一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑及其應用的制作方法
1.本發明屬于飼料添加劑技術領域，具體涉及一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑及其應用。
背景技術：
2.飼料原料常見的霉菌毒素來源有：曲霉菌屬(aspergillus，主要分泌黃曲霉毒素等)、青霉菌屬(penicillium，主要分泌赭曲霉毒素、桔霉素等)、鐮刀菌屬(fusarium，主要分泌嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、t-2毒素等)和麥角菌屬(主要分泌麥角毒素)等。霉菌的大量繁殖會引起飼料發生霉變，這不僅會使飼料的適口性降低，而且還會影響畜禽的采食量，同時由于霉菌的生長和繁殖是通過飼料中的營養成分來供給，因此霉變還會降低飼料的營養價值。另外，霉菌在代謝過程中產生霉菌毒素，而霉菌毒素在畜禽采食后不僅會影響畜禽的免疫機能，高劑量的霉菌毒素還會導致畜禽發生中毒現象。據統計，有66％以上的飼料原料至少存在1種霉菌毒素污染，35％的飼料原料存在2種以上霉菌毒素污染，而玉米粕、豆粕及麩皮等霉菌毒素的含量是整粒谷物含量的30～500倍，幾乎所有的花生粕都存在霉菌毒素污染，飼料霉變嚴重危害飼料業及畜牧業。
3.為此，急需開發能夠抑制飼料原料中有害霉菌的綠產品，以提高飼料產品的安全性，減少公共危害。
技術實現要素：
4.本發明的目的是克服飼料霉變嚴重危害飼料業及畜牧業的問題。
5.為此，本發明提供了一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑，包括：6-8份葡萄糖氧化酶、2-4份乳酸制劑和0-2份載體。
6.具體的，上述葡萄糖氧化酶的酶活為8000u/g。
7.具體的，上述乳酸制劑中乳酸的質量濃度為20％-25％。
8.具體的，上述載體為淀粉。
9.本發明還提供了一種抑制飼料中麥角菌生長繁殖的方法，包括以下步驟：將上述的酶酸復合制劑加入到生理鹽水中，搖床提取后離心取上清液，得到酶酸復合制劑溶液，將所述酶酸復合制劑溶液加入到飼料中混勻。
10.具體的，以飼料質量計，上述酶酸復合制劑溶液的添加量為0.08％-1.6％。
11.與現有技術相比，本發明具有以下優點和有益效果：
12.本發明提供的這種抑制麥角菌的酶酸復合制劑可顯著抑制麥角菌的生長繁殖，將其作為添加劑加入飼料中，能夠從源頭抑制麥角菌，有效去除飼料中麥角毒素的累積，避免霉菌毒素的危害。
13.以下將結合附圖對本發明做進一步詳細說明。
附圖說明
14.圖1是本發明實施例4中不同試驗組麥角菌生長情況；a、試驗組1；b、試驗組2、c、試驗組3；d、試驗組4；e、試驗組5；f、試驗組6；g、陽性對照；h、陰性對照。
15.圖2是本發明實施例4中不同對照組麥角菌生長情況；a、對照組1；b、對照組2；c、對照組3；d、對照組4。
具體實施方式
16.下面將結合實施例對本發明中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。盡管已經詳細描述了本發明的代表性實施例，但是本發明所屬技術領域的普通技術人員將理解，在不脫離本發明范圍的情況下可以對本發明進行各種修改和改變。因此，本發明的范圍不應局限于實施方案，而應由所附權利要求及其等同物來限定。
17.下面通過具體實施例對本發明的抑制麥角菌的酶酸復合制劑的效果進行研究。
18.實施例1：
19.本實施例提供了一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑，其通過以下方法制備：
20.取葡萄糖氧化酶7份，乳酸制劑3份，淀粉1份，混合后得到酶酸復合制劑。酶酸復合制劑中葡萄糖氧化酶的酶活為8000u/g，乳酸制劑中乳酸的質量濃度為25％。
21.實施例2：
22.本實施例提供了一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑，其通過以下方法制備：
23.取葡萄糖氧化酶6份，乳酸制劑4份，淀粉2份，混合后得到酶酸復合制劑。酶酸復合制劑中葡萄糖氧化酶的酶活為8000u/g，乳酸制劑中乳酸的質量濃度為25％。
24.實施例3：
25.本實施例提供了一種抑制麥角菌的酶酸復合制劑，其通過以下方法制備：
26.取葡萄糖氧化酶8份，乳酸制劑2份，混合后得到酶酸復合制劑。酶酸復合制劑中葡萄糖氧化酶的酶活為8000u/g，乳酸制劑中乳酸的質量濃度為20％。
27.實施例4：
28.本實施例研究了酶酸復合制劑對麥角菌的抑制作用，具體步驟如下。
29.(1)配制培養基
30.pda培養基：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，蒸餾水補足至1000ml。
31.ypd液體培養基：1％酵母膏，2％蛋白胨，2％葡萄糖。
32.(2)實驗試劑配制
33.制備酶酸復合制劑溶液：稱取1g實施例1提供的酶酸復合制劑，加入99ml滅菌的生理鹽水，于搖床提取30min，離心取上清，再用滅菌生理鹽水稀釋至不同濃度，備用。
34.制備麥角菌菌懸液的：將分離于黑麥的麥角菌接種于pda斜面上，置于25℃培養72h，從斜面洗脫菌液備用。
35.制備葡萄糖氧化酶溶液：稱取1g酶活為8000u/g的葡萄糖氧化酶，加入99ml滅菌的生理鹽水，于搖床提取30min，離心取上清，再用滅菌生理鹽水稀釋至不同濃度，備用。
36.制備乳酸溶液：稱取1g乳酸制劑，加入99ml滅菌的生理鹽水，于搖床提取30min，離心取上清，再用滅菌生理鹽水稀釋至不同濃度，備用。
37.(3)搖瓶混菌
38.取8個搖瓶作為陰性對照組、陽性對照組和試驗組1-6，每個搖瓶中分裝50ml的ypd培養基，各組中酶酸復合制劑溶液和麥角菌菌懸液的添加量如下，其中酸酶復合制劑的濃度為相對于ypd培養基體積的體積濃度。
39.陽性對照：加入2ml的麥角菌菌懸液；
40.陰性對照：加入2ml經煮沸5分鐘滅活的麥角菌菌懸液；
41.試驗組1：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.08％的酶酸復合制劑溶液；
42.試驗組2：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.16％的酶酸復合制劑溶液；
43.試驗組3：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.32％的酶酸復合制劑溶液；
44.試驗組4：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.48％的酶酸復合制劑溶液；
45.試驗組5：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.64％的酶酸復合制劑溶液；
46.試驗組6：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為1.6％的酶酸復合制劑溶液；
47.對照組1：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.08％的葡萄糖氧化酶溶液；
48.對照組2：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為1.6％的葡萄糖氧化酶溶液；
49.對照組3：入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為0.08％的乳酸溶液；
50.對照組4：加入2ml的麥角菌菌懸液和濃度為1.6％的乳酸溶液。
51.將各組均置于25℃搖床培養72h，觀察麥角菌的生長情況，結果如圖1-2所示。陽性對照組和對照組1-4中麥角菌生長旺盛，成團塊狀；試驗組1-6基本同陰性對照一樣未見麥角菌生長，瓶中漂浮的菌體為取樣時加入的菌體本身。檢測各試驗組和對照組對麥角菌dsm715抑菌率，結果如表1所示。
52.表1抑菌率檢測結果
[0053] 抑菌率試驗組1100％試驗組2100％試驗組3100％試驗組4100％試驗組5100％試驗組6100％對照組10對照組20對照組30對照組40
[0054]
由表1和圖1可見，添加有本發明提供的酶酸復合制劑的6個試驗組對麥角菌的生長抑制效果顯著，實際使用時，產品的添加量建議為0.08％及以上。
[0055]
以上例舉僅僅是對本發明的舉例說明，并不構成對本發明的保護范圍的限制，凡是與本發明相同或相似的設計均屬于本發明的保護范圍之內。
