一種速生抗逆型中國對蝦配套系的選育方法

本發明屬于中國對蝦育種技術領域，具體涉及一種速生抗逆型中國對蝦配套系的選育方法。

中國對蝦又稱東方對蝦，俗稱對蝦、明蝦，是我國黃渤海沿海區域重要的養殖物種，在養殖發展盛期(1990年前后)養殖產量達20萬噸左右，占我國對蝦養殖產量的70％。但自1993年對蝦病毒性疾病暴發以來，中國對蝦的養殖總產量急劇下降，直到2000年以后才逐漸恢復生產，近年來年養殖面積30-40萬畝，養殖產量4-5萬噸。近年來養殖水環境的污染、頻繁的極端天氣嚴重影響著中國對蝦的生長環境，異常的養殖環境因子的脅迫抑制中國對蝦的生長發育，導致對蝦減產甚至死亡。

我國國家漁業水質標準(GB11607-89)中要求漁業水域的水質中非離子氨濃度≤0.02mg/L，但在實際池塘養殖過程中，由于放養密度大、過量投餌及排泄物的多年累積等原因，常常會導致池塘氨氮含量偏高，從而引起對蝦免疫力和抵抗力下降，生長緩慢，發生疾病，甚至造成急性、慢性中毒而死亡，給養殖業帶來相當大的危害。pH值作為水環境生態平衡的指標，每增加一個pH值單位，水體中非離子氨的濃度就增加10倍。正常pH值條件下中國對蝦幼蝦24h存活率在95％以上，隨著pH升高存活率會顯著下降，pH9.4條件下對蝦幼體6h時死亡率可達85％，24h全部死亡。且與凡納濱對蝦和日本囊對蝦等其他主養物種相比，中國對蝦高pH脅迫的耐受性最低，在同一高pH脅迫條件下，凡納濱對蝦和日本囊對蝦的存活率分別為54.6％和97％，而中國對蝦的存活率僅為13.3％。因此，發掘具有優異抗逆性狀的中國對蝦種質材料，培育生長速度快和抗逆能力強的中國對蝦新品種，以適應和抵抗養殖環境因子帶來的各種脅迫和不良刺激是當前對蝦育種工作的首要任務之一。

目前中國對蝦的選育主要以體選育、家系選育為主，選育目標多為單個性狀的選育，難以滿足當前養殖產業對多元化新品種的需求。配套系育種是選育具不同優良性狀的中國對蝦專門化品系，通過多系配套和雜交，篩選出雜交優勢好符合生產需求的商品代。所以急需開展中國對蝦的配套系育種工作，培育出生長速度快、抗逆能力強的新種質，提高中國對蝦的養殖成功率和良種覆蓋率，推動產業穩定可持續發展。

本發明要解決的技術問題在于提供了一種速生抗逆型中國對蝦配套系的選育方法，該方法充分利用已培育出的中國對蝦“黃海1號”、“黃海3號”和“黃海4號”新品種的遺傳資源優勢，在保持各品種優良的生長和抗逆性能的基礎上，充分發揮品種間雜交優勢，將優良性狀進行聚合，培育出生長速度快和對環境脅迫耐受能力強的中國對蝦配套系。

本發明是通過如下技術方案來實現的：

一種速生抗逆型中國對蝦配套系的選育方法，包括以下操作步驟：

(1)收集中國對蝦“黃海1號”體進行純繁，選擇生長性能優異的個體組建基礎體，作為配套系母系的祖代來源；

(2)收集中國對蝦“黃海3號”和“黃海4號”體進行純繁，分別從兩個體中選擇對養殖水體中高氨氮和高pH脅迫耐受能力強的個體組建基礎體，作為配套系父系的祖代來源；

(3)從中國對蝦“黃海1號”純繁體中選擇生長優良雌蝦和雄蝦親本作為祖代，采用人工授精技術進行雜交，選育出生長性能優質的家系作為專門化母系；

(4)從中國對蝦“黃海3號”純繁體中選擇耐高氨氮脅迫能力強的雄蝦親本，從中國對蝦“黃海4號”純繁體中選擇耐高pH脅迫能力強的雌蝦親本作為祖代，采用人工授精技術進行雜交，選育出抗逆能力強的家系作為專門化父系；

(5)從專門化母系中選擇雌蝦，從專門化父系中選擇雄蝦，采用人工授精技術進行雜交，獲得速生抗逆型中國對蝦配套系。

其進一步的技術方案是：

步驟(1)中中國對蝦“黃海1號”體具生長速度快的優良性狀，品種登記號為GS01001-2003；

步驟(2)中中國對蝦“黃海3號”體耐氨氮脅迫能力強，品種登記號為GS-01-002-2013；中國對蝦“黃海4號”耐高pH值脅迫能力強，品種登記號為GS-01-003-2020。

步驟(3)中雌蝦和雄蝦親本的選擇標準為：體質健壯、附肢完整、體表光潔，雌蝦卵巢發育豐滿、體長大于14cm、體重大于37g；雄蝦精莢為乳白，體長大于12cm、體重大于24g。

步驟(3)中專門化母系的培育方法包括如下操作步驟：

S1，選擇生長性狀優良的雌蝦和雄蝦親本，采用人工授精技術按1:1比例進行雜交，生產出F1代；

S2，從F1代中選育出生長速度快的家系3-5個，自F2代開始進行家系內自交；

S3，經過連續3個世代的選育，最終選育出生長性狀表現最好的家系作為專門化母系。

其中專門化母系的培育方法步驟S3中專門化母系的親本選擇標準為：體質健壯、附肢完整、體表光潔，雌蝦卵巢發育豐滿，體長大于16cm、體重大于47g；雄蝦精莢為乳白，體長大于13cm、體重大于31g。

步驟(4)中中國對蝦“黃海3號”雄蝦親本選擇標準為：氯化銨濃度為64mg/L脅迫96h條件下存活個體，雄蝦體長大于12cm、體重大于21g；中國對蝦“黃海4號”雌蝦親本選擇標準為：pH9.2脅迫96h條件下存活的個體，未交尾雌蝦體長大于14cm、體重大于33g。

步驟(4)中專門化父系的培育方法包括如下操作步驟：

S1，選擇中國對蝦“黃海3號”的雄蝦和中國對蝦“黃海4號”的雌蝦，采用人工授精技術進行雜交，生產出F1代；

S2，從F1代中選育出耐高氨氮和高pH值脅迫能力強的家系3-5個，自F2代開始進行家系內自交；

S3，經過連續3個世代的選育，最終選育出抗逆能力最強的家系作為專門化父系。

其中專門化父系的培育方法步驟S3中專門化父系親本的選擇標準為：仔蝦耐高氨氮和高pH能力較父母代提高30％以上，雌蝦卵巢發育豐滿、體長大于14cm、體重大于36g，雄蝦精莢為乳白、體長大于13cm、體重大于27g。

步驟(5)中從專門化母系中選擇雌蝦，從專門化父系中選擇雄蝦進行雜交，獲得配套系優質商品蝦，體質健壯、附肢完整、體表光潔，生長性能和抗逆能力均比親本有所提高。仔蝦耐高氨氮和高pH值能力較祖代提高20％以上，收獲雌蝦體長大于15cm、體重大于43g，收獲雄蝦體長大于13cm，體重大于29g。

圖1是本發明所述的培育速生抗逆型中國對蝦配套系的技術流程圖。

為使本發明的特征及優點能夠更加明顯易懂，下面對本發明的具體實施方式做詳細說明。但是本發明能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實施，本領域技術人員可以在不違背本發明內涵的情況下做類似改進，因此本發明不受下面公開的具體實施的限制。

實施例1：中國對蝦配套系祖代基礎體的收集

中國對蝦“黃海1號”、“黃海3號”和“黃海4號”均為國家審定的水產新品種，品種登記號分別為GS01001-2003、GS-01-002-2013、GS-01-003-2020，各具不同優異的生產性能，其中中國對蝦“黃海1號”具有生長速度快的優良性狀，中國對蝦“黃海3號”對養殖水體中的氨氮脅迫耐受能力強，中國對蝦“黃海4號”對養殖水體中的高pH值耐受能力強。實施地點設在昌邑市海豐水產養殖有限責任公司，所用親本材料也購自昌邑市海豐水產養殖有限責任公司，養殖環境和管理條件基本一致，可以排除人為及環境因素對選育造成的誤差，提高選育效果的準確度。采用完全雙列雜交模式對3個體的生長、耐氨氮和高pH值脅迫的性狀進行了測試，結果如下表所示。

實施例2：中國對蝦配套系母系祖代的性能選擇標準

2015年10月中國對蝦“黃海1號”養殖體收獲時，從中國對蝦“黃海1號”養殖體中挑選體格健壯、生長性能良好的未交尾雌蝦和雄蝦各100尾進行單獨留種與越冬，統計其體長和體重，作為配套系母系的祖代。收集的中國對蝦“黃海1號”未交尾雌蝦體長為14.65-15.35cm，體重37.01-42.37g；雄蝦體長12.7-13.62cm，體重24.02-27.53g。

實施例3：中國對蝦配套系父系祖代的性能選擇標準

2015年4月對收集的中國對蝦“黃海3號”和“黃海4號”基礎體的親蝦進行苗種繁育，待幼體發育至體長約1.0cm的仔蝦時進行脅迫實驗。

(1)從中國對蝦“黃海3號”體中隨機選取10萬尾仔蝦，采用濃度為64mg/L的氯化銨脅迫96h后存活個體約2.5萬尾放入室外池塘中進行養殖。2015年10月收獲時，挑選體格健壯、生長性能良好的雄蝦100尾進行單獨留種與越冬，統計其體長和體重，作為配套系祖代的父本，雄蝦體長12.16-12.98cm，體重21.89-22.53g。

(2)從中國對蝦“黃海4號”體中隨機選取10萬尾仔蝦，在pH＝9.2的條件下脅迫96h后存活個體約3.1萬尾放入室外池塘中進行養殖。2015年10月收獲時，挑選體格健壯、生長性能良好的未交尾雌蝦100尾進行單獨留種與越冬，統計其體長和體重，作為配套系祖代的母本，未交尾雌蝦體長為14.11-14.85cm，體重33.59-35.94g。

實施例4：專門化母系的培育

2016年4月從收集的中國對蝦“黃海1號”越冬體中，挑選體質健壯的未交尾雌蝦和雄蝦各30尾，采用人工授精技術，按1:1比例進行雜交。將人工授精后的親蝦單獨放入200L聚乙烯桶中進行產卵和孵化。待各個家系的幼體發育至體長約1.0cm的仔蝦時放入室外池塘，在同一條件下進行養殖和測試。2016年10月收獲時對各家系的體長和體重進行測量，選留出性狀表現好的家系3-5個，自F2代開始進行家系內自交，經過連續3代的選育，選出性狀表現最好的家系作為專門化母系，雌蝦體長16.07-17.14cm，體重47.63-55.12g；雄蝦體長13.88-14.92cm，體重31.36-35.63g。

實施例5：專門化父系的培育

2016年4月從中國對蝦“黃海3號”越冬體中，挑選體質健壯的雄蝦30尾，從中國對蝦“黃海4號”體中，挑選體質健壯的未交尾雌性30尾，采用人工授精技術，按1:1比例進行雜交。將人工授精后的親蝦單獨放入200L聚乙烯桶中進行產卵和孵化。待各個家系的幼體發育至體長約1.0cm的仔蝦時，隨機選取10萬尾進行耐氨氮和耐高pH值脅迫實驗，存活率控制在3％-5％，放入室外池塘進行養殖。2016年10月收獲時對各家系的體長和體重進行測量，統計養殖成功率，選留出性狀表現好的家系3-5個，自F2代開始進行家系內自交，經過連續3代的選育，選育出生長速度快且抗逆能力強的家系作為專門化的父系，仔蝦耐高氨氮和高pH能力較父母代提高31.2％，雌蝦體長14.07-15.04cm，體重36.63-38.32g；雄蝦體長13.18-14.09cm，體重27.36-28.22g。

實施例6：中國對蝦配套系的培育

利用專門化父系與專門化母系進行雜交，生產出速生抗逆型中國對蝦配套系商品蝦，體質健壯，規格整齊，遺傳性狀穩定，生長性能和抗逆能力均比親本有所提高。仔蝦耐高氨氮和高pH值能力較祖代提高21.6％，收獲雌蝦體長15.27-16.1cm，體重43.16-46.33g；收獲雄蝦體長13.38-14.39cm，體重29.13-31.01g。整個中國對蝦配套系的培育的技術流程如圖1所示。