一種蠋蝽種復(fù)壯方法與流程
1.本發(fā)明屬于天敵昆蟲飼養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種蠋蝽種復(fù)壯方法。
背景技術(shù)：
2.蠋蝽(arma chinensis)屬半翅目(hemiptera)蝽科(pentatomidae)益蝽亞科(asopinae)蠋蝽屬(arma)，是一種捕食范圍廣、適應(yīng)能力強(qiáng)、應(yīng)用價(jià)值高的捕食性天敵昆蟲，可捕食鱗翅目(lepidoptera)、鞘翅目(coleoptera)、膜翅目(hymenoptera)以及半翅目(hemiptera)等40多種農(nóng)林害蟲的卵、幼蟲、蛹和成蟲。特別是對斜紋夜蛾(spodoptera litura)、棉鈴蟲(helicoverpa armigera)、煙青蟲(helicoverpa assulta)、美國白蛾(hyphantria cunea)、草地貪夜蛾(spdoptera frugiperda)、粘蟲(mythimna separat)、葉甲和跳甲等多種爆發(fā)性害蟲具有較強(qiáng)的控制作用。在多種經(jīng)濟(jì)作物(例如棉花、煙草和茶葉等)、果樹(蘋果、桃樹和棗樹等)、蔬菜(甘藍(lán)、生菜和番茄等)及林業(yè)(槐樹、桑樹和黃櫨等)害蟲的生物防治中具有廣闊的應(yīng)用前景。
3.種退化是昆蟲飼養(yǎng)過程中普遍存在的一種現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為個(gè)體質(zhì)量降低、生殖力衰退以及發(fā)育歷期延長等(huggans，1970；劉正，2010)。人工飼養(yǎng)條件下長期飼養(yǎng)蠋蝽(3代后)會(huì)導(dǎo)致蠋蝽種退化，出現(xiàn)生活力和生殖力不斷下降、發(fā)育歷期延長、孵化率降低、發(fā)育整齊度下降等，嚴(yán)重影響釋放種的品質(zhì)和防效(朱艷娟，2021)。種退化主要有兩類原因：內(nèi)因是小種長期近親繁殖造成遺傳多樣性的降低(有可能導(dǎo)致部分優(yōu)良性狀丟失)；外因是環(huán)境不適宜、食物不適宜和微生物感染等外部因素造成種抵抗力的下降。遺傳多樣性的降低具體表現(xiàn)為長期和漸進(jìn)的繁殖力下降和畸變率增加；種抵抗力的下降具體表現(xiàn)為短期和突然的種數(shù)量銳減和活力下降。
4.種復(fù)壯是對存在退化現(xiàn)象的體進(jìn)行篩選或采取不同的繁育方式，使其中未衰退的個(gè)體獲得大量繁殖或已經(jīng)衰退的個(gè)體性狀得到改善，重新獲得活力較強(qiáng)種的措施(岳方正，2016)。種復(fù)壯是防止種退化的有效方法。昆蟲飼養(yǎng)中常見的復(fù)壯方法包括營養(yǎng)復(fù)壯法和雜交復(fù)壯法。例如煙蚜繭蜂種退化后采用添加10％蜂蜜水的方法進(jìn)行營養(yǎng)復(fù)壯，并引入異地野外親本與退化種雜交進(jìn)行雜交復(fù)壯(謝應(yīng)強(qiáng)，2021)。營養(yǎng)復(fù)壯法應(yīng)用范圍較窄，主要適用于昆蟲長期用相對單一的食物飼養(yǎng)，特別是長期用替代寄主或人工飼料飼養(yǎng)(郭婉琳，2016)。雜交復(fù)壯法效果明顯，但由于需要引進(jìn)野外種進(jìn)行雜交，存在攜帶病菌、鑒定困難和技術(shù)復(fù)雜等缺點(diǎn)。
5.本發(fā)明對蠋蝽種方法進(jìn)行創(chuàng)新和改進(jìn)，結(jié)合提純復(fù)壯和野化復(fù)壯對蠋蝽進(jìn)行種復(fù)壯，有利于抑制蠋蝽種退化、降低規(guī)模飼養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)和提高生物防治效果，具有一定的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益。因此，提供一種蠋蝽種復(fù)壯方法具有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
6.本發(fā)明的目的是提供一種蠋蝽種復(fù)壯方法，目的是抑制蠋蝽種退化、降低規(guī)模飼養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)和提高生物防治效果，實(shí)現(xiàn)蠋蝽的大規(guī)模飼養(yǎng)和長期繼代繁殖。
7.為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
8.一種蠋蝽種復(fù)壯方法，具體步驟如下：
9.1)羽化后1～3天的蠋蝽成蟲按雌雄1：1配對后放入養(yǎng)蟲籠交配產(chǎn)卵，200頭/籠；
10.2)成蟲產(chǎn)卵后每日收卵，挑選產(chǎn)卵高峰期的大卵塊用于繼代繁殖；
11.3)將卵放入養(yǎng)蟲室孵化，孵化第3天將孵化率＜90％的卵塊篩除；
12.4)若蟲孵化后每2天投喂1次黃粉蟲，在養(yǎng)蟲室飼養(yǎng)至成蟲；
13.5)每代重復(fù)一次步驟1)-4)，作為繁殖期的提純復(fù)壯；
14.6)準(zhǔn)備1000頭4齡蠋蝽若蟲放入養(yǎng)蟲籠，250頭/籠；
15.7)蠋蝽在野化室飼養(yǎng)至成蟲并產(chǎn)卵，卵孵化后的若蟲為野化種；
16.8)將野化種與齡期一致的室內(nèi)種合籠，轉(zhuǎn)入養(yǎng)蟲室飼養(yǎng)和繁殖；
17.9)每年重復(fù)一次步驟6)-8)，作為定期的野化復(fù)壯。
18.進(jìn)一步，本發(fā)明中所述的養(yǎng)蟲籠為50cm
×
50cm
×
50cm(長
×
寬
×
高)的紗網(wǎng)籠。
19.進(jìn)一步，本發(fā)明中所述的產(chǎn)卵高峰期為產(chǎn)卵期第10～30天。
20.進(jìn)一步，本發(fā)明中所述的大卵塊為卵粒數(shù)≥25粒的卵塊。
21.進(jìn)一步，本發(fā)明中所述的養(yǎng)蟲室條件為：溫度25～28℃，濕度40％～60％，光周期16l：8d。
22.進(jìn)一步，本發(fā)明中所述的野化室條件為：溫度10～35℃(變溫環(huán)境，溫差＞10℃)，濕度30％～90％，光周期14l：10d。
23.經(jīng)由上述技術(shù)方案可知，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明公開提供了一種蠋蝽種復(fù)壯方法，該方法將提純復(fù)壯和野化復(fù)壯進(jìn)行優(yōu)化結(jié)合，操作方便可行，可以有效抑制蠋蝽種退化，實(shí)現(xiàn)蠋蝽的大規(guī)模飼養(yǎng)和長期繼代繁殖，為蠋蝽更好地應(yīng)用于農(nóng)林害蟲生物防治提供了技術(shù)支持。
附圖說明
24.圖1為本發(fā)明中蠋蝽種復(fù)壯原理圖。
具體實(shí)施方式
25.以下實(shí)施例1～3以在北京藍(lán)狐天敵技術(shù)有限公司對本發(fā)明的蠋蝽種復(fù)壯方法進(jìn)行原理解釋和特征描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
26.下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
27.下述實(shí)施例中所用的材料等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
28.實(shí)施例1
29.一種蠋蝽種復(fù)壯方法，原理圖如圖1所示，具體步驟如下：
30.1)羽化后1～3天的蠋蝽成蟲按雌雄1：1配對后放入50cm
×
50cm
×
50cm(長
×
寬
×
高)的紗網(wǎng)養(yǎng)蟲籠交配產(chǎn)卵，200頭/籠(雌雄蟲各100頭)；蠋蝽成蟲交配期約為5～7天，產(chǎn)卵前期約為5～7天，配對后約10～14后開始產(chǎn)卵；開始產(chǎn)卵至結(jié)束產(chǎn)卵即為產(chǎn)卵期，產(chǎn)卵期約為40天；其中，產(chǎn)卵期前10天為產(chǎn)卵初期，第10～30天的產(chǎn)卵高峰期，最后10天為產(chǎn)卵末期；
31.2)成蟲產(chǎn)卵后每日收卵，挑選產(chǎn)卵期第10～30天的高峰期大卵塊(卵粒數(shù)≥25粒/塊)用于繼代繁殖或作為種蟲；產(chǎn)卵初期(1～10天)和產(chǎn)卵末期(31～40天)的卵，以及小卵塊(卵粒數(shù)＜25粒/塊)用于飼養(yǎng)商品蠋蝽出售；此環(huán)節(jié)卵塊淘汰率≈75％；
32.3)將上述優(yōu)選后的卵塊放入養(yǎng)蟲室孵化，養(yǎng)蟲室溫度25～28℃，濕度40％～60％，光周期16l：8d；孵化第3天將孵化率＜90％的卵塊篩除，孵化率＜90％的卵塊用于飼養(yǎng)商品蠋蝽出售；孵化率≥90％的卵塊用于繼代繁殖或作為種蟲；此環(huán)節(jié)卵塊淘汰率≈15％；
33.4)若蟲孵化后每2天投喂1次黃粉蟲，在養(yǎng)蟲室(同上)飼養(yǎng)至成蟲；黃粉蟲可用5齡幼蟲或蛹，飼喂前用75％酒精消毒；
34.5)每代重復(fù)一次步驟1)-4)，作為繁殖期的提純復(fù)壯；其目的是通過對繁殖期性狀篩選，獲得產(chǎn)卵量高、產(chǎn)卵質(zhì)量好和發(fā)育整齊的蠋蝽種；
35.6)每年5月準(zhǔn)備1000頭4齡蠋蝽若蟲放入養(yǎng)蟲籠，250頭/籠；5月溫差較大，但最高溫和最低溫一般不會(huì)超過蠋蝽的致死溫度，比較適合野化復(fù)壯；
36.7)蠋蝽在野化室飼養(yǎng)至成蟲并產(chǎn)卵，卵孵化后的若蟲為野化種。野化室關(guān)閉溫度、濕度和光照調(diào)節(jié)系統(tǒng)，打開窗戶或通風(fēng)扇，使室內(nèi)環(huán)境與外界環(huán)境保持一致。以北京為例，北京5月平均溫度20～22℃，平均溫差11～12℃，最高溫度33℃，最低溫度10℃，濕度30％～60％，光照14～15h。此環(huán)境下，野化復(fù)壯蠋蝽死亡率≈60％，產(chǎn)卵率≈70粒/雌，孵化率≈80％，發(fā)育歷期延長10～14天，飼養(yǎng)30天后獲得野化若蟲9000～11000頭；
37.8)將野化種與齡期一致的室內(nèi)種合籠，轉(zhuǎn)入養(yǎng)蟲室飼養(yǎng)和繁殖；
38.9)每年重復(fù)一次步驟6)-8)，作為定期的野化復(fù)壯；其目的是通過野外自然環(huán)境變化淘汰弱蟲，獲得對環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)和病菌抵抗力強(qiáng)的蠋蝽種。
39.實(shí)施例2
40.一種蠋蝽種復(fù)壯方法，具體步驟如下：
41.1)羽化后1～3天的蠋蝽成蟲按雌雄1：1配對后放入50cm
×
50cm
×
50cm(長
×
寬
×
高)的紗網(wǎng)養(yǎng)蟲籠交配產(chǎn)卵，200頭/籠(雌雄蟲各100頭)；蠋蝽成蟲交配期約為5～7天，產(chǎn)卵前期約為5～7天，配對后約10～14后開始產(chǎn)卵；開始產(chǎn)卵至結(jié)束產(chǎn)卵即為產(chǎn)卵期，產(chǎn)卵期約為40天；其中，產(chǎn)卵期前10天為產(chǎn)卵初期，第10～30天的產(chǎn)卵高峰期，最后10天為產(chǎn)卵末期；
42.2)成蟲產(chǎn)卵后每日收卵，挑選產(chǎn)卵期第10～30天的高峰期大卵塊(卵粒數(shù)≥25粒/塊)用于繼代繁殖或作為種蟲；產(chǎn)卵初期(1～10天)和產(chǎn)卵末期(31～40天)的卵，以及小卵塊(卵粒數(shù)＜25粒/塊)用于飼養(yǎng)商品蠋蝽出售；此環(huán)節(jié)卵塊淘汰率≈75％；
43.3)將上述優(yōu)選后的卵塊放入養(yǎng)蟲室孵化，養(yǎng)蟲室溫度25～28℃，濕度40％～60％，光周期16l：8d；孵化第3天將孵化率＜90％的卵塊篩除，孵化率＜90％的卵塊用于飼養(yǎng)商品蠋蝽出售；孵化率≥90％的卵塊用于繼代繁殖或作為種蟲；此環(huán)節(jié)卵塊淘汰率≈15％；
44.4)若蟲孵化后每2天投喂1次黃粉蟲，在養(yǎng)蟲室(同上)飼養(yǎng)至成蟲；黃粉蟲可用5齡幼蟲或蛹，飼喂前用75％酒精消毒；
45.5)每代重復(fù)一次步驟1)-4)，作為繁殖期的提純復(fù)壯；其目的是通過對繁殖期性狀篩選，獲得產(chǎn)卵量高、產(chǎn)卵質(zhì)量好和發(fā)育整齊的蠋蝽種；
46.6)準(zhǔn)備1000頭4齡蠋蝽若蟲放入養(yǎng)蟲籠，250頭/籠；
47.7)蠋蝽在野化室飼養(yǎng)至成蟲并產(chǎn)卵，卵孵化后的若蟲為野化種。野化室通過空調(diào)設(shè)置變溫環(huán)境，平均溫度26℃，溫差15℃，白天溫度32℃，夜晚溫度17℃；通過自動(dòng)加濕器
設(shè)置濕度變化，平均濕度55％，濕度差為30％，白天濕度30％，夜晚濕度為90％；通過自動(dòng)照明系統(tǒng)設(shè)置光照，光照14h，黑暗10h。此環(huán)境下，野化復(fù)壯蠋蝽死亡率≈50％，產(chǎn)卵率≈85粒/雌，孵化率≈80％，發(fā)育歷期延長8～10天，飼養(yǎng)30天后獲得野化若蟲15000～17000頭；
48.8)將野化種與齡期一致的室內(nèi)種合籠，轉(zhuǎn)入養(yǎng)蟲室飼養(yǎng)和繁殖；
49.9)每年重復(fù)一次步驟6)-8)，作為定期的野化復(fù)壯；其目的是通過模擬野外自然環(huán)境變化淘汰弱蟲，獲得對環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)和病菌抵抗力強(qiáng)的蠋蝽種。
50.實(shí)施例3
51.一種蠋蝽種復(fù)壯方法試驗(yàn)
52.1.試驗(yàn)?zāi)康?br>53.1)驗(yàn)證本發(fā)明中蠋蝽種復(fù)壯方法的效果；
54.2)驗(yàn)證蠋蝽野化種對環(huán)境適應(yīng)度的提高。
55.2.試驗(yàn)方法
56.1)ck(對照)為蠋蝽室內(nèi)種，tr(處理)為蠋蝽野化種；ck組和tr組各選100頭均勻一致的3齡若蟲，每組5個(gè)重復(fù)，20頭/重復(fù)；
57.2)試驗(yàn)條件1設(shè)置溫度22℃，實(shí)驗(yàn)條件2設(shè)置溫度26℃，實(shí)驗(yàn)條件3設(shè)置溫度30℃；3種條件下濕度均為40％，光周期均為16l：8d；
58.3)測定ck組和tr組在3種條件下：3齡到成蟲的存活率；成蟲的蟲重、產(chǎn)卵率和壽命；卵的孵化率；
59.4)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用microsoft excel處理，采用spss 20.0軟件進(jìn)行方差分析和顯著性差異檢驗(yàn)并制圖。
60.3.結(jié)果與分析
61.3.1蠋蝽室內(nèi)種與野化種若蟲的發(fā)育參數(shù)與環(huán)境適應(yīng)性
62.存活率試驗(yàn)結(jié)果見表1，由表1可知，不同實(shí)驗(yàn)條件下蠋蝽野化種(tr)3齡若蟲～成蟲存活率均高于室內(nèi)種(ck)，表明野化種活力更高。其中22℃條件下ck與tr存活率存在顯著差異(p＝0.02)，tr存活率更高，表明野化種對冷環(huán)境具有明顯更強(qiáng)的適應(yīng)力。
63.表1蠋蝽室內(nèi)種(ck)與野化種(tr)3齡若蟲～成蟲存活率
64.試驗(yàn)條件ck存活率tr存活率顯著性差異p22℃71.3％
±
6.7％81.6
±
2.1％0.0226℃85.9％
±
7.2％84.2
±
8.7％0.3330℃78.2％
±
9.3％80.9
±
3.2％0.09
65.3.2蠋蝽室內(nèi)種與野化種成蟲的發(fā)育參數(shù)與環(huán)境適應(yīng)性
66.成蟲蟲重試驗(yàn)結(jié)果見表2，由表2可知，不同實(shí)驗(yàn)條件下蠋蝽野化種(tr)成蟲蟲重大部分高于室內(nèi)種(ck)，表明野化種可能健康度更高。另外，ck和tr均表現(xiàn)出雌蟲蟲重大于雄蟲，溫度越高蟲重越低的趨勢。
67.表2蠋蝽室內(nèi)種(ck)與野化種(tr)成蟲蟲重
[0068][0069]
產(chǎn)卵率試驗(yàn)結(jié)果見表3，由表3可知，不同實(shí)驗(yàn)條件下蠋蝽野化種(tr)單雌產(chǎn)卵率大部分?jǐn)?shù)據(jù)高于室內(nèi)種(ck)，表明野化種繁殖力更高。其中22℃條件下ck與tr產(chǎn)卵率存在顯著差異(p＝0.05)，tr產(chǎn)卵率更高，表明野化種對冷環(huán)境具有明顯更強(qiáng)的適應(yīng)力。
[0070]
表3蠋蝽室內(nèi)種(ck)與野化種(tr)產(chǎn)卵率
[0071][0072][0073]
成蟲壽命試驗(yàn)結(jié)果見表4，由表4可知，不同實(shí)驗(yàn)條件下蠋蝽野化種(tr)平均成蟲壽命高于室內(nèi)種(ck)，22℃和30℃條件下ck與tr平均成蟲壽命存在顯著差異(p＝0.05)表明野化種生命力更強(qiáng)。
[0074]
表4蠋蝽室內(nèi)種(ck)與野化種(tr)平均成蟲壽命
[0075][0076]
3.3蠋蝽室內(nèi)種與野化種卵的發(fā)育參數(shù)與環(huán)境適應(yīng)性
[0077]
孵化率試驗(yàn)結(jié)果見表5，由表5可知，不同實(shí)驗(yàn)條件下蠋蝽野化種(tr)卵的孵化率均高于室內(nèi)種(ck)，表明野化種活力更高。各條件下ck與tr卵的孵化率無顯著性差異(p＝0.12，p＝0.28，p＝0.09)。
[0078]
表5蠋蝽室內(nèi)種(ck)與野化種(tr)卵的孵化率
[0079]
試驗(yàn)條件ck孵化率tr孵化率顯著性差異p22℃90.5％
±
8.9％92.3％
±
7.6％0.1226℃90.9％
±
9.9％90.7％
±
11.2％0.2830℃81.2％
±
14.5％90.2％
±
10.2％0.09
[0080]
采用本發(fā)明方法，蠋蝽種復(fù)壯效果明顯，生長整齊，世代發(fā)育參數(shù)穩(wěn)定，種健康穩(wěn)定。每年飼養(yǎng)6～8代蠋蝽種均未出現(xiàn)生活力和生殖力不斷下降、發(fā)育歷期延長、孵化率降低、發(fā)育整齊度下降等現(xiàn)象。此外，本發(fā)明操作簡單，易于實(shí)施，能以極低的成本有效預(yù)防蠋蝽種退化的風(fēng)險(xiǎn)。
[0081]
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
