菌生長所需的無機鹽成分。牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基是藥敏實驗的基礎，通過將病料接種在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基中，并在特定位置貼上含有定量抗菌藥物的濾紙片，紙片中的藥物在瓊脂中擴散，起到了一定的抑菌作用，從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈，不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑受藥物在瓊脂中擴散速度的影響而不同。根據抑菌圈大小，即可得出最適宜的藥物，起到了科學用藥的結果。牛肉蛋白胨培養基配方 牛肉膏：3.0g 蛋白胨：10.0g NaCl：5.0g 瓊脂：15-25g 水：1000ml pH：7.4-7.6稱量 按培養基配方比例依次準確地稱取牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl置于燒杯中。稱藥品時嚴防藥品混雜，一把藥匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品。溶化 在上述燒杯中加入1000mL的蒸餾水，用玻棒攪勻。然后，在石棉網上加熱使其煮沸溶解。在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。調pH 在未調pH前，先用精密pH試紙測量培養基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向

培養基中逐滴加入1mol/L

NaOH，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值，直至pH達7.6。反之，則用1mol/L

HCl進行調節。注意pH值不要調過頭，以避免回調，否則，將會影響培養基內各離子的濃度。 對于有些要求pH值較精確的微生物，其pH的調節可用酸度計進行。過濾 趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結果的觀察。(一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去。)滅菌 將過濾后的培養基置于燒杯中，用牛皮紙包好，置于高壓蒸汽滅菌鍋中進行高壓滅菌。滅菌的溫度和時間分別是：121℃高壓滅菌15-30min。分裝 此步驟全部在超凈工作臺中完成。滅菌以后，在培養基冷卻到40-50℃時，快速將液體培養基分裝在90mm的一次性培養皿中，每個培養皿中大概加入10mL左右的液體培養基。將培養皿靜置放置于水平臺面上使其自然凝固。保存 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基需保存在4℃冰箱。環凱微生物科技微信號： huankai