一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質及其制備方法和應用與流程
1.本發明涉及藥物化學技術領域，尤其涉及一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質及其制備方法和應用。
背景技術：
2.琥珀酸曲格列汀是一種超長效二肽基肽酶iv(dpp-4)抑制劑，商品名為zafatek，能夠選擇性、持續性抑制dpp-4，從而控制血糖水平，用于ⅱ型糖尿病。琥珀酸曲格列汀為全球上市的首個每周口服一次的降糖藥，而市場上同類dpp-4抑制劑需要每天口服一次，無疑為糖尿病患者提供了更為方便的選擇，有望大幅改善患者的依從性。
3.現有技術中琥珀酸曲格列汀(2-[[6-[(3r)-3-氨基-1-基]-3，4-二氫-3-甲基-2，4-二氧代-1(2h)-嘧啶基]甲基]-4-氟苯甲腈琥珀酸鹽)的主要合成工藝路線是以5-氟-2-溴甲苯為原料，經氰化，溴代，縮合，氨化，成鹽合成琥珀酸曲格列汀，路線如下：
[0004][0005]
其中，6-氯-3-甲基尿嘧啶的合成工藝路線如下：
[0006][0007]
在此合成過程中發現n-甲基脲中可能殘留脲，經環合和鹵代反應后會生成6-氯尿嘧啶等雜質，可與中間體2-氰基-5-氟芐溴進行反應生成一種新的結構如式(ⅰ)所示的琥珀酸曲格列汀中間體雜質，殘留在中間體2-[(6-氯-3，4-二氫-3-甲基-2，4-二氧代-1(2h)-嘧啶基)甲基]-4-氟苯甲腈中，而且該雜質還會進行后續的反應生成結構如式(ⅱ)所示的琥珀酸曲格列汀雜質，最終影響琥珀酸曲格列汀的藥物質量，反應過程如下所示：
[0008][0009]
為了對琥珀酸曲格列汀生產工藝中關鍵中間體雜質進行雜質分析、優化關鍵中間體生產工藝、對琥珀酸曲格列汀進行有效的質量控制，合成琥珀酸曲格列汀中間體的雜質對照品至關重要。現有文獻中尚無結構如式(ⅰ)所示的琥珀酸曲格列汀中間體雜質及其制備方法，因此研制一種溫和制備琥珀酸曲格列汀中間體雜質的方法以保證臨床用藥安全是非常有必要的。
技術實現要素：
[0010]
本發明的目的是提供一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，操作簡單、反應條件易于控制、制得的產品純度高。
[0011]
以及，本發明還提供一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質，對琥珀酸曲格列汀及其關鍵中間體的質量控制具有重要意義。
[0012]
以及，本發明還提供上述琥珀酸曲格列汀中間體雜質作為對照品在琥珀酸曲格列汀生產工藝中的應用。
[0013]
為達到上述發明目的，本發明采用了如下的技術方案：
[0014]
第一方面，本發明提供了一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，包括如下步驟：
[0015]
(1)將2-氰基-5-氟芐溴和堿試劑分別分散于溶劑中，再于55℃～65℃條件下加入6-氯尿嘧啶，反應20min～30min后，經過濾、干燥，得式(i)所示化合物的粗品；
[0016]
(2)將所述粗品經薄層譜純化得式(i)所示的琥珀酸曲格列汀中間體雜質。
[0017]
其反應路線如下：
[0018][0019]
本發明以2-氰基-5-氟芐溴為原料，與6-氯尿嘧啶在堿的作用下反應合成得琥珀酸曲格列汀中間體雜質粗品，經薄層譜柱層析純化得到高純度的琥珀酸曲格列汀中間體
雜質。本發明建立了琥珀酸曲格列汀關鍵中間體的雜質對照品的合成方法，是研究琥珀酸曲格列汀原料藥的雜質組成和質量控制的基礎，且該方法原料易得，反應條件易于控制，反應時間短，后處理操作簡單，產品純度高，故該合成方法工業化應用前景廣闊。
[0020]
可選的，步驟(1)中，所述反應結束后先加入純化水在0～10℃下攪拌0.5h～1h，再進行過濾，所述純化水與6-氯尿嘧啶的質量比為(16～24)：1。
[0021]
可選的，步驟(1)中，步驟(1)中，所述干燥的溫度為40℃～60℃，時間為4h～8h。
[0022]
可選的，步驟(1)中，步驟(1)中，將6-氯尿嘧啶分為2～4份，每次加入一份，每次間隔5min～15min。
[0023]
優選的分批加料的投料方式，能夠使原料充分反應，提高反應收率。
[0024]
可選的，步驟(1)中，所述堿試劑為n，n-二異丙基乙胺(dipea)。
[0025]
可選的，步驟(1)中，所述反應溶劑為n-甲基吡咯烷酮(nmp)或n，n-二甲基甲酰胺(dmf)中的一種。
[0026]
可選的，步驟(1)中，所述6-氯尿嘧啶、2-氰基-5-氟芐溴和堿試劑的摩爾比為1：(2～3)：(1～3)。
[0027]
可選的，步驟(2)中，所述薄層譜所用的洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合液，石油醚(pe)和乙酸乙酯(ea)的體積比為(10～30)：1。
[0028]
優選的體積比能夠實現琥珀酸曲格列汀關鍵中間體雜質的分離。
[0029]
第二方面，本發明提供了一種由上述技術方案制備得到的琥珀酸曲格列汀中間體雜質，結構如式(ⅰ)所示：
[0030][0031]
本發明提供的上述具有式(ⅰ)所示結構的化合物為合成琥珀酸曲格列汀關鍵中間體2-[(6-氯-3，4-二氫-3-甲基-2，4-二氧代-1(2h)-嘧啶基)甲基]-4-氟苯甲腈的過程中可能產生的雜質，以其作為對照品應用于琥珀酸曲格列汀的生產工藝中，對琥珀酸曲格列汀及其關鍵中間體的質量控制具有重要意義。
[0032]
第三方面，本發明提供了上述技術方案所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質作為對照品在琥珀酸曲格列汀生產工藝中的應用。
[0033]
通過本發明可以對琥珀酸曲格列汀生產工藝中的關鍵中間體雜質進行雜質分析，優化關鍵中間體的生產工藝，對琥珀酸曲格列汀進行有效的質量控制，從而提高琥珀酸曲格列汀產品的質量標準，為琥珀酸曲格列汀的安全用藥提供重要的指導意義，保障臨床用藥安全可靠性。
附圖說明
[0034]
為了更清楚地說明本發明實施例中的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領
域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。
[0035]
圖1為本發明實施例1中的中間體雜質的結構式。
[0036]
圖2為本發明實施例1中的中間體雜質的核磁共振氫譜圖；
[0037]
圖3為本發明實施例1中的中間體雜質的hplc譜圖。
具體實施方式
[0038]
為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應該正確理解的是：本發明的實施例僅僅是用于說明本發明，而不是對本發明的限制，所以，在本發明的方法前提下對本發明的簡單改進均屬于本發明要求保護的范圍。
[0039]
以下各實施例中，未詳細描述的各種過程和方法是本領域中公知的常規方法。
[0040]
實施例1
[0041]
本實施例提供一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，向250ml反應瓶中加入50ml nmp，加入18.26g 2-氰基-5-氟芐溴和9.26g dipea，升溫至60℃，分三批(每隔10分鐘加一次)加入5g 6-氯尿嘧啶，加畢，反應25min。tlc(pe:ea＝3:1)監測，反應完全后降溫，在5℃下加入100ml純化水，攪拌0.8h，過濾，濾餅于50℃下鼓風干燥6h，得到中間體雜質粗品。
[0042]
將中間體雜質粗品通過薄層譜柱層析提純，洗脫液pe:ea＝20:1，收集含有中間體雜質的洗脫液，減壓濃縮得10.88g琥珀酸曲格列汀中間體雜質，純度為99.23％，收率為77.24％。
[0043]
將上述制備的琥珀酸曲格列汀中間體雜質采用核磁共振和液相譜進行分析，結果如下：
[0044]
(1)氫譜結果如圖2所示，1h-nmr(500mhz，cdcl3)δ7.74(td，j＝8.3，5.3hz，2h)，7.41(dd，j＝9.0，2.6hz，1h)，7.30(dd，j＝8.9，2.6hz，1h)，7.20
–
7.12(m，2h)，6.60(s，1h)，5.60(d，j＝3.3hz，4h)，經過分析確定本實施例的產物的化學結果如圖1所示；
[0045]
(2)hplc譜圖結果如圖3所示，在保留時間為18.706min處出現峰1，峰面積為3639，峰面積比為0.77％，峰高為476；在保留時間為27.163min處出現峰2，峰面積為469030，峰面積比為99.23％，峰高為53659，可以看出，制得的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的純度為99.23％。
[0046]
其中，上述譜條件為：
[0047]
供試品溶液：取制得的琥珀酸曲格列汀中間體雜質適量，精密稱定，用乙腈定量稀釋成每1ml中約含0.6mg的溶液。
[0048]
譜柱：用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑(kromsil 100-5-c18，250mm
×
4.6mm，5μm或效能相當的譜柱)；以0.01mol/l的磷酸二氫鉀溶液為流動相a，以乙腈為流動相b，按下表1進行梯度洗脫；柱溫為40℃；流速為每分鐘1.0ml；檢測波長為224nm。
[0049]
表1流動相比例
[0050][0051][0052]
實施例2
[0053]
本實施例提供一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，向250ml反應瓶中加入50ml nmp，加入16.07g 2-氰基-5-氟芐溴(int1)和6.35g dipea，升溫至55℃，分兩批(每隔5分鐘加一次)加入5g 6-氯尿嘧啶(6-氯尿嘧啶)，加畢，反應20min。tlc(pe:ea＝3:1)監測，反應完全后降溫，在0℃下加入80ml純化水，攪拌0.5h，過濾，濾餅于40℃下鼓風干燥4h，得到中間體雜質粗品。
[0054]
將中間體雜質粗品通過薄層譜柱層析提純，洗脫液pe:ea＝10:1，收集含有中間體雜質的洗脫液，減壓濃縮得11.02g琥珀酸曲格列汀中間體雜質，純度為98.92％，收率為78.23％。
[0055]
實施例3
[0056]
本實施例提供一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，向250ml反應瓶中加入80ml nmp，加入21.91g 2-氰基-5-氟芐溴(int1)和13.1g dipea，升溫至65℃，分四批(每隔15分鐘加一次)加入5g 6-氯尿嘧啶(6-氯尿嘧啶)，加畢，反應30min。tlc(pe:ea＝3:1)監測，反應完全后降溫，在10℃下加入120ml純化水，攪拌1h，過濾，濾餅于60℃下鼓風干燥8h，得到中間體雜質粗品。
[0057]
將雜質粗品通過薄層譜柱層析提純，洗脫液pe:ea＝30:1，收集含有中間體雜質的洗脫液，減壓濃縮得11.56g琥珀酸曲格列汀中間體雜質，純度為99.08％，收率為82.07％。
[0058]
實施例2～3制備的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的液相譜結果與實施例1的基本一致，均達到純度＞98％的效果，即采用本發明提供的制備方法制得的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的純度高，收率高，符合雜質對照品要求，可作為標準品，應用于琥珀酸曲格列汀中間體雜質的定性、定量研究和檢測，對琥珀酸曲格列汀的質量控制具有一定的意義。
[0059]
以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換或改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
技術特征：
1.一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)將2-氰基-5-氟芐溴和堿試劑分別分散于溶劑中，再于55℃～65℃條件下加入6-氯尿嘧啶，反應20min～30min后，經過濾、干燥，得式(i)所示化合物的粗品；(2)將所述粗品經薄層譜純化得式(i)所示的琥珀酸曲格列汀中間體雜質2.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述反應結束后先加入純化水在0～10℃下攪拌0.5h～1h，再進行過濾，所述純化水與6-氯尿嘧啶的質量比為(16～24)：1。3.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述干燥的溫度為40℃～60℃，時間為4h～8h。4.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，將所述6-氯尿嘧啶分為2～4份，每次加入一份，每次間隔5min～15min。5.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述堿試劑為n，n-二異丙基乙胺。6.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述溶劑為n-甲基吡咯烷酮或n，n-二甲基甲酰胺。7.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述6-氯尿嘧啶、2-氰基-5-氟芐溴和堿試劑的摩爾比為1：(2～3)：(1～3)。8.如權利要求1所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質的制備方法，其特征在于：步驟(2)中，所述薄層譜所用的洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合液，石油醚和乙酸乙酯的體積比為(10～30)：1。9.一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質，其特征在于：由權利要求1～8任一項所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質制備方法制備得到。10.如權利要求9所述的琥珀酸曲格列汀中間體雜質作為對照品在琥珀酸曲格列汀生產工藝中的應用。
技術總結
本發明涉及藥物化學技術領域，尤其涉及一種琥珀酸曲格列汀中間體雜質及其制備方法和應用。本發明提供的具有式(Ⅰ)所示結構的化合物為合成琥珀酸曲格列汀關鍵中間體過程中產生的雜質，可作為對照品應用于琥珀酸曲格列汀生產工藝中，對琥珀酸曲格列汀及其關鍵中間體的質量控制具有重要意義。本發明提供了琥珀酸曲格列汀中間體雜質制備方法，建立了琥珀酸曲格列汀關鍵中間體的雜質對照品的合成方法，是研究琥珀酸曲格列汀原料藥的雜質組成和質量控制的基礎，且該方法操作簡單、反應條件易于控制、制得的產品純度高。控制、制得的產品純度高。控制、制得的產品純度高。
