一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物及其應(yīng)用的制作方法
research 100,35-83)。發(fā)現(xiàn)axl、mer和tyro3在癌細(xì)胞中過度表達(dá)。
6.因此，開發(fā)一種tam激酶抑制劑在癌癥領(lǐng)域中存在迫切需求。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
7.本發(fā)明旨在至少解決上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明提出一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物及其應(yīng)用，該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物具有良好的tam激酶抑制作用。
8.本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思為：發(fā)現(xiàn)一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物，該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物具有良好的tam激酶抑制作用，其axl激酶ic
50
最低可達(dá)4.1nm。
9.本發(fā)明的第一方面提供一種具有通式i所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽：
[0010][0011]
r1選自h或鹵素；
[0012]
r2、r3分別獨立地選自h或鹵素；
[0013]
r4選自吡咯并三嗪基或吡啶基，其中，所述的吡咯并三嗪基或吡啶基被r5基團(tuán)所取代；
[0014]
r5選自h、c6-c10芳基、5-10元雜芳基、4-10元雜環(huán)烷基、-c(o)ra、-c(o)nrara、-c(o)ora、-ora、-oc(o)nrara或-nrara；所述5-10元雜芳基、4-10元雜環(huán)烷基分別被1、2或3個獨立選擇的rb所取代；
[0015]
rb選自h、c1-c5烷基、c1-c5烷氧基取代的c1-c5烷基、羥基取代的c1-c5烷基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基、c1-c3烷基取代的4-10元雜環(huán)烷基、-s(o)2r
b1
或-nr
b2rb3
；
[0016]rb1
選自：c3-c5環(huán)烷基或c6-c10芳基，r
b2
、r
b3
分別獨立地選自h、c1-c5烷基或c1-c5烷氧基取代的c1-c5烷基；
[0017]
ra各自獨立地選自h、c1-c10烷基、-nrcrc、-s(o)2rc、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基或-c(o)rc；其中，所述c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基各自獨立地被1、2或3個獨立選擇的rc取代基取代；
[0018]
rc各自獨立地選自：h、c1-c5烷基、c6-c10芳基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基、-ord或-nrdrd；
[0019]
rd各自獨立地選自：h或c1-c5烷基。
[0020]
相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明第一方面提供的一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物的有益效果如下：該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物具有良好的tam激酶抑制作用，對axl激酶的ic
50
最低可達(dá)4.1nm。
[0021]
優(yōu)選的，r4選自進(jìn)一步優(yōu)選的，r4選自
[0022]
優(yōu)選的，r9選自選自
[0023]
優(yōu)選的，ra選自
[0024]
優(yōu)選的，所述通式i化合物為以下通式所示的化合物優(yōu)選的，所述通式i化合物為以下通式所示的化合物
[0025]
優(yōu)選的，所述通式i化合物包括以下結(jié)構(gòu)式所示的化合物中的任意一種：
[0026]
[0027][0028]
本發(fā)明的第二方面提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包括所述通式i化合物或其藥學(xué)可接受的鹽。
[0029]
優(yōu)選的，所述藥物組合物還包括選自下列組中的一種或多種：egfr抑制劑、vegfr抑制劑、bcr-abl抑制劑、c-kit抑制劑、c-met抑制劑、raf抑制劑、mek抑制劑、組蛋白去乙酰
酶抑制劑、vegf抗體、egf抗體、hiv蛋白激酶抑制劑、hmg-coa還原酶抑制劑、pd-1抑制劑、pd-l1抑制劑等。
[0030]
優(yōu)選的，所述藥物組合物還包括藥學(xué)上可接受的載體，所述藥學(xué)上可接受的載體包括微囊、微球、納米粒、脂質(zhì)體。
[0031]
優(yōu)選的，所述藥物組合物還的劑型包括片劑、丸劑、粒劑、粉劑、膠囊劑、糖漿、乳劑、混懸劑中的至少一種。
[0032]
優(yōu)選的，可以將本發(fā)明的化合物、異構(gòu)體、溶劑合物、結(jié)晶或前藥與藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑混合制備成藥物制劑，以適合于經(jīng)口或胃腸外給藥。給藥方法包括但不限于皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)和經(jīng)口途徑。所述制劑可以通過任何途徑施用，例如通過輸注或推注，通過經(jīng)上皮或皮膚粘膜(例如口腔粘膜或直腸等)吸收的途徑施用。給藥可以是全身的或局部的。經(jīng)口施用制劑的實例包括固體或液體劑型，具體而言，包括片劑、丸劑、粒劑、粉劑、膠囊劑、糖漿、乳劑、混懸劑等。所述制劑可通過本領(lǐng)域已知的方法制備，且包含藥物制劑領(lǐng)域常規(guī)使用的載體、稀釋劑或賦形劑。
[0033]
本發(fā)明的第三方面提供一種通式i化合物的制備方法，包括以下步驟：
[0034]
[0035][0036]
(1)通式
ⅱ?
1化合物和通式
ⅱ?
2化合物反應(yīng)生成通式
ⅱ?
3化合物；
[0037]
(2)通式
ⅱ?
3化合物和通式
ⅱ?
4化合物反應(yīng)生成通式
ⅱ?
5化合物；
[0038]
(3)通式
ⅱ?
5化合物和通式
ⅲ?
1化合物反應(yīng)生成通式
ⅲ?
2化合物；
[0039]
(4)通式
ⅲ?
2化合物和通式
ⅲ?
3化合物反應(yīng)生成通式
ⅲ?
4化合物；
[0040]
(5)通式
ⅲ?
4化合物和通式
ⅲ?
5化合物反應(yīng)生成通式i-1化合物；
[0041]
(6)通式
ⅳ?
1化合物和通式
ⅳ?
2化合物反應(yīng)生成通式
ⅳ?
3化合物；
[0042]
(7)通式
ⅳ?
3化合物和通式
ⅱ?
5化合物反應(yīng)生成通式i-2化合物；
[0043]
(8)通式
ⅴ?
1化合物和通式
ⅴ?
2化合物反應(yīng)生成通式
ⅴ?
3化合物；
[0044]
(9)通式
ⅴ?
3化合物和通式
ⅱ?
5化合物反應(yīng)生成通式i-3化合物；
[0045]
r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9的定義如上述通式i-1、i-2和i-3化合物中的定義。
[0046]
優(yōu)選的，步驟(1)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括乙酸鹽，所述溶劑包括乙酸、丙酸、丁酸中的至少一種，溫度為100-140℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(1)的所述反應(yīng)中，所述催化劑包括乙酸鉀，所述溶劑包括乙酸，溫度為110-130℃。
[0047]
優(yōu)選的，步驟(2)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催化劑、磷酸鹽和水，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3(甲烷磺酸(2-二環(huán)己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯(lián)苯基)(2'-氨基-1,1'-聯(lián)苯-2-基)鈀(ii))、xphos-pd-g2(氯(2-二環(huán)己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯(lián)苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-聯(lián)苯)]鈀(ii))、xphos-pd-g1(氯(2-二環(huán)己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯(lián)苯)[2-(2-氨基乙基苯基)]鈀(ii))、ruphos-pd-g3(甲磺酸(2-二環(huán)己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯(lián)苯基)(2-氨基-1,1'-聯(lián)苯-2-基)鈀(ii))、sphos-pd-g2(氯(2-二環(huán)己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-聯(lián)苯基)(2'-氨基-1,1'-聯(lián)苯-2-基)鈀(ii))中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為50-90℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(2)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(pph3)2cl2，所述磷酸鹽包括磷酸鉀，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)，所述溫度為60-80℃。
[0048]
優(yōu)選的，步驟(3)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，通式
ⅲ?
1化合物先與bop(卡特縮合劑)、dbu(1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯)在溶劑中、溫度為20-40℃下反應(yīng)，后與通式
ⅱ?
5化合物在催化劑、溶劑中、溫度為20-40℃下反應(yīng)，所述溶劑包括thf(四氫呋喃)、nmp(n-甲基吡咯烷酮)、dmf(n,n-二甲基甲酰胺)、ch3cn(乙腈)、dcm(二氯甲烷)中的至少一種，所述催化劑包括堿催化劑；進(jìn)一步優(yōu)選的，所述堿催化劑包括銫鹽；更進(jìn)一步優(yōu)選的，所述銫鹽為碳酸銫，溫度為25-35℃。
[0049]
優(yōu)選的，步驟(4)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催化劑、醋酸鹽、吡啶類衍生物，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為80-130℃，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3、xphos-pd-g2、xphos-pd-g1、ruphos-pd-g3、sphos-pd-g2中的至少一種；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(4)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括ruphos-pd-g3，所述醋酸鹽包括醋酸鉀，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)，溫度為90-110℃。
[0050]
優(yōu)選的，步驟(5)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催化劑、磷酸鹽和水，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3、xphos-pd-g2、xphos-pd-g1、ruphos-pd-g3、sphos-pd-g2中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為80-130℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(5)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括ruphos-pd-g3，所述磷酸鹽包括磷酸鉀，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)，所述溫度為90-110℃。
[0051]
優(yōu)選的，步驟(6)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催化劑、碳酸鹽和水，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3、xphos-pd-g2、xphos-pd-g1、ruphos-pd-g3、sphos-pd-g2中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為80-130℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(6)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(pph3)2cl2，所述碳酸鹽包括碳酸鉀，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)，所述溫度為90-110℃。
[0052]
優(yōu)選的，步驟(7)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催化劑、磷酸鹽和水，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3、xphos-pd-g2、xphos-pd-g1、ruphos-pd-g3、sphos-pd-g2中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為80-130℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(7)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括ruphos-pd-g3，所述磷酸鹽包括磷酸鉀，所述溶劑包括dmf，所述溫度為90-110℃。
[0053]
優(yōu)選的，步驟(8)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括鎓鹽、有機堿，所述鎓鹽包括hbtu(o-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸鹽)、tbtu(o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸)、hatu(2-(7-氮雜苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸鹽)、pybop(六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷)中的至少一種，所述有機堿包括三乙胺(net3)、dbu、n,n-二甲苯胺、吡啶和喹啉中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、thf、nmp、dmf、ch3cn、dcm中的至少一種，溫度為20-40℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(8)的所述反應(yīng)中，所述鎓鹽包括hatu，機堿包括三乙胺，所述溶劑包括dmf，溫度為25-35℃。
[0054]
優(yōu)選的，步驟(9)的所述反應(yīng)中使用到催化劑、溶劑，所述催化劑包括偶聯(lián)反應(yīng)催
化劑、銫鹽，偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括pd(dppf)cl2、pd(oac)2、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)4、xphos-pd-g3、xphos-pd-g2、xphos-pd-g1、ruphos-pd-g3、sphos-pd-g2中的至少一種，所述溶劑包括1,4-二氧六環(huán)、dmf、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一種，溫度為100-140℃；進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(9)的所述反應(yīng)中，所述偶聯(lián)反應(yīng)催化劑包括ruphos-pd-g3，所述磷酸鹽包括磷酸鉀，所述溶劑包括dmf，所述溫度為110-130℃。
[0055]
本發(fā)明的第四個方面提供一種所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、或本發(fā)明的藥物組合物在制備tam激酶抑制劑中的應(yīng)用；優(yōu)選的，提供一種所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽在制備axl激酶抑制劑中的應(yīng)用。
[0056]
本發(fā)明的第五個方面提供一種所述的通式i化合物或其藥學(xué)可接受的鹽、或本發(fā)明的藥物組合物在制備或預(yù)防腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0057]
所述腫瘤包括乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌、胃癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、肝細(xì)胞癌、甲狀腺癌、子宮癌、食管癌、鱗狀細(xì)胞癌、白血病、骨肉瘤、黑素瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌中的至少一種。
[0058]
本發(fā)明的“溶劑合物”在常規(guī)意義上是指溶質(zhì)(如活性化合物、活性化合物的鹽)和溶劑(如水)組合形成的復(fù)合物。溶劑是指本領(lǐng)域的技術(shù)人員所知的或容易確定的溶劑。如果是水，則溶劑合物通常被稱作水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。
[0059]
本發(fā)明的“結(jié)晶”是指本發(fā)明所述的化合物形成的各種固體形態(tài)，包括晶型、無定形。
[0060]
本發(fā)明的“異構(gòu)體”包括化合物構(gòu)型異構(gòu)體、構(gòu)象異構(gòu)體和對映異構(gòu)體。構(gòu)型異體是指順式或反式構(gòu)型的順反異構(gòu)體；構(gòu)象異構(gòu)體是指由于單鍵旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的立體異構(gòu)體。
[0061]
本發(fā)明的“前藥”是指在生物體的生理條件下，由于與酶、胃酸等反應(yīng)而轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的化合物，即通過酶的氧化、還原、水解等轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的化合物和/或通過胃酸等的水解反應(yīng)等轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的化合物。
[0062]
本發(fā)明的“藥學(xué)可接受的鹽”是指本發(fā)明的化合物與酸形成的藥學(xué)上可接受的鹽，所述的酸包括但不限于磷酸、硫酸、鹽酸、氫溴酸、檸檬酸、馬來酸、丙二酸、扁桃酸、琥珀酸、富馬酸、醋酸、乳酸、硝酸等等。
[0063]
本發(fā)明的“藥物組合物”是指包含任何一種本文所述的化合物，包括異構(gòu)體、前藥、溶劑合物、藥學(xué)上可接受的鹽或其化學(xué)的保護(hù)形式，和一種或多種藥學(xué)上可接受載體的混合物。
[0064]
本發(fā)明的“藥學(xué)上可接受的載體”是指對有機體不引起明顯刺激性和不干擾所給予化合物的生物活性和性質(zhì)的載體，包含溶劑、稀釋劑或其它賦形劑、分散劑、表面活性劑、等滲劑、增稠劑或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤滑劑等。除非任何常規(guī)載體介質(zhì)與本發(fā)明化合物不相容。可以作為藥學(xué)上可接受的載體的一些實例包括，但不限于糖類，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、以及纖維素和乙酸纖維素；麥芽、明膠等。
[0065]
本發(fā)明的“賦形劑”指加入到藥用組合物中以進(jìn)一步促進(jìn)給予化合物的惰性物質(zhì)。賦形劑可以包括碳酸鈣、磷酸鈣、多種糖類和多種類型的淀粉、纖維素衍生物、明膠、植物油、聚乙二醇。
[0066]
本發(fā)明的“在制備用于或預(yù)防腫瘤的藥物中的應(yīng)用”是指可以抑制腫瘤的生
長、發(fā)展和/或轉(zhuǎn)移，主要向所需要的人或動物給治予有效劑量的本發(fā)明的化合物以抑制、減慢或逆轉(zhuǎn)受者腫瘤的生長、遷移或擴(kuò)散。
[0067]
相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果如下：
[0068]
(1)該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物具有良好的tam激酶抑制作用，對axl激酶的ic
50
小于100nm、最低可達(dá)4.1nm。
[0069]
(2)對其他激酶抑制較弱，選擇性高。
[0070]
(3)化合物的制備方法工藝簡單，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施方式
[0071]
為了讓本領(lǐng)域技術(shù)人員更加清楚明白本發(fā)明所述技術(shù)方案，現(xiàn)列舉以下實施例進(jìn)行說明。需要指出的是，以下實施例對本發(fā)明要求的保護(hù)范圍不構(gòu)成限制作用。
[0072]
以下實施例中所用的原料、試劑或裝置如無特殊說明，均可從常規(guī)商業(yè)途徑得到，或者可以通過現(xiàn)有已知方法得到。
[0073]
實施例1
[0074]
一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物，i-1-1，結(jié)構(gòu)式為：
[0075]
其制備路線如下：
[0076][0077]
(1)化合物
ⅱ?
3-1(4-溴-2-(4-羥基苯乙基)異吲哚啉-1,3-二酮)的合成
[0078][0079]
反應(yīng)瓶中加入3-溴鄰苯二甲酸酐2.5g和對羥基苯乙胺1.66g，加入25ml冰醋酸溶解，再加入醋酸鉀3.8g，攪拌均勻，抽真空后置換氮氣，移至120℃油浴加熱，攪拌反應(yīng)6小時。反應(yīng)停止后，旋蒸除去大部分溶劑后析出固體，抽濾，先用碳酸氫鈉溶液洗滌濾餅至濾液ph＝8-9，再用水洗兩次。濾餅風(fēng)干后得近白固體4.13g，純度98％。
[0080]
化合物
ⅱ?
3-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 346[m+h]
+
。
[0081]
(2)化合物
ⅱ?
5-1(4-(4-氟苯基)-2-(4-羥基苯乙基)異吲哚啉-1,3-二酮)的合成
[0082][0083]
將化合物
ⅱ?
3-1 1.0g和4-氟苯硼酸0.424g溶于25ml 1,4-dioxane(1,4-二氧六環(huán))中，加入pd(dppf)cl
2 84.54mg、2.3g k3po4和0.26g水，攪拌均勻，抽真空后置換氮氣。移至70℃油浴加熱，反應(yīng)4h。反應(yīng)停止后，旋蒸除去大部分溶劑，加硅膠拌樣進(jìn)行柱層析純化，得到白產(chǎn)物0.85g。
[0084]
化合物
ⅱ?
5-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 360[m-h]
+
。
[0085]
(3)化合物
ⅲ?
2-1(2-(4-((6-溴吡咯[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)氧基)苯乙基)-4-(4-氟苯基)異吲哚-1,3-二酮)的合成：
[0086][0087]
在常溫下，將6-溴吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-(1h)-酮1.67g和bop 3.63g，溶于thf 1.1ml中，滴加dbu 1.78g，置換氮氣，攪拌均勻，室溫(rt，25℃)攪拌反應(yīng)20min。停止反應(yīng)，抽濾，用水和無水乙醇洗滌濾餅，干燥后溶于12ml thf中，加入化合物
ⅱ?
5-1 0.85g、碳酸銫3.54g，置換氮氣，攪拌均勻，室溫(rt，25℃)攪拌反應(yīng)12h，減壓濃縮除去大部分溶劑，加水析出固體，過濾，再用乙醇洗滌濾餅，風(fēng)干干燥后得到1.01g。
[0088]
化合物
ⅲ?
2-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 579[m+na]
+
。
[0089]
(4)化合物
ⅲ?
4-1(4-(4-氟苯基)-2-(4-((6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)吡咯[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)氧基)苯乙基)異吲哚啉-1,3-二酮)的合成：
[0090][0091]
將化合物
ⅲ?
2-1 789.75mg和聯(lián)硼酸頻那醇酯540mg溶于10ml 1,4-dioxane(1,4-二氧六環(huán))中，加入xphos-pd-g3 48.5mg、醋酸鉀420mg和4-苯基吡啶(4-phenylpyridine)44.2mg，攪拌均勻，置換氮氣。將溫度升至100℃，反應(yīng)7h。反應(yīng)停止，將反應(yīng)液倒入飽和食鹽
水中，用ea萃取3次，合并有機相，旋干得粗產(chǎn)品，再用pe和ea重結(jié)晶得到白固體784.71mg。
[0092]
化合物
ⅲ?
4-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 605[m+h]
+
。
[0093]
(5)化合物i-1-1(4-(4-氟苯基)-2-(4-(6-(5-((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)吡咯[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)氧基)苯乙基)異吲哚-1,3-二酮)的合成：
[0094][0095]
將化合物
ⅲ?
4-1 76.73mg和6-溴-n-(2-甲氧基乙基)-3-吡啶甲胺28.90mg溶于6ml1,4-dioxane(1,4-二氧六環(huán))中，加入xphos-pd-g3 4.30mg、k3po
4 101.35mg和水11.42mg，混合攪拌，置換氮氣。移至120℃油浴加熱，反應(yīng)4h。反應(yīng)停止，減壓濃縮除去大部分溶劑，經(jīng)反相柱層析純化，得到白粉末27.72mg。
[0096]
化合物i-1-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 643[m+h]
+
。
[0097]
化合物i-1-1核磁共振氫譜表征結(jié)果為：1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.58(d,j＝1.7hz,1h),8.54(d,j＝2.2hz,1h),8.10(s,1h),7.95(d,j＝8.0hz,1h),7.88
–
7.84(m,2h),7.77(ddd,j＝20.0,6.7,2.9hz,2h),7.68
–
7.62(m,2h),7.57(d,j＝1.7hz,1h),7.30(dt,j＝26.0,8.3hz,7h),3.82(dd,j＝8.4,6.5hz,2h),3.76(s,2h),3.41(t,j＝5.7hz,2h),3.24(s,3h),3.00
–
2.93(m,2h),2.67(t,j＝5.7hz,2h).
[0098]
實施例2
[0099]
一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物，i-2-1，結(jié)構(gòu)式為：
[0100]
制備路線如下：
[0101][0102]
(1)化合物
ⅳ?
3-1(4-氯-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡啶)的合成
[0103][0104]
將3-溴-4-氯吡啶3.1g和1-甲基-4-吡唑硼酸嚬吶醇酯3.56g溶于1,4-dioxane(1,4-二氧六環(huán))(30ml)和水(3ml)的混合液中，加入pd(pph3)
4 550.14mg和na2co
3 3.46g，混合攪拌，抽真空，置換氮氣。移至100℃油浴加熱，攪拌反應(yīng)6h。反應(yīng)停止，旋蒸除去大部分溶劑，加硅膠拌樣進(jìn)行柱層析純化，得到話黃產(chǎn)物2.03g。
[0105]
化合物
ⅳ?
3-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 194[m+h]
+
。
[0106]
(2)化合物i-2-1(4-(4-氟苯基)-2-(4-((3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡啶-4-基)氧基)苯乙基)異吲哚-1,3-二酮)的合成：
[0107][0108]
將化合物
ⅱ?
5-1(實施例1制得)200.01mg和化合物
ⅳ?
3-1 373.26mg溶于dmf(2.0ml)中，加入xphos-pd-g3 4.30mg和cs2co
3 421.74mg，混合攪拌，抽真空，置換氮氣。移至100℃油浴加熱，反應(yīng)16h。反應(yīng)停止，向反應(yīng)體系中加入少量乙醇，再加入水，析出固體。抽濾，濾餅用乙酸乙酯溶解，拌硅膠進(jìn)行柱層析純化，得白粉末23.33mg。
[0109]
化合物i-2-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 519[m+h]
+
。
[0110]
化合物i-2-1核磁共振氫譜表征結(jié)果為：1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.84(s,1h),8.21(s,2h),7.99(s,1h),7.86(d,j＝6.9hz,2h),7.74(d,j＝6.7hz,1h),7.63(dd,j＝8.4,5.4hz,2h),7.30(d,j＝8.4hz,4h),7.08(d,j＝8.1hz,2h),6.53(d,j＝5.6hz,1h),3.87(s,3h),3.81(t,j＝7.2hz,2h),2.94(t,j＝7.3hz,2h).
[0111]
實施例3
[0112][0113]
(1)化合物
ⅴ?
3-1(4-氯-n-環(huán)丙基吡啶酰胺)的合成
[0114][0115]
將4-氯-2-吡啶甲酸2.0g和環(huán)丙胺0.87g溶于dcm(20ml)中，加入hatu 5.07g和三乙胺(net3)2.57g，攪拌混勻，室溫(rt，25℃)下反應(yīng)10h。反應(yīng)停止，旋蒸除去大部分溶劑，加水和乙腈稀釋，析出固體。抽濾除去固體，濾液減壓濃縮，得到白粉末0.7g。
[0116]
化合物
ⅴ?
3-1質(zhì)譜表征結(jié)果為：lcms(esi):m/z 197[m+h]
+
。
[0117]
(2)化合物i-3-1(n-環(huán)丙基-4-(4-(2-(4-(4-氟苯基)-1,3-二氧異喹啉-2-基)乙基)苯氧基)吡啶酰胺)的合成：
[0118][0119]
將化合物
ⅴ?
3-1 123.42mg和化合物
ⅱ?
5-1(實施例1制得)184.10mg溶于dmf(2.0ml)中，加入xphos-pd-g3 20.00mg和cs2co
3 410.44mg，攪拌均勻，抽真空，置換氮氣。移
slope擬合量效曲線，從而得出各個化合物對酶活性的ic
50
值。
[0143]
本發(fā)明化合物i-1-1、i-2-1、i-3-1對激酶axl的抑制活性如下表2
[0144]
表2化合物i-1-1、i-2-1、i-3-1對激酶axl的抑制活性
[0145][0146]
由上表可知，本發(fā)明化合物能夠有效地抑制axl激酶的活性。
[0147]
效果實施例2
[0148]
本實驗利用htrf的方法，分別以g-749、bibf-1120、blu-667、bms777607、loxo-195和sitravatinib作為陽性對照化合物，測試化合物i-1-1在flt3、kdr、ret、c-kit、c-met、tryo3、mertk、trka和trkb激酶上的ic
50
值。化合物測試濃度為10000nm，3倍稀釋，10個濃度，復(fù)孔。
[0149]
一、測試方法
[0150]
1.配制1
×
kinase buffer。
[0151]
2.使用分液器echo 550將化合物稀釋液轉(zhuǎn)移到實驗板(784075，greiner)的每個孔中。
[0152]
3.密封實驗板，1000rpm離心復(fù)合板1min。
[0153]
4.在1
×
kinase buffer中配制2倍終濃度的激酶溶液。
[0154]
5.向384孔板(784075，greiner)中加入5μl 2倍終濃度的激酶溶液。
[0155]
6. 1000rpm離心30秒，反應(yīng)板振蕩混勻后室溫孵育10分鐘。
[0156]
7.用1
×
kinase buffer配制2倍終濃度的atp和tk-substrate-biotin(2um)的混合溶液。
[0157]
8.加入5μl的2倍終濃度的atp和tk-substrate-biotin的混合溶液，開始反應(yīng)。
[0158]
9.將384孔板1000rpm離心30秒，振蕩混勻后室溫孵育相應(yīng)的時間。
[0159]
10.在htrf detection buffer中配制4
×
sa-xl 665。
[0160]
11.向384板的每個孔中加入5μl sa-xl 665和5μl tk-antibody-cryptate。
[0161]
12. 1000rpm離心30秒，室溫孵育1小時。
[0162]
13.在envision 2104微孔板檢測儀上讀取615nm(cryptate)和665nm(xl665)處的熒光信號。
[0163]
二、數(shù)據(jù)分析
[0164]
1.計算每個孔的比值(665/615nm)
[0165]
2.％inhibition計算如下：
[0166]
％inhibition＝100-(signal
cmpd-signal
ave_pc
)/(signal
ave_vc-signal
ave_pc
)
×
100.
[0167]
3.計算ic
50
并繪制化合物的量效曲線：
[0168]
以濃度的log值作為x軸，％inhibition為y軸，采用分析軟件graphpad 8.0的log(inhibitor)vs.response-variable slope擬合量效曲線，從而得出各個化合物對酶活性的ic
50
值。公式如下：
[0169]
y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic
50-x)*hillslope))
[0170]
三、實驗結(jié)果
[0171]
本發(fā)明化合物i-1-1在flt3、kdr、ret、c-kit、c-met、tryo3、mertk、trka和trkb激酶上的ic
50
值如下表。
[0172]
表3實驗結(jié)果
[0173][0174]
化合物i-1-1：
[0175]
從表3可看出，化合物i-1-1對tam激酶家族的tryo3、mertk具有良好的抑制活性，對其他靶點抑制活性較弱，具有很高的選擇性。
技術(shù)特征：
1.一種具有通式i所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽：r1選自h或鹵素；r2、r3分別獨立地選自h或鹵素；r4選自吡咯并三嗪基或吡啶基，其中，所述吡咯并三嗪基或所述吡啶基被r5基團(tuán)所取代；r5選自h、c6-c10芳基、5-10元雜芳基、4-10元雜環(huán)烷基、-c(o)r
a
、-c(o)nr
a
r
a
、-c(o)or
a
、-or
a
、-oc(o)nr
a
r
a
或-nr
a
r
a
；所述5-10元雜芳基、4-10元雜環(huán)烷基分別被1、2或3個獨立選擇的r
b
所取代；r
b
選自h、c1-c5烷基、c1-c5烷氧基取代的c1-c5烷基、羥基取代的c1-c5烷基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基、c1-c3烷基取代的4-10元雜環(huán)烷基、-s(o)2r
b1
或-nr
b2
r
b3
；r
b1
選自：c3-c5環(huán)烷基或c6-c10芳基；r
b2
、r
b3
分別獨立地選自h、c1-c5烷基或c1-c5烷氧基取代的c1-c5烷基；r
a
各自獨立地選自h、c1-c10烷基、-nr
c
r
c
、-s(o)2r
c
、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基或-c(o)r
c
；其中，所述c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基各自獨立地被1、2或3個獨立選擇的r
c
取代基取代；r
c
各自獨立地選自：h、c1-c5烷基、c6-c10芳基、c3-c10環(huán)烷基、4-10元雜環(huán)烷基、-or
d
或-nr
d
r
d
；r
d
各自獨立地選自：h或c1-c5烷基。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其特征在于，r4選自3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其特征在于，r4選自4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其特征在于，r
b
選自
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，其特征在于，所述通式i化合物包括以下結(jié)構(gòu)式所示的化合物中的任意一種：
6.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權(quán)利要求1-5任一項所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，以及輔料。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還的劑型包括片劑、丸劑、粒劑、粉劑、膠囊劑、糖漿、乳劑、混懸劑中的至少一種。
8.權(quán)利要求1-5任一項所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽在制備tam激酶抑制劑中的應(yīng)用。9.權(quán)利要求1-5任一項所述的通式i所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或權(quán)利要求6-7任一項所述的藥物組合物在制備或預(yù)防腫瘤藥物中的應(yīng)用。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤包括乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌、胃癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、肝細(xì)胞癌、甲狀腺癌、子宮癌、食管癌、鱗狀細(xì)胞癌、白血病、骨肉瘤、黑素瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌中的至少一種。
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種異吲哚啉-1,3-二酮衍生物及其應(yīng)用。該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物通式I所示的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，為具有通式I的化合物：該異吲哚啉-1,3-二酮衍生物具有良好的TAM激酶抑制作用，對AXL激酶的IC
