一種細胞外囊泡循環分離純化平臺的制作方法
1.本實用新型涉及分離純化裝置技術領域，具體而言，涉及一種細胞外囊泡循環分離純化平臺。
背景技術：
2.細胞外囊泡是具有雙層膜結構的納米級膜囊泡，來源于細胞分泌或細胞膜脫落，直徑約為30-2000nm。細胞外囊泡也廣泛存在于各種體液中，如唾液、尿液、血液、乳汁、腹水和腦脊液等。
3.細胞外囊泡攜帶有豐富的細胞來源的生物標志物，如蛋白質、脂類、核酸(dna、rna)等，是預后循環生物標志物的重要載體；并參與眾多細胞關鍵過程，如細胞間通訊、細胞遷移、血管新生和免疫調節等，此外，細胞外囊泡來源于細胞，具有生物相容性好、低免疫原性及易于生物標記優勢，有望作為新型藥物載體。因此，細胞外囊泡相關研究具有重要科學價值。
4.傳統分離和純化細胞外囊泡的方法有超速離心法、超濾法、尺寸排阻譜法、免疫磁珠法、以及聚乙二醇(peg)沉淀法。上述方法雖然各有優點，但存在耗時長，產量低以及純度低等缺點，大大限制了其在臨床上的進一步應用。前述可知，細胞外囊泡尺寸在30-1000nm范圍，采用對應孔徑的納米膜可以對其進行有效分離和純化。
5.現有細胞外囊泡分離純化裝置要么使用手動進行分離純化，比如現有授權公告號為cn210856130u的實用新型專利，其公開了一種手動細胞外囊泡分離系統，其通過手動控制抽吸組件的設置，使得純化柱的兩端產生的壓力差，從而實現快速分離細胞外囊泡的目的。要么使用電動進行分離純化，比如現有申請公布號為cn111304049a的發明專利，其公開了一種細胞外囊泡循環分離純化平臺及方法，其主要是通過循環泵進行電動控制。現有缺乏可以電動和手動控制的細胞外囊泡分離純化裝置，不能給使用者進行多種選擇，具有一定的局限性。
技術實現要素：
6.本實用新型的目的在于提供一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其能夠單獨通過電動控制和手動控制進行細胞外囊泡的分離純化，給用戶更多的選擇，有電和無電情況下均能使用，使用范圍更廣。
7.本實用新型的實施例是這樣實現的：
8.本技術實施例提供一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，包括樣品桶、分離組件、第一輸送管和第二輸送管，分離組件設有樣品進口和樣品出口；第一輸送管的一端和第二輸送管的一端均與樣品桶連通，第一輸送管的另一端和第二輸送管的另一端均與樣品進口連通；第一輸送管設有手動加壓組件，第二輸送管設有蠕動泵；樣品出口與樣品桶之間通過回流管連通。
9.進一步的，在本實用新型的一些實施例中，上述手動加壓組件包括與第一輸送管
樣品腔；15-濾液腔；16-濾液出口；17-濾液收集管；18-濾液收集桶；19-盒蓋；20-盒體；21-底座；22-鎖緊螺栓；23-壓板；24-單向閥。
具體實施方式
26.為使本實用新型實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合本實用新型實施例中的附圖，對本實用新型實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本實用新型一部分實施例，而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設計。
27.因此，以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本實用新型的范圍，而是僅僅表示本實用新型的選定實施例?；诒緦嵱眯滦椭械膶嵤├绢I域普通的技術人員在沒有作出創造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本實用新型保護的范圍。
28.應注意到：相似的標號和字母在下面的附圖中表示類似項，因此，一旦某一項在一個附圖中被定義，則在隨后的附圖中不需要對其進行進一步定義和解釋。
29.在本實用新型實施例的描述中，需要說明的是，若出現術語“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“內”、“外”等指示的方位或位置關系為基于附圖所示的方位或位置關系，或者是該實用新型產品使用時慣常擺放的方位或位置關系，僅是為了便于描述本實用新型和簡化描述，而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構造和操作，因此不能理解為對本實用新型的限制。此外，若出現術語“第一”、“第二”等僅用于區分描述，而不能理解為指示或暗示相對重要性。
30.此外，若出現“水平”、“豎直”等術語并不表示要求部件絕對水平或者豎直，而是可以稍微的傾斜。如“水平”僅僅是指其方向相對于“豎直”而言更加水平，并不是表示該結構一定要完全水平，而是可以稍微傾斜。
31.在本實用新型實施例的描述中，還需要說明的是，除非另有明確的規定和限定，若出現術語“設置”、“連接”應做廣義理解，例如，可以是固定連接，也可以是可拆卸連接，或一體地連接；可以是機械連接，也可以是電連接；可以是直接相連，也可以通過中間媒介間接相連，可以是兩個元件內部的連通。對于本領域的普通技術人員而言，可以根據具體情況理解上述術語在本實用新型中的具體含義。
32.實施例
33.請參照圖1-圖3，本實施例提供一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，包括樣品桶1、分離組件、第一輸送管3和第二輸送管4，分離組件設有樣品進口5和樣品出口6；第一輸送管3的一端和第二輸送管4的一端均與樣品桶1連通，第一輸送管3的另一端和第二輸送管4的另一端均與樣品進口5連通；第一輸送管3設有手動加壓組件，第二輸送管4設有蠕動泵2；樣品出口6與樣品桶1之間通過回流管7連通。
34.實際使用時，將含有細胞外囊泡的混合樣品注入樣品桶1中，當需要使用手動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，混合樣品流入第一輸送管3中，通過手動加壓組件將第一輸送管3中的混合樣品從樣品進口5壓入分離組件中，通過分離組件對混合樣品進行分離純化，分離純化后的混合樣品從樣品出口6流入回流管7中，并經過回流管7流入樣品桶1中完成循環即可，如此可以對樣品桶1中的混合樣品進行循環分離純化。
35.當需要使用電動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，混合樣品流入第二輸送管4中，通過蠕動泵2將第二輸送管4中的混合樣品從樣品進口5泵入分離組件中，通過分離組件對混合樣品進行分離純化，分離純化后的混合樣品從樣品出口6流入回流管7中，并經過回流管7流入樣品桶1中完成循環即可，如此可以對樣品桶1中的混合樣品進行循環分離純化。如此本技術提供的細胞外囊泡循環分離純化平臺能夠單獨通過電動控制和手動控制進行細胞外囊泡的分離純化，給用戶更多的選擇，有電和無電情況下均能使用，使用范圍更廣。
36.如圖1-圖3所示，在本實用新型的一些實施例中，上述手動加壓組件包括與第一輸送管3連通的外筒體8以及滑動設于外筒體8內部的密封活塞9，密封活塞9設有活塞桿10。上述第一輸送管3內間隔設有兩個單向閥24，外筒體8與第一輸送管3的連通處位于兩個單向閥24之間。
37.上述第一輸送管3設有第一閥門11，第一閥門11位于手動加壓組件與樣品桶1之間。上述第二輸送管4間隔設有兩個第二閥門12，蠕動泵2位于兩個第二閥門12之間。
38.當需要使用手動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，第一閥門11打開，兩個第二閥門12關閉，此時樣品桶1與第一輸送管3導通，兩個單向閥24均控制液體從樣品桶1一側朝著分離組件一側流動。此時往上拉動活塞桿10，活塞桿10帶動密封活塞9往上移動，此時樣品桶1中的混合樣品經過右側的單向閥24流入外筒體8內，左側的單向閥24閉合。
39.然后往下按壓活塞桿10，活塞桿10帶動密封活塞9往下移動將外筒體8內的混合樣品經過左側的單向閥24壓入分離組件中，此時右側的單向閥24閉合。如此可通過多次上下往復移動活塞桿10將樣品桶1中的混合樣品逐漸壓入分離組件中進行分離純化。
40.當需要使用電動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，第一閥門11關閉，兩個第二閥門12打開，此時樣品桶1與第二輸送管4導通，啟動蠕動泵2將樣品桶1中的混合樣品泵入分離組件中進行分離純化。
41.如圖1-圖3所示，在本實用新型的一些實施例中，上述分離組件包括過濾盒，過濾盒內設有濾膜13，濾膜13將過濾盒內部分隔成樣品腔14和濾液腔15；樣品進口5和樣品出口6均設于過濾盒且與樣品腔14連通。
42.上述過濾盒設有與濾液腔15連通的濾液出口16，還包括濾液收集管17和濾液收集桶18，濾液收集管17的一端與濾液出口16連通，濾液收集管17的另一端與濾液收集桶18連通。
43.本實施例的濾膜13可采用親水聚碳酸酯膜，濾膜13的孔徑根據實際情況進行選擇即可，比如需要分離純化得到粒徑大于30nm細胞外囊泡，此時濾膜13可采用孔徑為30nm的親水聚碳酸酯膜。混合樣品從樣品進口5流入樣品腔14中并位于濾膜13頂部，本實施例的樣品出口6直徑小于樣品進口5的直徑，如此從樣品進口5進入過濾盒內的混合樣品流量大，從樣品出口6流出過濾盒的混合樣品流量小，便于在樣品腔14內形成一定的壓力，如此便于將混合樣品中粒徑小于30nm的雜質及小分子通過濾膜13流到濾液腔15中，分離純化后的混合樣品從樣品出口6通過回流管7回流進入樣品桶1中完成循環。濾液腔15中得到的液體可通過濾液出口16和濾液收集管17流入濾液收集桶18中進行收集。
44.如圖1-圖3所示，在本實用新型的一些實施例中，上述過濾盒包括可拆卸連接的盒蓋19和盒體20，樣品進口5和樣品出口6均設于盒蓋19，濾膜13設于盒體20。上述盒蓋19設有外螺紋，盒體20設有內螺紋，盒蓋19與盒體20螺紋連接。
45.上述盒體20為圓柱形，盒體20內側壁沿其周側設有環形的底座21，還包括鎖緊螺栓22和環形的壓板23，壓板23設于底座21上方，濾膜13為圓形，濾膜13周側嵌入底座21與壓板23之間；鎖緊螺栓22的一端穿過壓板23并與底座21螺紋連接。
46.如此便于對濾膜13進行更換，更換濾膜13時，從盒體20旋轉拆卸掉盒蓋19，旋轉取下鎖緊螺栓22，拿出壓板23，如此可以取出濾膜13并安裝新的濾膜13放置于底座21頂部，然后將壓板23壓在濾膜13上，通過鎖緊螺栓22鎖緊，旋轉安裝上盒蓋19即可，操作方便。
47.綜上，本實用新型的實施例提供一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，包括樣品桶1、分離組件、第一輸送管3和第二輸送管4，分離組件設有樣品進口5和樣品出口6；第一輸送管3的一端和第二輸送管4的一端均與樣品桶1連通，第一輸送管3的另一端和第二輸送管4的另一端均與樣品進口5連通；第一輸送管3設有手動加壓組件，第二輸送管4設有蠕動泵2；樣品出口6與樣品桶1之間通過回流管7連通。
48.實際使用時，將含有細胞外囊泡的混合樣品注入樣品桶1中，當需要使用手動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，混合樣品流入第一輸送管3中，通過手動加壓組件將第一輸送管3中的混合樣品從樣品進口5壓入分離組件中，通過分離組件對混合樣品進行分離純化，分離純化后的混合樣品從樣品出口6流入回流管7中，并經過回流管7流入樣品桶1中完成循環即可，如此可以對樣品桶1中的混合樣品進行循環分離純化。
49.當需要使用電動控制進行細胞外囊泡的分離純化時，混合樣品流入第二輸送管4中，通過蠕動泵2將第二輸送管4中的混合樣品從樣品進口5泵入分離組件中，通過分離組件對混合樣品進行分離純化，分離純化后的混合樣品從樣品出口6流入回流管7中，并經過回流管7流入樣品桶1中完成循環即可，如此可以對樣品桶1中的混合樣品進行循環分離純化。如此本技術提供的細胞外囊泡循環分離純化平臺能夠單獨通過電動控制和手動控制進行細胞外囊泡的分離純化，給用戶更多的選擇，有電和無電情況下均能使用，使用范圍更廣。
50.以上僅為本實用新型的優選實施例而已，并不用于限制本實用新型，對于本領域技術人員而言，顯然本技術不限于上述示范性實施例的細節，而且在不背離本技術的精神或基本特征的情況下，能夠以其它的具體形式實現本技術。
51.因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本技術的范圍由所附權利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和范圍內的所有變化囊括在本技術內。不應將權利要求中的任何附圖標記視為限制所涉及的權利要求。對于本領域的技術人員來說，本實用新型可以有各種更改和變化。凡在本實用新型的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本實用新型的保護范圍之內。
技術特征：
1.一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：包括樣品桶、分離組件、第一輸送管和第二輸送管，所述分離組件設有樣品進口和樣品出口；所述第一輸送管的一端和所述第二輸送管的一端均與所述樣品桶連通，所述第一輸送管的另一端和所述第二輸送管的另一端均與所述樣品進口連通；所述第一輸送管設有手動加壓組件，所述第二輸送管設有蠕動泵；所述樣品出口與所述樣品桶之間通過回流管連通。2.根據權利要求1所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述手動加壓組件包括與所述第一輸送管連通的外筒體以及滑動設于所述外筒體內部的密封活塞，所述密封活塞設有活塞桿。3.根據權利要求2所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述第一輸送管內間隔設有兩個單向閥，所述外筒體與所述第一輸送管的連通處位于兩個所述單向閥之間。4.根據權利要求1所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述第一輸送管設有第一閥門，所述第一閥門位于所述手動加壓組件與所述樣品桶之間。5.根據權利要求1所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述第二輸送管間隔設有兩個第二閥門，所述蠕動泵位于兩個所述第二閥門之間。6.根據權利要求1所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述分離組件包括過濾盒，所述過濾盒內設有濾膜，所述濾膜將所述過濾盒內部分隔成樣品腔和濾液腔；所述樣品進口和所述樣品出口均設于所述過濾盒且與所述樣品腔連通。7.根據權利要求6所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述過濾盒設有與所述濾液腔連通的濾液出口，還包括濾液收集管和濾液收集桶，所述濾液收集管的一端與所述濾液出口連通，所述濾液收集管的另一端與所述濾液收集桶連通。8.根據權利要求6所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述過濾盒包括可拆卸連接的盒蓋和盒體，所述樣品進口和所述樣品出口均設于所述盒蓋，所述濾膜設于所述盒體。9.根據權利要求8所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述盒蓋設有外螺紋，所述盒體設有內螺紋，所述盒蓋與所述盒體螺紋連接。10.根據權利要求8所述的一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，其特征在于：所述盒體為圓柱形，所述盒體內側壁沿其周側設有環形的底座，還包括鎖緊螺栓和環形的壓板，所述壓板設于所述底座上方，所述濾膜為圓形，所述濾膜周側嵌入所述底座與所述壓板之間；所述鎖緊螺栓的一端穿過所述壓板并與所述底座螺紋連接。
技術總結
本實用新型提出了一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，涉及分離純化裝置技術領域。一種細胞外囊泡循環分離純化平臺，包括樣品桶、分離組件、第一輸送管和第二輸送管，分離組件設有樣品進口和樣品出口；第一輸送管的一端和第二輸送管的一端均與樣品桶連通，第一輸送管的另一端和第二輸送管的另一端均與樣品進口連通；第一輸送管設有手動加壓組件，第二輸送管設有蠕動泵；樣品出口與樣品桶之間通過回流管連通。采用本實用新型，其能夠單獨通過電動控制和手動控制進行細胞外囊泡的分離純化，給用戶更多的選擇，有電和無電情況下均能使用，使用范圍更廣。用范圍更廣。用范圍更廣。
