降血壓的藥物組合物及含其制劑與應(yīng)用的制作方法
1.本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其是涉及一種降血壓的藥物組合物及含其制劑與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
2.高血壓是一種以動(dòng)脈壓升高為特征，可伴有心臟、血管、腦和腎臟等器官功能性或器質(zhì)性改變的全身性疾病。持續(xù)血壓過(guò)高的疾病，會(huì)引起中風(fēng)、心臟病、血管瘤、腎衰竭等疾病。高血壓是目前發(fā)病率、增長(zhǎng)率極高的最常見(jiàn)的疾病，嚴(yán)重危害人類的健康。
3.現(xiàn)如今人們也越來(lái)越重視高血壓的。高血壓的過(guò)程中經(jīng)常用到西藥，但是長(zhǎng)期使用這些合成藥物會(huì)產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，例如干咳，味覺(jué)障礙，皮疹和過(guò)敏反應(yīng)等。中藥在我國(guó)歷史悠久，具有“多靶點(diǎn)、多效應(yīng)”的特點(diǎn)，因?yàn)橹嗅t(yī)理論認(rèn)為，人體是一個(gè)整體，故活血化瘀類中藥具有削除動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，疏通血管和加速血液循環(huán)等多種效果。
4.目前，中藥高血壓只是將具有降血壓功能的中藥材進(jìn)行簡(jiǎn)單的復(fù)配，再進(jìn)行熬煮，長(zhǎng)時(shí)間的熬煮導(dǎo)致藥效消散，效果不佳。
5.cn105616767a公開(kāi)了一種降血壓的中藥配方，該中藥配方包括以份數(shù)計(jì)量，包括川穹5-10份、菊花10-15份、澤瀉5-10份、黃芪10-15份、夏枯草5-10份、荷葉10-15份，所述中藥的制備方法是：將上述藥材加水量是總藥量的2-3倍，煎煮2-3小時(shí)，過(guò)濾得到藥汁。本發(fā)明優(yōu)勢(shì)是：能夠有效地降血壓，輕者一個(gè)療程即可治愈，重者三個(gè)療程可治愈，療效顯著，復(fù)發(fā)率低，無(wú)毒副作用。此發(fā)明為中藥液，不易保存，具有降壓效果的組份被稀釋，降低療效。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
6.針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明提供了一種降血壓的藥物組合物及含其制劑與應(yīng)用。
7.一種降血壓藥物組合物的制備方法，包括以下步驟：
8.s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在50-60℃、20-30pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至300-600μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為30-35kg/h，萃取壓力為20-25mpa，一級(jí)分離壓力為6-10mpa，二級(jí)分離壓力為4-8mpa，萃取溫度為40-60℃，萃取時(shí)間為3-5h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
9.s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:(5-8)ml浸入水中20-40min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.1-1mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:(8-12)ml加入水中，煮沸提取2-3h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
10.s3按質(zhì)量份計(jì)，取20-40份降壓微球加入到90-100份步驟s2制得的濾液中，煮沸并輔以超聲處理20-30min，超聲功率為600-800w，頻率40-80khz，接著降溫至60-80℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至2％-5％，真空氣壓為20-30pa，得到降壓粉劑；
11.s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比(1-2):(1-2)混合，然后加熱至70-90℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)360-420目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度16-20pa.s，
得到提純蜂蜜；
12.s5按質(zhì)量份計(jì)，將3-10份甜葉菊葉片萃取物、20-40份降壓粉劑、16-35份提純蜂蜜混合，加熱至40-50℃，然后以160-200r/min轉(zhuǎn)速攪拌30-40min，最后，將其制成2-3mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物。
13.所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
14.n1按質(zhì)量份計(jì)，取3-10份糙殼菱蟹蟹殼加入100-120份0.4-0.8wt％鹽酸中，并向其中加入3-5份發(fā)泡劑，以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌5-10min，得到溶液a；
15.n2將25-35份海決明粉碎至100-200μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2-3ml/min速率向其中滴加20-30wt％碳酸鈉水溶液10-20份，滴加完繼續(xù)攪拌3-5min，然后靜置10-20min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
16.n3取25-35份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、1-3份改性劑、0.1-1份交聯(lián)助劑、100-120份水混合，在40-60℃下以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌30-60min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
17.所述發(fā)泡劑為十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉中的一種或兩種的混合物；優(yōu)選的，所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比(1-2):(1-2)混合而成。
18.所述改性劑為葡甘聚糖、異麥芽寡糖中的一種或兩種的混合物；優(yōu)選的，所述改性劑由葡甘聚糖、異麥芽寡糖按質(zhì)量比(1-2):(3-5)混合而成。
19.所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比(1-2):(5-6)混合而成。
20.甜葉菊stevia rebaudiana，葉含甜葉菊甙(rebaudioside)a、b、c、d、e，甜葉菊素(stere-bin)a、b、c、d、e、f、g、h，還含蛇菊醇(steviol)及其糖甙，主要為蛇菊甙，此外，還含甾醇類，有豆甾醇(stigmasterol)，β-谷甾醇(β-sitosterol)，菜油甾醇(campesterol)，另含有黃酮類及其甙類成分。其葉含有的菊甙及糖甙對(duì)人體具有多種有益效果：1.對(duì)糖代謝的影響：甜葉菊成分蛇菊酸等在大鼠腎皮質(zhì)小管抑制糖的合成和氧的吸收。2.對(duì)血管擴(kuò)張作用：蛇菊甙對(duì)正常或腎性高血壓大鼠引起血壓降低，利尿及尿鈉排泄增多，腎血流量及腎小球?yàn)V過(guò)率增加，這部分由于小動(dòng)脈擴(kuò)張引起的。cacl2可明顯減弱這種血管擴(kuò)張作用，提示蛇菊甙可能是一種鈣的粘抗劑，主要是通過(guò)抑制ca
2+
內(nèi)流入血管細(xì)胞，促使血管擴(kuò)張，從而達(dá)到降血壓作用。
21.糙殼菱蟹daldorfia horrida(linnaeus)：貝殼含碳酸鈣(caco3)，還含精氨酸(arginine)，天門冬氨酸(aspartic acid)，谷氨酸(glutamic acid)、甘氨酸(glycine)、丙氨酸(alanine)等14種氨基酸，其蟹殼是中醫(yī)上常用的一種降血壓藥物。
22.海決明：為馬蹄螺科動(dòng)物黑凹螺chlorostoma nigerrima(gmelin)及銹凹螺chlorostoma rustica(gmelin)的殼，含碳酸鈣、還含精氨酸、天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸等14種氨基酸，常用黑凹螺，也具有優(yōu)異的降血壓效果。
23.夏枯草prunella vulgaris l：含三萜皂甙，其甙元是齊墩果酸，尚含游離齊墩果酸、熊果酸、蕓香甙、生物堿，水溶性鹽類(68％為氯化鉀)，其皂甙成分也具有一定的降血壓效果。
24.本發(fā)明采用二氧化碳超臨界萃取工藝，能夠有效的提取出甜葉菊中的蛇菊甙、甜葉菊甙等有效成分。進(jìn)一步的，本發(fā)明將糙殼菱蟹蟹殼溶于稀鹽酸，利用發(fā)泡劑結(jié)合鈣離
子，向其中加入海決明微粉，使發(fā)泡劑一端吸附在海決明微粉上，再利用碳酸根和鈣離子反應(yīng)，在海決明微粉表面得到碳酸鈣中空微球，其具有較高的吸附能力。為了進(jìn)一步增強(qiáng)其吸附力，同時(shí)保護(hù)中藥組份不被胃酸破壞，本發(fā)明更進(jìn)一步的在碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉表面接枝葡甘聚糖和異麥芽寡糖，葡甘聚糖作為膳食纖維，不被吸收，不含熱量，有飽腹感，且能減少和延緩葡萄糖的吸收，是糖尿病的良好輔助藥物，且可預(yù)防肥胖和緩慢減肥；異麥芽寡糖難以被胃酶消化，甜度低，熱量低，基本上不增加血糖血脂，能促進(jìn)人體腸道內(nèi)雙歧桿菌的增殖，能抑制腸道內(nèi)有害菌及腐敗物質(zhì)的形成，增加維生素的含量，提高機(jī)體免疫力。二者復(fù)配，接枝在碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉表面，由于其長(zhǎng)鏈及長(zhǎng)鏈交聯(lián)形成的網(wǎng)絡(luò)，大大增加了碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉的吸附能力，得到具有高吸附性能的降壓微球。同時(shí)，葡甘聚糖和異麥芽寡糖難以被胃酸消化，因此，其能夠起到緩釋和保護(hù)中藥組份的作用。此外，由于葡甘聚糖能夠減少人體對(duì)葡萄糖的吸收，異麥芽寡糖難以被消化吸收，二者復(fù)配不會(huì)提高人體血糖含量，高血糖高血壓患者也可服用。
25.本發(fā)明將制得的降壓微球浸入到夏枯草果穗提取液中，使其吸附完全，得到降壓粉劑，夏枯草含有多種皂苷成分，具有一定的降血壓功效，可被用作降血壓中藥的輔藥，和海決明配合，起到極好的降血壓效果。但是，由于降壓粉劑中含有碳酸鈣成份，經(jīng)胃酸分解后，產(chǎn)生鈣離子，反而會(huì)促進(jìn)血管收縮，增加血壓。因此，我們進(jìn)一步加入甜葉菊萃取物，以其中高濃度的蛇菊甙，吸收鈣離子，防止其影響血壓。
26.夏枯草果穗提取液、甜葉菊葉片萃取物含有大量的多酚類物質(zhì)，在降血壓時(shí)生物利用度低限制其應(yīng)用。聚乳酸/乙醇酸共聚物具有有優(yōu)異的生物相容性，以及較好的包封、成膜等特性，可用于遞送藥物的載體，但是單一的聚乳酸/乙醇酸共聚物在腸道壁上的粘附性弱，限制了降壓藥物在胃腸的停留時(shí)間。
27.進(jìn)一步優(yōu)選的，一種降血壓中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：
28.s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在50-60℃、20-30pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至300-600μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為30-35kg/h，萃取壓力為20-25mpa，一級(jí)分離壓力為6-10mpa，二級(jí)分離壓力為4-8mpa，萃取溫度為40-60℃，萃取時(shí)間為3-5h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
29.s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:(5-8)ml浸入水中20-40min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.1-1mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:(8-12)ml加入水中，煮沸提取2-3h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
30.s3按質(zhì)量份計(jì)，取20-40份降壓微球加入到90-100份步驟s2制得的濾液中，煮沸并輔以超聲處理20-30min，超聲功率為600-800w，頻率40-80khz，接著降溫至60-80℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至2％-5％，真空氣壓為20-30pa，得到降壓粉劑；
31.s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比(1-2):(1-2)混合，然后加熱至70-90℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)360-420目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度16-20pa.s，得到提純蜂蜜；
32.s5按質(zhì)量份計(jì)，將3-10份甜葉菊葉片萃取物、20-40份降壓粉劑、16-35份提純蜂蜜混合，加熱至40-50℃，然后以160-200r/min轉(zhuǎn)速攪拌30-40min，最后，將其制成2-3mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物；
33.s6按質(zhì)量份計(jì)，將5-10份降血壓藥物組合物加入5-15份水中混合均勻，得到降血壓藥物組合物水溶液；將120-250份聚乳酸/乙醇酸共聚物、120-250份蛋黃卵磷脂加入25-50份丙酮中混合均勻，得到聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液；將降血壓藥物組合物水溶液與聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液混合，得到混合溶液ⅰ；將250-500份羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖加入50-100份水中混合均勻，得到羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液；將500-1000份聚丙烯酸加入100-200份水中混合均勻，得到聚丙烯酸水溶液；將羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液、聚丙烯酸水溶液混合進(jìn)行超聲處理20-40min，其中超聲功率為500-800w、超聲頻率為20-30khz，得到混合溶液ⅱ；將混合溶液ⅱ加入到混合溶液ⅰ用勻漿機(jī)勻漿15-30min，然后以1000-2000r/min磁力攪拌12-24h，得到乳液，將乳液加熱至45-50℃旋蒸10-12h去除丙酮，然后在2-4℃、以10000-30000r/min離心30-60min，取沉淀、洗滌、冷凍干燥，得到降血壓中藥制劑。
34.本發(fā)明人利用聚乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂的生物相容性，易促進(jìn)降壓藥物的吸收的同時(shí)結(jié)合羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖對(duì)降壓藥物進(jìn)行處理，延長(zhǎng)降壓藥物在在胃腸道腔內(nèi)的停留，減少了腸道清除機(jī)制，增加了與吸收表面腸上皮的相互作用。其可能的原因是：聚乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂、聚丙烯酸、羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖通過(guò)氫鍵和疏水相互作用包裹酚類化合物，從而增加其水溶性，防止胃腸道中的氧化。同時(shí)羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖帶正電荷，表皮細(xì)胞、黏膜上皮細(xì)胞帶有負(fù)電荷，通過(guò)靜電作用，增加了降壓藥物在腸胃的粘附性，進(jìn)一步延長(zhǎng)藥物的停留時(shí)間，減少腸道清除機(jī)制和與生物靶點(diǎn)的相互作用，促進(jìn)腸道吸收。
35.本發(fā)明有益效果：
36.本發(fā)明公開(kāi)了一種降血壓中藥制劑及其制備方法，利用糙殼菱蟹蟹殼和海決明微粉制備出了碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉；并進(jìn)一步采用葡甘聚糖和異麥芽寡糖接枝碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉得到降壓微球，具有良好的降血壓效果和吸附性，還具有緩釋和保護(hù)中藥組份的作用。為了減弱鈣離子對(duì)血管收縮的影響，進(jìn)一步將降壓粉劑和甜葉菊葉片萃取物混合，以其中高濃度的蛇菊甙，吸收鈣離子，防止其影響血壓。采用聚乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂、聚丙烯酸、羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖通過(guò)氫鍵和疏水相互作用包裹降血壓組合物，延長(zhǎng)藥物的停留時(shí)間，減少腸道清除機(jī)制和與生物靶點(diǎn)的相互作用，促進(jìn)腸道吸收。
具體實(shí)施方式
37.甜葉菊葉片stevia rebaudiana，采購(gòu)自亳州市佰林堂藥業(yè)有限公司。
38.夏枯草的干燥果穗prunella vulgaris l，采購(gòu)自亳州市弘寶堂商貿(mào)有限公司。
39.蜂蜜，藥用級(jí)，采購(gòu)自睿誠(chéng)康醫(yī)藥科技(陜西)有限公司。
40.糙殼菱蟹蟹殼、海決明，采購(gòu)自贛榆區(qū)海頭鎮(zhèn)接明海鮮經(jīng)營(yíng)部。
41.十二烷基硫酸鈉，cas號(hào)：151-21-3，醫(yī)藥級(jí)，采購(gòu)自山東千里宏生物科技股份有限公司。
42.葡甘聚糖，cas號(hào)：37220-17-0，食品級(jí)，采購(gòu)自南京綠意生物科技有限公司。
43.異麥芽寡糖，cas號(hào)：499-40-1，食品級(jí)，采購(gòu)自南京綠意生物科技有限公司。
44.聚乳酸/乙醇酸共聚物，聚乳酸:乙醇酸＝75:25，分子量為30kda，購(gòu)買自山東岱罡
生物科技有限公司
45.蛋黃卵磷脂，cas：93685-90-6，食品級(jí)，購(gòu)買自深圳樂(lè)芙生物科技有限公司。
46.羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖，醫(yī)藥級(jí)，購(gòu)買自河北仟盛生物科技有限公司。
47.聚丙烯酸，mw＝45000，產(chǎn)品編號(hào)：pc04924，購(gòu)買自廣東翁江化學(xué)試劑有限公司。
48.實(shí)施例1
49.一種降血壓藥物組合物的制備方法，包括以下步驟：
50.s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在55℃、25pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至400μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為32kg/h，萃取壓力為25mpa，一級(jí)分離壓力為8mpa，二級(jí)分離壓力為6mpa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為4h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
51.s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:6ml浸入水中30min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.4mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:10ml加入水中，煮沸提取2h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
52.s3按質(zhì)量份計(jì)，取30份降壓微球加入到100份步驟s2制得的夏枯草果穗提取液中，煮沸并輔以超聲處理25min，超聲功率為700w，頻率60khz，接著降溫至70℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至3％，真空氣壓為25pa，得到降壓粉劑；
53.s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比1:1混合，然后加熱至80℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)400目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度18pa.s，得到提純蜂蜜；
54.s5按質(zhì)量份計(jì)，將7份甜葉菊葉片萃取物、30份降壓粉劑、24份提純蜂蜜混合，加熱至45℃，然后以180r/min轉(zhuǎn)速攪拌35min，最后，將其制成2mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物。
55.所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
56.n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，得到溶液a；
57.n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)以100r/min攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
58.n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下、以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
59.所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
60.所述改性劑由葡甘聚糖、異麥芽寡糖按質(zhì)量比1:4混合而成。
61.所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
62.實(shí)施例2
63.一種降血壓藥物組合物的制備方法，包括以下步驟：
64.s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在55℃、25pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至400μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行
超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為32kg/h，萃取壓力為25mpa，一級(jí)分離壓力為8mpa，二級(jí)分離壓力為6mpa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為4h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
65.s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:6ml浸入水中30min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.4mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:10ml加入水中，煮沸提取2h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
66.s3按質(zhì)量份計(jì)，取步驟s2制得的夏枯草果穗提取液，煮沸并輔以超聲處理25min，超聲功率為700w，頻率60khz，接著降溫至70℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至3％，真空氣壓為25pa，得到降壓粉劑；
67.s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比1:1混合，然后加熱至80℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)400目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度18pa.s，得到提純蜂蜜；
68.s5按質(zhì)量份計(jì)，將7份甜葉菊葉片萃取物、30份降壓粉劑、24份提純蜂蜜混合，加熱至45℃，然后以180r/min轉(zhuǎn)速攪拌35min，最后，將其制成2mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物。
69.實(shí)施例3
70.一種降血壓藥物組合物的制備方法，包括以下步驟：
71.s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在55℃、25pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至400μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為32kg/h，萃取壓力為25mpa，一級(jí)分離壓力為8mpa，二級(jí)分離壓力為6mpa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為4h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
72.s2將蜂蜜和水按質(zhì)量比1:1混合，然后加熱至80℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)400目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度18pa.s，得到提純蜂蜜；
73.s3按質(zhì)量份計(jì)，將7份甜葉菊葉片萃取物、30份降壓微球、24份提純蜂蜜混合，加熱至45℃，然后以180r/min轉(zhuǎn)速攪拌35min，最后，將其制成2mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物。
74.所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
75.n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼粉碎至400目，然后加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，過(guò)濾，得到溶液a；
76.n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
77.n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
78.所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
79.所述改性劑由葡甘聚糖、異麥芽寡糖按質(zhì)量比1:4混合而成。
80.所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
81.實(shí)施例4
82.與實(shí)施例1基本相同，區(qū)別僅在于：
83.所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
84.n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，得到溶液a；
85.n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
86.n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
87.所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
88.所述改性劑為葡甘聚糖。
89.所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
90.實(shí)施例5
91.與實(shí)施例1基本相同，區(qū)別僅在于：
92.所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
93.n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，得到溶液a；
94.n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
95.n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
96.所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
97.所述改性劑為異麥芽寡糖。
98.所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
99.測(cè)試?yán)?
100.驗(yàn)證各實(shí)施例制得的降血壓藥物組合物對(duì)高血壓大鼠血壓的影響，具體步驟如下：
101.1、自發(fā)性高血壓大鼠購(gòu)自蘇州工業(yè)園區(qū)愛(ài)爾麥特科技有限公司，9-11周大小，雄性，體重280-320g，血壓超過(guò)180mmhg；
102.2、將所述自發(fā)性高血壓大鼠分為6組飼養(yǎng)，每組5只，在22℃的溫度下12小時(shí)循環(huán)光照，供給相同的食物和飲水；
103.3、喂食實(shí)施例所制得的降血壓藥物組合物，每組對(duì)應(yīng)一個(gè)實(shí)施例，每只小鼠每次喂食1g，每天3次；
104.4、分別測(cè)量各組高血壓大鼠在0天、4天、和8天的收縮壓平均值，所有的結(jié)果都進(jìn)行了三次重復(fù)測(cè)量。測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表1。
105.表1：小鼠血壓測(cè)量結(jié)果
[0106] 第0天/mmhg第4天/mmhg第8天/mmhg實(shí)施例1200167141實(shí)施例2198179166實(shí)施例3199177162實(shí)施例4200171148實(shí)施例5199172151
[0107]
由表1可以看出，實(shí)施例1所制得的降血壓藥物組合物顯示出來(lái)最好的降血壓效果。實(shí)施例2和實(shí)施例3所制得的降血壓藥物組合物效果相近，且也弱于實(shí)施例1，這說(shuō)明單一的夏枯草果穗提取液或降壓微球的降血壓能力也較弱，這是因?yàn)橄目莶莨虢笛獕盒Ч揪筒幻黠@，多被用作降血壓中藥的輔藥，但是，其和海決明協(xié)同，起到極好的降血壓效果。實(shí)施例4和實(shí)施例5所制得的降血壓藥物組合物也顯示出了優(yōu)異的降血壓效果，但是，比實(shí)施例1略低，其和實(shí)施例1的區(qū)別在于，實(shí)施例4所用降壓微球改性劑為葡甘聚糖，實(shí)施例5所用降壓微球改性劑為異麥芽寡糖。這表明葡甘聚糖和異麥芽寡糖的復(fù)配具有協(xié)同增效的作用。這是由于葡甘聚糖和異麥芽寡糖能夠在降壓微球表面形成交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，增加了吸附性能，能夠留住更多的夏枯草果穗提取液，同時(shí)，葡甘聚糖和異麥芽寡糖協(xié)同，其對(duì)中藥組份的保護(hù)效果更好。
[0108]
測(cè)試?yán)?
[0109]
實(shí)施例制得的降血壓藥物組合物的臨床使用效果測(cè)試，具體步驟如下：
[0110]
選取150名男性高血壓患者，收縮壓在180-190mmhg之間，將其分為6組，每組25人，供給相同的食物和飲水，區(qū)別僅在于各組分別服用實(shí)施例1-6制備得到的降血壓藥物組合物，每天3次，每次5g。
[0111]
分別測(cè)量各組志愿者在0天、4天、和8天的收縮壓平均值，所有的結(jié)果都進(jìn)行了三次重復(fù)測(cè)量。測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表2。
[0112]
表2：臨床試驗(yàn)結(jié)果
[0113] 第0天/mmhg第4天/mmhg第8天/mmhg實(shí)施例1186139123實(shí)施例2188158148實(shí)施例3187156146實(shí)施例4186145129實(shí)施例5188147131
[0114]
測(cè)試?yán)?為臨床試驗(yàn)，由表2可以看出，其結(jié)果和測(cè)試?yán)恢拢瑢?shí)施例1顯示出來(lái)極其優(yōu)異的降血壓效果。這是由于本發(fā)明將糙殼菱蟹蟹殼溶于稀鹽酸，利用發(fā)泡劑結(jié)合鈣離子，向其中加入海決明微粉，使發(fā)泡劑一端吸附在海決明微粉上，再利用碳酸根和鈣離子反應(yīng)，在海決明微粉表面得到碳酸鈣中空微球，其具有較高的吸附能力。為了進(jìn)一步增強(qiáng)其吸附力，同時(shí)保護(hù)中藥組份不被胃酸破壞，本發(fā)明更進(jìn)一步的在碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉表面接枝葡甘聚糖和異麥芽寡糖，二者復(fù)配，接枝在碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉表面，由于其長(zhǎng)鏈及長(zhǎng)鏈交聯(lián)形成的網(wǎng)絡(luò)，大大增加了碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉的吸附能力，得到具有高吸附性能的降壓微球。同時(shí)，葡甘聚糖和異麥芽寡糖難以被胃酸消化，因此，其能夠起到緩釋和保護(hù)中藥組份的作用。
[0115]
本發(fā)明將制得的降壓微球浸入到夏枯草果穗提取液中，使其吸附完全，得到降壓粉劑，夏枯草含有多種皂苷成分，具有一定的降血壓功效，可被用作降血壓中藥的輔藥，和海決明配合，起到極好的降血壓效果。但是，由于降壓粉劑中含有碳酸鈣成份，經(jīng)胃酸分解后，產(chǎn)生鈣離子，反而會(huì)促進(jìn)血管收縮，增加血壓。因此，我們進(jìn)一步加入甜葉菊萃取物，甜葉菊萃取物中的蛇菊甙是一種鈣的粘抗劑，主要是通過(guò)抑制ca2+內(nèi)流入血管細(xì)胞，促使血管擴(kuò)張，從而達(dá)到降血壓作用，以其中高濃度的蛇菊甙，吸收鈣離子，防止其影響血壓。甜葉菊萃取物、夏枯草果穗提取液、降壓微球共同作用，使得所制得的降血壓藥物組合物顯示出了優(yōu)異的降血壓效果。
[0116]
測(cè)試?yán)?
[0117]
降血糖能力測(cè)試：根據(jù)ws/t 652-2019《食物血糖生成指數(shù)測(cè)定方法》測(cè)試由本發(fā)明各實(shí)施例所制得的降血壓藥物組合物對(duì)人體血糖的影響。選取160位年齡在18歲至60歲，男女各半，非孕婦及乳母，體質(zhì)指數(shù)(bmi，body mass index)在正常范圍內(nèi)(18.5kg/m
2-24.0kg/m2)，無(wú)糖尿病史或糖耐量受損，無(wú)其他代謝性疾病、消化系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病和精神疾病等，無(wú)對(duì)待測(cè)食物過(guò)敏史和不耐受史，能耐受至少10h的空腹?fàn)顟B(tài)的健康成年人作為受試者；每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置10位受試者。以80g米飯和3g由本發(fā)明各實(shí)施例所制得的降血壓藥物組合物作為每次試驗(yàn)的待測(cè)食物；設(shè)置一組對(duì)照組的待測(cè)食物僅為80g米飯和3g蒸餾水，無(wú)所述降血壓藥物組合物。
[0118]
測(cè)定周期包含六次獨(dú)立試食測(cè)定，待測(cè)食物(80g米飯和3g由本發(fā)明各實(shí)施例所制得的降血壓藥物組合物)3次，參考食物(80g米飯和3g蒸餾水)3次；每次獨(dú)立試食測(cè)定間隔72h，待測(cè)食物安排在兩次參考食物測(cè)定之間進(jìn)行；測(cè)定前三日受試者規(guī)律作息正常飲食；測(cè)定前一日晚餐避免高膳食纖維及高糖食物，22:00前開(kāi)始禁食；測(cè)定當(dāng)日清晨避免劇烈運(yùn)動(dòng)，受試者靜坐10min后開(kāi)始試食測(cè)定；間隔5min，采集2次空腹血樣；開(kāi)始進(jìn)食，在10min內(nèi)進(jìn)食完全部受試物和水，從第一口進(jìn)食時(shí)間開(kāi)始計(jì)時(shí)；于餐后30min采集血樣；采集部位為指尖毛細(xì)血管血，測(cè)定周期內(nèi)保持采血部位一致，采血量為1ml；采集血樣后立即測(cè)定血糖值并取平均值。結(jié)果見(jiàn)表3。
[0119]
表3：血糖值測(cè)定結(jié)果
[0120] 餐后30min的血糖變化值(mmol/l)實(shí)施例12.6實(shí)施例42.9實(shí)施例53.1對(duì)照組4.4
[0121]
由表3可以看出，實(shí)施例1對(duì)應(yīng)的志愿者血糖變化值最小，且實(shí)施例2、實(shí)施例4和實(shí)施例5對(duì)應(yīng)的志愿者血糖變化值都比對(duì)照組小，因此，可以說(shuō)明葡甘聚糖和異麥芽寡糖的復(fù)配具有降血糖的作用。這是由于葡甘聚糖作為膳食纖維，不被吸收，不含熱量，有飽腹感，且能減少和延緩葡萄糖的吸收，是糖尿病的良好輔助藥物，且可預(yù)防肥胖和緩慢減肥；異麥芽寡糖難以被胃酶消化，甜度低，熱量低，基本上不增加血糖血脂，能促進(jìn)人體腸道內(nèi)雙歧桿菌的增殖，能抑制腸道內(nèi)有害菌及腐敗物質(zhì)的形成，增加維生素的含量，提高機(jī)體免疫力。二者復(fù)配，接枝在碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉表面，由于其長(zhǎng)鏈及長(zhǎng)鏈交聯(lián)形成的網(wǎng)絡(luò)，大大增加了碳酸鈣負(fù)載的海決明微粉的吸附能力，得到具有高吸附性能的降壓微球。同時(shí)，葡甘
聚糖和異麥芽寡糖難以被胃酸消化，因此，其能夠起到緩釋和保護(hù)中藥組份的作用。此外，由于葡甘聚糖能夠減少人體對(duì)葡萄糖的吸收，異麥芽寡糖難以被消化吸收，二者復(fù)配不會(huì)提高人體血糖含量，高血糖高血壓患者也可服用。
[0122]
實(shí)施例6
[0123]
一種降血壓中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：
[0124]
s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在55℃、25pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至400μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為32kg/h，萃取壓力為25mpa，一級(jí)分離壓力為8mpa，二級(jí)分離壓力為6mpa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為4h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
[0125]
s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:6ml浸入水中30min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.4mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:10ml加入水中，煮沸提取2h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
[0126]
s3按質(zhì)量份計(jì)，取30份降壓微球加入到100份步驟s2制得的夏枯草果穗提取液中，煮沸并輔以超聲處理25min，超聲功率為700w，頻率60khz，接著降溫至70℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至3％，真空氣壓為25pa，得到降壓粉劑；
[0127]
s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比1:1混合，然后加熱至80℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)400目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度18pa.s，得到提純蜂蜜；
[0128]
s5按質(zhì)量份計(jì)，將7份甜葉菊葉片萃取物、30份降壓粉劑、24份提純蜂蜜混合，加熱至45℃，然后以180r/min轉(zhuǎn)速攪拌35min，最后，將其制成2mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物；
[0129]
s6按質(zhì)量份計(jì)，將10份降血壓藥物組合物加入15份水中混合均勻，得到降血壓藥物組合物水溶液；將250份plga、250份蛋黃卵磷脂加入25份丙酮中混合均勻，得到聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液；將降血壓藥物組合物水溶液與聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液混合，得到混合溶液ⅰ；將500份羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖加入50份水中混合均勻，得到羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液；將1000份聚丙烯酸加入200份水中混合均勻，得到聚丙烯酸水溶液；將羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液、聚丙烯酸水溶液混合進(jìn)行超聲處理20min，其中超聲功率為500w、超聲頻率為20khz，得到混合溶液ⅱ；將混合溶液ⅱ加入到混合溶液ⅰ用勻漿機(jī)勻漿30min，然后以1500r/min磁力攪拌24h，得到乳液，將乳液加熱至45℃旋蒸12h去除丙酮，然后在4℃、以15000r/min離心60min，取沉淀、洗滌、冷凍干燥，得到降血壓中藥制劑。
[0130]
所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
[0131]
n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，得到溶液a；
[0132]
n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)以100r/min攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
[0133]
n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交
聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下、以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
[0134]
所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
[0135]
所述改性劑由葡甘聚糖、異麥芽寡糖按質(zhì)量比1:4混合而成。
[0136]
所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
[0137]
實(shí)施例7
[0138]
一種降血壓中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：
[0139]
s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在55℃、25pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至400μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為32kg/h，萃取壓力為25mpa，一級(jí)分離壓力為8mpa，二級(jí)分離壓力為6mpa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為4h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；
[0140]
s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:6ml浸入水中30min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.4mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:10ml加入水中，煮沸提取2h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；
[0141]
s3按質(zhì)量份計(jì)，取30份降壓微球加入到100份步驟s2制得的夏枯草果穗提取液中，煮沸并輔以超聲處理25min，超聲功率為700w，頻率60khz，接著降溫至70℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至3％，真空氣壓為25pa，得到降壓粉劑；
[0142]
s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比1:1混合，然后加熱至80℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)400目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度18pa.s，得到提純蜂蜜；
[0143]
s5按質(zhì)量份計(jì)，將7份甜葉菊葉片萃取物、30份降壓粉劑、24份提純蜂蜜混合，加熱至45℃，然后以180r/min轉(zhuǎn)速攪拌35min，最后，將其制成2mm直徑的藥丸，得到所述降血壓藥物組合物；
[0144]
s6按質(zhì)量份計(jì)，將10份降血壓藥物組合物加入15份水中混合均勻，得到降血壓藥物組合物水溶液；將250份plga加入25份丙酮中混合均勻，得到聚乳酸/乙醇酸共聚物溶液；將降血壓藥物組合物水溶液與聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液混合，得到混合溶液ⅰ；將1000份聚丙烯酸加入200份水中混合均勻，得到聚丙烯酸水溶液；將聚丙烯酸水溶液混合進(jìn)行超聲處理20min，其中超聲功率為500w、超聲頻率為20khz，得到混合溶液ⅱ；將混合溶液ⅱ加入到混合溶液ⅰ用勻漿機(jī)勻漿15-30min，然后以1500r/min磁力攪拌12-24h，得到乳液，將乳液加熱至45℃旋蒸12h去除丙酮，然后在4℃、以15000r/min離心60min，取沉淀、洗滌、冷凍干燥，得到降血壓中藥制劑。
[0145]
所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：
[0146]
n1按質(zhì)量份計(jì)，取7份糙殼菱蟹蟹殼加入110份0.6wt％鹽酸中，并向其中加入4份發(fā)泡劑，以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌6min，得到溶液a；
[0147]
n2按質(zhì)量份計(jì)，將30份海決明粉碎至150μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2ml/min速率向其中滴加25wt％碳酸鈉水溶液15份，滴加完繼續(xù)以100r/min攪拌4min，然后靜置15min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；
[0148]
n3按質(zhì)量份計(jì)，取30份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、2份改性劑、0.3份交
聯(lián)助劑、110份水混合，在50℃下、以100r/min轉(zhuǎn)速攪拌40min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。
[0149]
所述發(fā)泡劑由十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉按質(zhì)量比1:1混合而成。
[0150]
所述改性劑由葡甘聚糖、異麥芽寡糖按質(zhì)量比1:4混合而成。
[0151]
所述交聯(lián)助劑由乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比1:5混合而成。
[0152]
測(cè)試?yán)?
[0153]
利用大鼠在體單向腸灌流模型，采用hplc法測(cè)定灌流液中甜菊糖苷含量，分別考察
[0154]
當(dāng)實(shí)施例和對(duì)比例所得降血壓中藥制劑對(duì)甜菊糖苷腸道吸收的促進(jìn)作用。
[0155]
按照以下步驟進(jìn)行大鼠在體單向腸灌流模型的試驗(yàn)：
[0156]
s1：清潔級(jí)sd大鼠，體重200-240g,雄性，購(gòu)自東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，飼養(yǎng)條件:22士2℃，50土5％相對(duì)濕度，12h光照/12h黑暗,進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)鼠糧，自由飲水。在實(shí)驗(yàn)前飼養(yǎng)1周以適應(yīng)環(huán)境。大鼠隨機(jī)分2組，每組3只；
[0157]
s2大鼠禁食12h，自由飲水，1％鈉溶液(5ml/kg)腹腔注射麻醉，背位固定，保持體溫；
[0158]
s3：沿腹中線打開(kāi)腹腔約3cm，取空腸段約10cm，距幽門1cm處于兩端切口后，插管并結(jié)扎，用37℃恒溫的生理鹽水以5ml/min流速將腸內(nèi)容物沖洗干凈，再用空氣將生理鹽水排空，安裝裝置；
[0159]
s4：用預(yù)熱至37℃的灌流液(分?jǐn)?shù)為1％)以0.2ml/min流速灌流30分鐘，平衡管路及腸段；灌流液由7.78mm葡萄糖、133mm nac1、4.56mm kci、1.50mm nahpo4、0.20mm mgcl2、16mm nahco3和3.33mm cacl2組成。配制含實(shí)施例和對(duì)比例所得降血壓中藥制劑(50μg/ml)的灌流液；
[0160]
s5開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別收集0-15、15-30、30-45、45-60、60-75、75-90min、90-105、105-120的灌流液，稱重，記錄灌流液和收集液重量；
[0161]
s6：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測(cè)量腸段長(zhǎng)度與內(nèi)徑。
[0162]
以hplc法測(cè)定灌流液中甜菊糖苷的含量，并按下式計(jì)算計(jì)算藥物的吸收速率常數(shù)ka：
[0163][0164]
其中c
in
表示入口端的甜菊糖苷的濃度，c
out(corrected)
表示出口端的甜菊糖苷的濃度；q表示流速(0.2ml/min)，v表示腸斷的體積。
[0165]
表4降血壓中藥制劑的腸道吸收效果
[0166] ka/10-3
min-1
實(shí)施例6348.27實(shí)施例7332.51
[0167]
利用聚乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂的生物相容性，易促進(jìn)降壓藥物的吸收的同時(shí)結(jié)合羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖對(duì)降壓藥物進(jìn)行處理，延長(zhǎng)降壓藥物在在胃腸道腔內(nèi)的停留，減少了腸道清除機(jī)制，增加了與吸收表面腸上皮的相互作用。其可能的原因是：聚
乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂、聚丙烯酸、羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖通過(guò)氫鍵和疏水相互作用包裹酚類化合物，從而增加其水溶性，防止胃腸道中的氧化。同時(shí)羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖帶正電荷，表皮細(xì)胞、黏膜上皮細(xì)胞帶有負(fù)電荷，通過(guò)靜電作用，增加了降壓藥物在腸胃的粘附性，進(jìn)一步延長(zhǎng)藥物的停留時(shí)間，減少腸道清除機(jī)制和與生物靶點(diǎn)的相互作用，促進(jìn)腸道吸收。
技術(shù)特征：
1.一種降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：s1甜葉菊成分提取：將甜葉菊葉片清洗、瀝干，然后在50-60℃、20-30pa條件下進(jìn)行真空干燥至表面無(wú)水份，將干燥后的甜葉菊葉片粉碎至300-600μm，接著對(duì)粉碎后的甜葉菊葉片進(jìn)行超臨界二氧化碳萃取，二氧化碳流量為30-35kg/h，萃取壓力為20-25mpa，一級(jí)分離壓力為6-10mpa，二級(jí)分離壓力為4-8mpa，萃取溫度為40-60℃，萃取時(shí)間為3-5h，萃取后收集一級(jí)分離釜和二級(jí)分離釜中的提取物，合并，得到甜葉菊葉片萃取物；s2夏枯草成分提取：將夏枯草的干燥果穗按浴比1g:(5-8)ml浸入水中20-40min，然后洗凈、干燥、粉碎至0.1-1mm，接著將粉碎好的夏枯草果穗按浴比1g:(8-12)ml加入水中，煮沸提取2-3h，過(guò)濾取濾液，重復(fù)提取1次，合并2次濾液，得到夏枯草果穗提取液；s3按質(zhì)量份計(jì)，取20-40份降壓微球加入到90-100份步驟s2制得的濾液中，煮沸并輔以超聲處理20-30min，超聲功率為600-800w，頻率40-80khz，接著降溫至60-80℃，進(jìn)行真空干燥至含水量至2％-5％，真空氣壓為20-30pa，得到降壓粉劑；s4將蜂蜜和水按質(zhì)量比(1-2):(1-2)混合，然后加熱至70-90℃，除去蜂蜜表面的浮沫，再經(jīng)360-420目紗網(wǎng)過(guò)濾，將過(guò)濾后的蜂蜜再放入鍋中，加熱濃縮至黏度16-20pa.s，得到提純蜂蜜；s5按質(zhì)量份計(jì)，將3-10份甜葉菊葉片萃取物、20-40份降壓粉劑、16-35份提純蜂蜜混合，加熱至40-50℃，然后以160-200r/min轉(zhuǎn)速攪拌30-40min，最后，將其制成2-3mm直徑的藥丸，得到降血壓藥物組合物；s6按質(zhì)量份計(jì)，將5-10份降血壓藥物組合物加入5-15份水中混合均勻，得到降血壓藥物組合物水溶液；將120-250份聚乳酸/乙醇酸共聚物加入25-50份丙酮中混合均勻，得到聚乳酸/乙醇酸共聚物水溶液；將降血壓藥物組合物水溶液與聚乳酸/乙醇酸共聚物水溶液混合，得到混合溶液ⅰ；將500-1000份聚丙烯酸加入100-200份水中混合均勻，得到聚丙烯酸水溶液；將聚丙烯酸水溶液混合進(jìn)行超聲處理20-40min，其中超聲功率為500-800w、超聲頻率為20-30khz，得到混合溶液ⅱ；將混合溶液ⅱ加入到混合溶液ⅰ用勻漿機(jī)勻漿15-30min，然后以1000-2000r/min磁力攪拌12-24h，得到乳液，將乳液加熱至45-50℃旋蒸10-12h去除丙酮，然后在2-4℃、以10000-30000r/min離心30-60min，取沉淀、洗滌、冷凍干燥，得到降血壓中藥制劑。2.如權(quán)利要求1所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟s6為按質(zhì)量份計(jì)，將5-10份降血壓藥物組合物加入5-15份水中混合均勻，得到降血壓藥物組合物水溶液；將120-250份聚乳酸/乙醇酸共聚物、120-250份蛋黃卵磷脂加入25-50份丙酮中混合均勻，得到聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液；將降血壓藥物組合物水溶液與聚乳酸/乙醇酸共聚物混合溶液混合，得到混合溶液ⅰ；將250-500份羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖加入50-100份水中混合均勻，得到羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液；將500-1000份聚丙烯酸加入100-200份水中混合均勻，得到聚丙烯酸水溶液；將羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖水溶液、聚丙烯酸水溶液混合進(jìn)行超聲處理20-40min，其中超聲功率為500-800w、超聲頻率為20-30khz，得到混合溶液ⅱ；將混合溶液ⅱ加入到混合溶液ⅰ用勻漿機(jī)勻漿15-30min，然后以1000-2000r/min磁力攪拌12-24h，得到乳液，將乳液加熱至45-50℃旋蒸10-12h去除丙酮，然后在2-4℃、以10000-30000r/min離心30-60min，取沉淀、洗滌、冷凍干燥，得到降血壓中藥制劑。3.如權(quán)利要求1所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述降壓微球的制備方
法，包括以下步驟：將糙殼菱蟹蟹殼、鹽酸、海決明粉、改性劑、水混合，經(jīng)過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。4.如權(quán)利要求3所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述降壓微球的制備方法，包括以下步驟：n1按質(zhì)量份計(jì)，取3-10份糙殼菱蟹蟹殼加入100-120份0.4-0.8wt％鹽酸中，并向其中加入3-5份發(fā)泡劑，以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌5-10min，得到溶液a；n2按質(zhì)量份計(jì)，將25-35份海決明粉碎至100-200μm，加入步驟n1制得的溶液a中，繼續(xù)以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌攪拌，再以2-3ml/min速率向其中滴加20-30wt％碳酸鈉水溶液10-20份，滴加完繼續(xù)攪拌3-5min，然后靜置10-20min，離心取沉淀、洗滌、干燥，得到碳酸鈣負(fù)載的海決明粉；n3按質(zhì)量份計(jì)，取25-35份步驟n2制得的碳酸鈣負(fù)載的海決明粉、1-3份改性劑、0.1-1份交聯(lián)助劑、100-120份水混合，在40-60℃下以80-120r/min轉(zhuǎn)速攪拌30-60min，然后過(guò)濾、洗滌、干燥，得到所述降壓微球。5.如權(quán)利要求4所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述發(fā)泡劑為十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉中的一種或兩種的混合物。6.如權(quán)利要求3或4所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述改性劑為葡甘聚糖、異麥芽寡糖中的一種或兩種的混合物。7.如權(quán)利要求4所述降血壓中藥制劑的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián)助劑為乙酸、乙酸銨按質(zhì)量比(1-2):(5-6)的混合物。8.一種降血壓中藥制劑，其特征在于，由權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述降血壓中藥制劑的制備方法制備而成。
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，公開(kāi)了一種降血壓中藥制劑，采用聚乳酸/乙醇酸共聚物、蛋黃卵磷脂、聚丙烯酸、羥丙基三甲基氯化銨殼聚糖通過(guò)氫鍵和疏水相互作用包裹降血壓組合物，延長(zhǎng)藥物的停留時(shí)間，減少腸道清除機(jī)制和與生物靶點(diǎn)的相互作用，促進(jìn)腸道吸收。促進(jìn)腸道吸收。
