一種氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法及其培養(yǎng)基
1.本發(fā)明涉及食用真菌培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其是采用氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法及其培養(yǎng)基。
技術(shù)背景
2.靈芝，我國傳統(tǒng)中藥，著名藥食兩用菌。子實體含有多糖、三萜類化合物等次生代謝產(chǎn)物，具有抗氧化、降血糖、免疫調(diào)節(jié)等功效。目前獲得靈芝次生代謝產(chǎn)物的主要方式仍是從子實體中提取，子實體則主要通過傳統(tǒng)栽培方式獲得，而傳統(tǒng)栽培方式因生長周期長、易染菌、生長不均一等缺點阻礙靈芝的開發(fā)與發(fā)展。
3.靈芝液體深層發(fā)酵可在短時間內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)、菌齡統(tǒng)一的靈芝菌絲體及次生代謝產(chǎn)物，相比傳統(tǒng)栽培方式具有操作簡便、周期短、生產(chǎn)效率高等特點，可明顯縮短生產(chǎn)周期、減少著地面積、減少生產(chǎn)成本。研究表明，采用靈芝液體深層發(fā)酵獲得的靈芝菌絲體及次生代謝產(chǎn)物同樣具有與子實體獲得的具有相同的藥理作用，且一些發(fā)酵產(chǎn)物也具有對機體的正向調(diào)節(jié)作用，無論是發(fā)酵產(chǎn)物提取靈芝次級活性物，還是發(fā)酵產(chǎn)物處理后的應(yīng)用都具有廣闊的應(yīng)用價值。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
4.本發(fā)明提供一種氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法及其培養(yǎng)基，該培養(yǎng)方法可配合該培養(yǎng)基滿足靈芝菌絲體可降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率、增加靈芝菌絲體產(chǎn)量。為達到上述目的，采用以下手段。
5.培養(yǎng)基成分選擇上，粉絲下腳料、木耳菌糠仍包含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，可滿足靈芝菌絲體生長的營養(yǎng)需求，且降低成本，增加廢料利用率。培養(yǎng)方法上，首先制備液體種子階段，采用咖啡攪拌器將成球的菌絲體打碎可增加靈芝生長點，且操作方法簡單，染菌率低。發(fā)酵罐培養(yǎng)階段，即接種后0h-48h，26-28℃、通氣量6-8l/min培養(yǎng)，此步目的同樣在于增大通氣量也可起到打破菌絲體的作用，增加生長點，增加菌絲體含量，隨后再培養(yǎng)于28℃-30℃、通氣量2-4l/min培養(yǎng)五天，待發(fā)酵液澄清即可放出罐中發(fā)酵物。
6.具體實施案例實施案例1利用吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)發(fā)酵實驗室中100l氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體，培養(yǎng)基配方如下：粉絲下腳料25份、木耳菌糠25份、豆粕粉20份、麥麩粉10份、葡萄糖19份、消泡劑1份。發(fā)酵條件為：0h-48h時，溫度設(shè)置為26℃、通氣量為6.2l/min；48h-120h時，溫度設(shè)置為28℃、通氣量為2.3l/min。此條件下連續(xù)發(fā)酵三次，靈芝菌絲體含量分別為10.32g/l、9.82g/l、11.97g/l。
7.實施案例2利用吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)發(fā)酵實驗室中150l氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體，培養(yǎng)基配方如下：粉絲下腳料20份、木耳菌糠30份、豆粕粉25份、麥麩粉13份、葡萄糖16份、消泡劑1份。
發(fā)酵條件為：0h-48h時，設(shè)置溫度為27℃、通氣量為7l/min；48h-120h時，設(shè)置溫度為29℃、通氣量為3l/min。此條件下連續(xù)發(fā)酵三次，靈芝菌絲體含量分別為11.73g/l、10.31g/l、10.65g/l。
8.實施案例3利用吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)發(fā)酵實驗室中50l氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體，培養(yǎng)基配方如下：粉絲下腳料23份、木耳菌糠27份、豆粕粉22份、麥麩粉14份、葡萄糖13份、消泡劑1份。發(fā)酵條件為：0h-48h，溫度設(shè)置28℃、通氣量為8l/min；48h-120h，設(shè)置溫度30℃、通氣量為4l/min。此條件下連續(xù)發(fā)酵三次，靈芝菌絲體含量分別為9.73g/l、10.52g/l、9.34g/l。
技術(shù)特征：
1.一種氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法，具體步驟如下:首先制備液體種子液，即無菌環(huán)境下挑取長滿平板的靈芝菌絲體兩塊，每塊大小1cm
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1cm，接種于500ml搖瓶，于28℃-30℃、155rpm培養(yǎng)5-6d；于無菌環(huán)境下使用咖啡攪拌器打碎菌絲體，增加生長點，打碎后靜置3h即得；隨后進行氣升式發(fā)酵罐的培養(yǎng)，即接菌時，接菌口需纏繞一圈浸泡過無水乙醇的脫脂棉，點燃，快速打開接菌口，取液體種子液（10瓶）快速倒入發(fā)酵罐中，快速蓋緊接菌口接種后0h-48h，26℃-28℃、通氣量6l-8l/min培養(yǎng)；48h-120h，于28℃-30℃、通氣量2l-4l/min培養(yǎng),發(fā)酵液澄清時即為發(fā)酵終點。2.一種適用于氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的培養(yǎng)基，其特征在于，按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計算應(yīng)包括粉絲下腳料18-27份、木耳菌糠22-30份、豆粕粉17-25份、麥麩粉10-15份、葡萄糖13-20份、消泡劑1份。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述粉絲下腳料、木耳菌糠，應(yīng)充分干燥，粉碎，過50目篩使用。4.權(quán)利要求2中所述培養(yǎng)基，其添加量應(yīng)為每100l水添加500g。
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法及其培養(yǎng)基。氣升式發(fā)酵罐培養(yǎng)靈芝菌絲體的方法為接種后0h-48h,于26℃-28℃、通氣量6L-8L/min培養(yǎng)；48h-120h，于28℃-30℃、通氣量2L-4L/min培養(yǎng),發(fā)酵液澄清時即為發(fā)酵終點。其培養(yǎng)基配方為粉絲下腳料18-27份、木耳菌糠22-30份、豆粕粉17-25份、麥麩粉10-15份、葡萄糖13-20份、消泡劑1份。本發(fā)明能夠提高生產(chǎn)效率、降低生產(chǎn)成本、使生產(chǎn)生活廢料變廢為寶，有助于靈芝液體發(fā)酵的工廠化的推廣應(yīng)用。有助于靈芝液體發(fā)酵的工廠化的推廣應(yīng)用。
