一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法
1.本發明涉及制糖廢密再利用技術領域，尤其是指一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法。
背景技術：
2.制糖廢蜜含有大量的多種類的糖和蛋白質,是發酵釀造工業中廉價質優的原料，如多種礦物質、維生胺類等，是微生物進行發酵的理想復合原料。目前,國內外利用廢糖蜜進行發酵所獲得的主要產品有：酒精、檸檬酸、味精,已經大宗生產。除此之外,糖蜜還可以用來發酵生產酵母、甘油乳酸、丙酮、丁醇、富馬酸、丁二醇、丁酸及賴氨酸等有用的產品。
技術實現要素：
3.本發明要解決的技術問題是提供一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，能制備出有利于固氮凈化吸收土壤重金屬，改善土質的微生物菌劑，提高農作物品質。
4.為了解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：
5.一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，包括以下步驟：
6.s1，菌種活化：挑選膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠質芽孢桿菌、釀酒酵母分別進行活化；
7.s2，對s1完成活化的菌種進行擴增；
8.s3，將s2中完成擴增的菌種按比例混合制成初始混合菌劑；
9.s4，利用制糖廢蜜制作培養基；
10.s5，將s3中初始混合菌劑放入s4的培養基中進行發酵，得到微生物菌劑。
11.優選地，步驟s2中各菌種的混合比例如下：25～35％的膠凍樣類芽孢桿菌、27～32％的側孢短小芽孢桿菌、15～25％的巨大芽孢桿菌、8～14％膠質芽孢桿菌及6～12％的釀酒酵母。
12.優選地，步驟s4中的培養基由以下重量份的原料組成：干牛糞80～120份、煤渣30～40份、秸稈碎40～60份、尿素1～3份、石膏2～4份、制糖廢蜜1～2份、水適量。
13.優選地，步驟s5中菌種在培養基中的發酵時間為7～8天。
14.優選地，步驟s2中至少采用兩種擴增培養基進行擴增培養。
15.本發明的有益效果：
16.本發明能制備出有利于固氮凈化吸收土壤重金屬，改善土質的微生物菌劑，提高農作物品質。
具體實施方式
17.為了便于本領域技術人員的理解，下面結合實施例對本發明作進一步的說明，實施方式提及的內容并非對本發明的限定。
18.實施例1
19.從冰箱中取出甘油凍管保藏的膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠質芽孢桿菌、釀酒酵母，在經紫外滅菌的超凈工作臺中融解，移液無菌吸取1ml接入已滅菌的10ml液體種子活化培養基中。
20.用于活化膠凍樣類芽孢桿菌的培養基成分以質量百分比計，包括0.9％的淀粉、0.4％的制糖廢蜜、0.5％的磷酸氫二鉀、0.5％的的硫酸鎂、0.2％的豆餅粉、0.1％的硫酸鋅及適量水培養基的ph值調到7.0，將培養基在115℃條件下滅菌20分鐘后再用來活化膠凍樣類芽孢桿菌。
21.用于活化側孢短小芽孢桿菌的培養基為營養瓊脂培養基，培養基的ph值調到7.0，將培養基在115℃條件下滅菌20分鐘后再用來活化側孢短小芽孢桿菌。
22.用于活化巨大芽孢桿菌的培養基為lb斜面培養基，lb斜面培養基在120℃條件下滅菌15分鐘后再進行巨大芽孢桿菌活化。
23.用于活化釀酒酵母的培養基的成分以質量百分比計，包括1.0％的酵母膏、2.0％的蛋白胨、2％的蔗糖，將培養基在115℃條件下滅菌20分鐘再用來活化釀酒酵母。
24.實施例2
25.膠凍樣類芽孢桿菌接入液體種子活化培養基后，在37℃的溫度條件下活化12小時；側孢短小芽孢桿菌接入液體種子活化培養基后，在37℃的溫度條件下活化12小時；巨大芽孢桿菌接入液體種子活化培養基后，在32℃的溫度條件下活化12小時；釀酒酵母接入液體種子活化培養基后，在30℃的溫度條件下活化24小時。
26.無菌條件下吸取活化好的各菌種1ml，接入50ml的擴增培養基中，進行一級培養。膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌在37℃、50rpm條件下培養12小時左右；巨大芽孢桿菌在35℃、200rpm條件下培養12小時左右；釀酒酵母在30℃、50rpm條件下培養18小時。其中，膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌的一級培養用擴增培養基的組成為：1％制糖廢蜜，0.5％酵母膏，1％氯化鈉，ph值調至7.0；釀酒酵母的的一級培養用擴增培養基組成為：2％制糖廢蜜，1％酵母膏。擴增培養基均在115℃條件下滅菌20分鐘后再分別用來一級培養。
27.將一級培養好的種子液以2％的接種量接入新鮮擴增培養基中進行二次培養，膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌在37℃、200rpm條件下培養10小時左右；巨大芽孢桿菌在30℃、100rpm條件下培養10小時左右；釀酒酵母在30℃、200rpm條件下培養15小時。其中，膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌的二級培養用擴增培養基的組成為：1％制糖廢蜜，0.5％酵母膏，1％氯化鈉，ph值調至7.0；巨大芽孢桿菌的的二級培養用擴增培養基成分為mrs；釀酒酵母的的二級培養用擴增培養基組成為：2％制糖廢蜜，1％酵母膏。擴增培養基均在115℃條件下滅菌20分鐘后再分別用來二級培養。
28.將二級培養所制得二級種子液按照30％的膠凍樣類芽孢桿菌、30％的側孢短小芽孢桿菌、20％的巨大芽孢桿菌、10％膠質芽孢桿菌及10％的釀酒酵母混合，即做成初始微生物混合菌劑。
29.實施例3
30.將初始微生物混合菌劑接入含糖蜜的無機鹽培養基中，其中，含糖蜜的無機鹽培養基由以下重量份的原料組成：干牛糞100份、煤渣35份、秸稈碎50份、尿素2份、石膏3份、制糖廢蜜1.5份、水適量。然后在微好氧發酵7天，得到本發明的微生物菌劑。
31.經測試，本本發明的微生物菌劑活菌濃度》109cfu/ml，室溫下能穩定保存12個月，按此比例混合，本菌劑能發揮最佳效果的條件，同時本菌劑能適應多種含磷土壤的修復處理。最佳應用條件：溫度為20～40℃；ph為6.5～8.5。
32.將上述方法制備得到的微生物菌劑分別進行測試，按照土壤含磷等重金屬的實際情況配置不同濃度的微生物菌劑肥，對土壤進行預埋處理。測試結果表明本微生物菌劑具有解磷、解鉀的功能；具有活化土壤中硅、鈣、鎂中量元素的作用；具有提高鐵錳銅鋅鉬硼供應的功效；具有提高或延長肥效，減少化肥用量；還能提高作物抗逆性，預防或減輕病害。
33.本實施例中的所有技術特征均可根據實際需要而進行修改。
34.上述實施例為本發明較佳的實現方案，除此之外，本發明還可以其它方式實現，在不脫離本技術方案構思的前提下任何顯而易見的替換均在本發明的保護范圍之內。
技術特征：
1.一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，其特征在于：包括以下步驟：s1，菌種活化：挑選膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠質芽孢桿菌、釀酒酵母分別進行活化；s2，對s1完成活化的菌種進行擴增；s3，將s2中完成擴增的菌種按比例混合制成初始混合菌劑；s4，利用制糖廢蜜制作培養基；s5，將s3中初始混合菌劑放入s4的培養基中進行發酵，得到微生物菌劑。2.根據權利要求1所述的一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，其特征在于：步驟s2中各菌種的混合比例如下：25～35％的膠凍樣類芽孢桿菌、27～32％的側孢短小芽孢桿菌、15～25％的巨大芽孢桿菌、8～14％膠質芽孢桿菌及6～12％的釀酒酵母。3.根據權利要求1所述的一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，其特征在于：步驟s4中的培養基由以下重量份的原料組成：干牛糞80～120份、煤渣30～40份、秸稈碎40～60份、尿素1～3份、石膏2～4份、制糖廢蜜1～2份、水適量。4.根據權利要求1所述的一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，其特征在于：步驟s5中菌種在培養基中的發酵時間為7～8天。5.根據權利要求1所述的一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，其特征在于：步驟s2中至少采用兩種擴增培養基進行擴增培養。
技術總結
本發明涉及制糖廢密再利用技術領域，尤其是指一種利用制糖廢蜜生產微生物菌劑的方法，包括以下步驟：S1，菌種活化：挑選膠凍樣類芽孢桿菌、側孢短小芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠質芽孢桿菌、釀酒酵母分別進行活化；S2，對S1完成活化的菌種進行擴增；S3，將S2中完成擴增的菌種按比例混合制成初始混合菌劑；S4，利用制糖廢蜜制作培養基；S5，將S3中初始混合菌劑放入S4的培養基中進行發酵，得到微生物菌劑。本發明能制備出有利于固氮凈化吸收土壤重金屬，改善土質的微生物菌劑，提高農作物品質。提高農作物品質。
技術研發人員：孟梁 潘恒玉 孟晨 劉華君 潘竟海 宋百權 阿不都卡地爾
受保護的技術使用者：新疆農業科學院經濟作物研究所
技術研發日：2022.08.12
技術公布日：2022/11/25
