合成亞烷基二元酸單酯的方法與流程
1.本發(fā)明涉及有機(jī)中間體合成領(lǐng)域，具體而言，涉及一種合成亞烷基二元酸單酯的方法。
背景技術(shù)：
2.長(zhǎng)鏈脂肪二元酸及其衍生物是精細(xì)化工中的重要中間體，常用于合成藥物、高級(jí)香料、航空潤(rùn)滑油、高性能尼龍工程塑料等材料，同時(shí)也被用作藥物和殺蟲(chóng)劑的重要材料（j. chem. research-s. 2000, 282-283）。
3.當(dāng)前在醫(yī)藥領(lǐng)域中，長(zhǎng)鏈脂肪二元酸單酯常被用于開(kāi)發(fā)藥代動(dòng)力學(xué)表現(xiàn)更優(yōu)良的藥物，其中，長(zhǎng)鏈亞烷基二元酸單叔丁酯是其中一種頗具代表性的藥物合成中間體。例如，用于醫(yī)藥研發(fā)和合成的十六烷基二酸單叔丁酯，是合成德谷胰島素的中間體，通過(guò)谷氨酸連接子引入十六碳脂肪二酸側(cè)鏈后，使得胰島素分子在血液循環(huán)種能與白蛋白可逆性結(jié)合，大大增加降低血糖的作用時(shí)效。同類的十八烷基二酸單叔丁酯，則是合成胰高血糖素樣肽glp-1的類似物（索馬魯肽）所需的重要中間體（j. med. chem. 2015, 58 (18), 7370
?
7380）。
4.最近thomas等人，也在關(guān)于口服超長(zhǎng)效胰島素類似物的報(bào)道（j. med. chem. 2021, 64, 616
?
628）中提出，將由十八烷二元酸或二十碳二元酸制備的白蛋白結(jié)合側(cè)鏈，連接到b29位置的賴氨酸上，可使藥物獲得超長(zhǎng)藥代動(dòng)力學(xué)曲線，成為新型胰島素替代藥物（臨床ii期）開(kāi)發(fā)起到關(guān)鍵作用。在該項(xiàng)研究中，二十碳二酸單叔丁酯是重要的反應(yīng)原料。
5.在有機(jī)合成中，羧酸的酯化是一類十分重要的反應(yīng)，然而使用簡(jiǎn)單、溫和條件選擇性單酯化二羧酸的報(bào)道數(shù)量仍較為有限。中國(guó)專利申請(qǐng)201910081610.1報(bào)道了一種高選擇性的方法制備脂肪二元酸的單叔丁酯，可使單叔丁酯的收率達(dá)70%，但該方法共需要四步合成，同時(shí)也需要以濃硫酸為催化劑，操作過(guò)程及后處理較為繁瑣。專利ep 3199546a1報(bào)道了長(zhǎng)鏈二元酸的單酯化，但主要缺點(diǎn)在于收率低，僅33%。
6.專利wo2016/077518中報(bào)道了十八烷二酸單酯化方法，用于十八烷二酸-1-（苯基甲基）酯，收率為49%。該反應(yīng)是通過(guò)在甲苯中回流十八烷二酸至完全溶解，再加入n,n-二甲基甲酰胺二叔丁基縮醛過(guò)夜回流進(jìn)行制備。
7.公開(kāi)號(hào)為cn112939771a中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N合成方法，以長(zhǎng)鏈亞烷基二酸為底物，先與草酰氯反應(yīng)生成單酰氯，再用叔丁醇與酰氯基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，生成長(zhǎng)鏈烷基二酸單叔丁酯。以制備十八烷基二酸單叔丁酯為例，粗品收率為70％，柱層析后產(chǎn)品純度可達(dá)98.8%。該合成方法需使用具有高毒性和腐蝕性的草酰氯、濃硫酸作催化劑，需要使用thf、dcm、dmf等有機(jī)溶劑，同時(shí)涉及低溫、加熱、惰性氣體保護(hù)等反應(yīng)條件。
8.而酶催化轉(zhuǎn)化這一工業(yè)生物技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)工藝上的改善，用于開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單、溫和、高效的方法來(lái)合成單酯。在silvia等人的報(bào)道中，固定化水解酶被用于酯化乙二醇獲得單酯及二酯（enzyme mrcrob. technol., 1997, vol. 20, 102-106）。在叔丁醇和二甲基亞砜混合溶劑（dmso/butoh =1：9 v/v）、60度條件下，固定化酶也被用于低聚果糖單酯的制備
（food chemistry. 2013, 138, 1884
–
1891）。
9.但這些研究中，均未涵蓋長(zhǎng)鏈脂肪二元酸。因較高的合成難度，亞烷基二酸單酯類中間體，市場(chǎng)價(jià)格普遍很高。因此，開(kāi)發(fā)將長(zhǎng)鏈烷基二元酸進(jìn)行單酯化的合成方法及工藝，具有重要的研究及應(yīng)用價(jià)值。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
10.本發(fā)明的主要目的在于提供一種合成亞烷基二元酸單酯的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中亞烷基二元酸單酯合成難度大、成本較高的問(wèn)題。
11.為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種合成亞烷基二元酸單酯的方法，該方法具體為：在水解酶的作用下，使亞烷基二元羧酸與酯供體發(fā)生反應(yīng)，得到亞烷基二元酸單酯；酯供體為飽和脂肪醇和/或相應(yīng)的酯。
12.進(jìn)一步地，亞烷基二元羧酸含有8個(gè)或者以上碳原子；優(yōu)選的，亞烷基二元羧酸為單鏈亞烷基二元羧酸；更優(yōu)選的，亞烷基二元羧酸含有12~25個(gè)碳原子。
13.進(jìn)一步地，酯供體為碳原子數(shù)為2~6的飽和脂肪醇或者相應(yīng)的酯，更優(yōu)選的，酯供體為叔丁醇、甲酸叔丁酯和乙酸叔丁酯中的任意一種或者多種，更進(jìn)一步優(yōu)選酯供體為叔丁醇。
14.進(jìn)一步地，水解酶包括cala，優(yōu)選的， cala選自novocor adl和merck-62287中的任意一種或者多種；優(yōu)選的，水解酶的重量為亞烷基二元羧酸重量的0.13~0.8倍。
15.進(jìn)一步地，水解酶為固定化水解酶，優(yōu)選的，固定化水解酶的載體選自lx109s環(huán)氧樹(shù)脂、lx1000ha樹(shù)脂、nka9大孔樹(shù)脂中的任意一種或者多種；優(yōu)選的，每克載體上水解酶的負(fù)載量為60mg~80mg。
16.進(jìn)一步地，水解酶選自cala，載體選自lx109s環(huán)氧樹(shù)脂。
17.進(jìn)一步地，固定化水解酶的重量為亞烷基二元羧酸重量的2~10倍。
18.進(jìn)一步地，酯供體的摩爾量為亞烷基二元羧酸摩爾量的10~370倍。
19.進(jìn)一步地，反應(yīng)在溶劑中進(jìn)行，溶劑選自包括甲叔醚、正庚烷、叔丁醇、乙酸叔丁酯和環(huán)己烷中的任意一種或者多種，更進(jìn)一步優(yōu)選溶劑為叔丁醇。
20.優(yōu)選的，溶劑的體積為亞烷基二元羧酸體積的20~100倍。
21.進(jìn)一步地，反應(yīng)的溫度為20~60℃，優(yōu)選為25~40℃；優(yōu)選的，反應(yīng)時(shí)間為20~100h。
22.應(yīng)用本發(fā)明的技術(shù)方案，利用生物酶催化技術(shù)，采用酶將亞烷基二元羧酸類底物進(jìn)行高選擇性地轉(zhuǎn)換，獲得亞烷基二酸單酯，這種酶催化合成方法的工藝條件穩(wěn)定，反應(yīng)條件溫和，合成過(guò)程操作簡(jiǎn)單、容易實(shí)施、污染較低，且反應(yīng)選擇性良好，能夠避免產(chǎn)生不需要的二酯副產(chǎn)物，易于分離提純。
具體實(shí)施方式
23.需要說(shuō)明的是，在不沖突的情況下，本技術(shù)中的實(shí)施例及實(shí)施例中的特征可以相互組合。下面將結(jié)合實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
24.如本技術(shù)背景技術(shù)所分析的，現(xiàn)有技術(shù)中存在亞烷基二元酸單酯合成難度大、成本較高的問(wèn)題，為了解決該問(wèn)題，本技術(shù)提供了一種合成亞烷基二元酸單酯的方法，即在水解酶的作用下，使亞烷基二元羧酸與酯供體發(fā)生反應(yīng)，得到亞烷基二元酸單酯；其中酯供體
為飽和脂肪醇和/或相應(yīng)的酯。
25.本技術(shù)利用生物酶催化技術(shù)，采用酶將亞烷基二元羧酸類底物進(jìn)行高選擇性地轉(zhuǎn)換，獲得亞烷基二酸單酯，這種酶催化合成方法的工藝條件穩(wěn)定，反應(yīng)條件溫和，合成過(guò)程操作簡(jiǎn)單、容易實(shí)施、污染較低，且反應(yīng)選擇性良好，能夠避免產(chǎn)生不需要的二酯副產(chǎn)物，易于分離提純。
26.在一些典型的實(shí)施例中，上述亞烷基二元羧酸含有8個(gè)或者以上碳原子，考慮到亞烷基二元酸單酯的應(yīng)用價(jià)值，優(yōu)選上述亞烷基二元羧酸為單鏈亞烷基二元羧酸，制得的亞烷基二酸單酯可以廣泛用于藥物的合成開(kāi)發(fā)；更優(yōu)選的，所述亞烷基二元羧酸含有12~25個(gè)碳原子，即具有如下式（1）所示結(jié)構(gòu)的二元酸，其中n為8~21的整數(shù)。
27.????????????
式（1）上述酯供體可以從現(xiàn)有技術(shù)中選擇，在本技術(shù)的一些實(shí)施例中，考慮到便于目標(biāo)產(chǎn)物的后續(xù)應(yīng)用，酯供體為碳原子數(shù)為2~6的飽和脂肪醇或者相應(yīng)的酯，優(yōu)選的，酯供體為碳原子數(shù)為2~6的飽和脂肪醇，考慮到目標(biāo)產(chǎn)物的應(yīng)用價(jià)值，更優(yōu)選的，酯供體為叔丁醇、甲酸叔丁酯、乙酸叔丁酯、丙烯酸叔丁酯，異丁酸叔丁酯，二碳酸二叔丁酯，更進(jìn)一步優(yōu)選酯供體為叔丁醇，應(yīng)用較為廣泛，且具有較好的轉(zhuǎn)化率。
28.上述水解酶可以從現(xiàn)有技術(shù)中進(jìn)行選擇，在本技術(shù)的一些優(yōu)選的實(shí)施例中，水解酶選自cala，比如諾維信的novocor adl和默克公司的merck-62287。
29.在本技術(shù)的一些典型的實(shí)施例中，上述水解酶為固定化水解酶，在本技術(shù)的研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，載體種類對(duì)酶催化該反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率影響顯著，優(yōu)選的，固定化酶的載體選自lx109s環(huán)氧樹(shù)脂、lx1000ha樹(shù)脂、nka9大孔樹(shù)脂中的任意一種或者多種，尤其是選擇lx109s環(huán)氧樹(shù)脂作為載體時(shí)，該反應(yīng)目標(biāo)產(chǎn)物的收率顯著提升；優(yōu)選的，每克載體上上述酶的負(fù)載量為60mg~80mg。
30.固定化水解酶的制備方法可以參考現(xiàn)有技術(shù)，在本技術(shù)的一些實(shí)施例中，上述固定化酶的載體為環(huán)氧基樹(shù)脂，比如lx-109s環(huán)氧樹(shù)脂，相應(yīng)的固定化水解酶的制備方包括：步驟s1，將第一磷酸鹽緩沖液與水解酶混合形成緩沖酶液；步驟s2，將緩沖酶液與環(huán)氧基樹(shù)脂混合進(jìn)行固定化反應(yīng)后用第二磷酸鹽緩沖液洗滌，得到固定化酶；其中緩沖液與環(huán)氧基樹(shù)脂的體積比為4：1；第一磷酸鹽緩沖液的ph為7.0~8.0，第一磷酸鹽緩沖液中含有氯化鈉，優(yōu)選的，第一磷酸鹽緩沖液中氯化鈉的濃度為1mol/l；第二磷酸鹽緩沖液的ph為7.0~8.0，第二磷酸鹽緩沖液中不含氯化鈉。
31.在本技術(shù)的一些典型的實(shí)施例中，采用固定化水解酶，水解酶選自cala，載體選自lx109s環(huán)氧樹(shù)脂，目標(biāo)產(chǎn)物的收率較高，尤其是酯供體為叔丁醇或者叔丁醇酯時(shí)，該固定化水解酶的效果提升尤為顯著。
32.在本技術(shù)的一些實(shí)施例中，水解酶的重量為亞烷基二元羧酸重量的0.13~0.80倍，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以方便的算出固定化水解酶的添加量。在一些實(shí)施例中，上述固定化水解酶的重量為所述亞烷基二元羧酸重量的2~10倍。
33.上述酯供體與亞烷基二元羧酸的比例可參考反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量比，在本技術(shù)的一些實(shí)施例中，酯供體的摩爾量為亞烷基二元羧酸摩爾量的10~370倍，酯供體除了進(jìn)行反應(yīng)之
外，還可以作為溶劑，使酸和水解酶可以均勻的分散在反應(yīng)體系中，保持良好接觸，提高目標(biāo)產(chǎn)物收率。
34.在本技術(shù)的一些實(shí)施例中，上述反應(yīng)在溶劑中進(jìn)行，即反應(yīng)體系中含有酯供體以外的有機(jī)溶劑，該有機(jī)溶劑包括不限于甲叔醚、正庚烷、四氫呋喃、環(huán)己烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、二氧六環(huán)、二甲基四氫呋喃；其中，當(dāng)溶劑選自甲叔醚、正庚烷、叔丁醇、乙酸叔丁酯和環(huán)己烷時(shí)，目標(biāo)產(chǎn)物收率較高；優(yōu)選的，溶劑的體積為亞烷基二羧酸體積的20~100倍。
35.在本技術(shù)的一些典型的實(shí)施例中，上述反應(yīng)的溫度為20~60℃。該反應(yīng)中亞烷基二元酸單酯的收率會(huì)隨著反應(yīng)時(shí)間的增加逐漸提高，但一定時(shí)間之后，收率增長(zhǎng)不再明顯，優(yōu)選的，反應(yīng)時(shí)間為20~100h，目標(biāo)產(chǎn)物收率較高，無(wú)明顯副產(chǎn)物生成。
36.在本技術(shù)的一些典型的實(shí)施例中，將該反應(yīng)置于搖床中進(jìn)行，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以容易的根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)選擇適宜的反應(yīng)裝置，在此不多贅述。
37.上述催化反應(yīng)體系由于反應(yīng)的選擇性高，副產(chǎn)物較少，對(duì)產(chǎn)物亞烷基二羧酸單酯的分離提純，可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的常用手段進(jìn)行，比如在弱堿性條件下水洗可移除未反應(yīng)完的亞烷基二元羧酸。
38.下面將結(jié)合實(shí)施例和對(duì)比例進(jìn)一步說(shuō)明本技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)的技術(shù)效果。
39.實(shí)施例1本實(shí)施例采用的酶為cala，分別為購(gòu)自諾維信的novocor adl（novocor adl是源于南極洲念珠菌 (cala)的一種非特異性脂肪酶）和默克公司的merck-62287（62287是來(lái)源于米曲霉的南極假絲酵母脂肪酶a）。分別采用上述酶的固定化酶和無(wú)載體游離酶催化制備十八烷二酸單叔丁酯。
40.固定化酶的載體均為lx109s環(huán)氧樹(shù)脂，每克lx109s環(huán)氧樹(shù)脂上cala酶的負(fù)載量為60mg，具體制備方法如下：步驟s1，將第一磷酸鹽緩沖液與水解酶混合形成緩沖酶液，第一磷酸鹽緩沖液的ph為7.0~8.0，且含有氯化鈉，氯化鈉的濃度為1mol/l；步驟s2，將體積比為4:1的緩沖酶液與lx-109s環(huán)氧樹(shù)脂混合進(jìn)行固定化反應(yīng)，然后用ph為7.0~8.0的不含氯化鈉的第二磷酸鹽緩沖液洗滌，得到固定化酶。
41.向10 ml反應(yīng)瓶中，加入2 ml叔丁醇，同時(shí)做為酯供體及溶劑；隨后加入20 mg原料十八烷二酸（結(jié)構(gòu)式：），并充分振蕩分散；隨后加入10 wt（10wt表示相對(duì)于相應(yīng)二元酸的10倍重量，下同）的上述固定化水解酶或同等酶量的cala游離酶（粗酶粉12mg，0.6wt）。將上述反應(yīng)體系置于搖床中升溫至30℃，于200 rpm條件下進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)19 h、43 h和90 h跟蹤體系，使用高效液相譜儀（thermo）-cad檢測(cè)器檢測(cè)單酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率（轉(zhuǎn)化率計(jì)算公式如下，下同），結(jié)果如下表1，未檢測(cè)到二叔丁酯副產(chǎn)物的生成。
42.，其中，area
產(chǎn)品
和area
原料
分別表示原料和產(chǎn)品的峰面積。
43.表1
實(shí)施例2本實(shí)施例采用的酶為cala（novocor adl），載體為nka9大孔樹(shù)脂，每克載體上cala酶的負(fù)載量為60mg，固定化水解酶的制備方法如下：步驟s1，將ph為7.0~8.0的磷酸鹽緩沖液與水解酶混合形成緩沖酶液；步驟s2，將體積比為4:1的緩沖酶液與nka9大孔樹(shù)脂混合進(jìn)行固定化反應(yīng)，然后用ph為7.0~8.0的磷酸鹽緩沖液洗滌，得到固定化酶。
44.向10 ml反應(yīng)瓶中，加入2 ml叔丁醇，同時(shí)做酯供體及溶劑；隨后加入20 mg原料十八烷二酸，并充分振蕩分散；隨后加入10 wt的上述固定化酶，將上述反應(yīng)體系置于搖床中升溫至30℃，于200 rpm條件下進(jìn)行反應(yīng)。檢測(cè)反應(yīng)體系中反應(yīng)43h后單酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率為35.51%，未檢測(cè)到二叔丁酯副產(chǎn)物的生成。
45.實(shí)施例3本實(shí)施例采用的酶為cala（novocor adl）載體為lx1000ha氨基樹(shù)脂，每克載體上cala酶的負(fù)載量為80mg，固定化水解酶的制備方法如下：步驟s1，將lx1000ha氨基樹(shù)脂與ph為7.0~8.0的磷酸鹽緩沖液混合進(jìn)行載體活化后用磷酸鹽緩沖液洗滌，得到活化后的氨基樹(shù)脂；步驟s2，將ph為7.0~8.0的磷酸鹽緩沖液與水解酶混合形成緩沖酶液；步驟s3，將體積比為4:1的緩沖酶液與活化后的氨基樹(shù)脂混合進(jìn)行固定化反應(yīng)后用磷酸鹽緩沖液洗滌，得到固定化酶。
46.反應(yīng)條件參照實(shí)施例1，檢測(cè)反應(yīng)體系中反應(yīng)43h后單酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率為19.57%，未檢測(cè)到二叔丁酯副產(chǎn)物的生成。
47.實(shí)施例4仍然以十八烷二酸為原料，固定化水解酶同實(shí)施例1的novocor adl固定化酶，固定化酶的用量為2 wt，酯供體的用量為10 eq（即原料烷二酸摩爾量的10倍，下同），加入溶劑的量為使反應(yīng)體系的體積為原料十八烷二酸體積的50倍，酯供體和溶劑的種類如下表2所示，反應(yīng)體系置于30℃搖床、200 rpm反應(yīng)，反應(yīng)41h檢測(cè)的單酯產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率結(jié)果如下表2，均未檢測(cè)到二酯副產(chǎn)物。
48.表2
實(shí)施例5仍然以十八烷二酸為原料，加入量為30mg，固定化水解酶同實(shí)施例1 的novocor adl固定化酶，固定化酶的用量為2 wt，酯供體及反應(yīng)溶劑叔丁醇的量為如下表3所示，反應(yīng)體系置于30℃搖床、200 rpm反應(yīng)，反應(yīng)41h檢測(cè)的單酯產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率結(jié)果如下表3，未檢測(cè)到二酯副產(chǎn)物。
49.表3實(shí)施例6仍然以十八烷二酸為原料，加入量為20mg，固定化水解酶同實(shí)施例1 的cala（novocor adl）固定化酶，固定化酶的用量為2 wt，酯供體及反應(yīng)溶劑叔丁醇的量為使反應(yīng)體系的體積為原料十八烷二酸的50倍，反應(yīng)溫度如下表4所示，反應(yīng)體系置于相應(yīng)溫度的200 rpm搖床反應(yīng)，反應(yīng)41h檢測(cè)的單酯產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率結(jié)果如下表4，未檢測(cè)到二酯副產(chǎn)物。
50.表4
實(shí)施例7向10 ml反應(yīng)瓶中，加入2 ml叔丁醇，隨后加入20 mg原料十六烷二酸（結(jié)構(gòu)式為），并充分振蕩分散；隨后加入10 wt.的固定化水解酶，固定化水解酶的種類見(jiàn)下表5，其制備方法同前述實(shí)施例。將上述反應(yīng)體系置于搖床中升溫至30℃，于200 rpm條件下反應(yīng)對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行跟蹤，反應(yīng)19h及43 h檢測(cè)單叔丁酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率。固定化水解酶的種類和相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表5。
51.表5實(shí)施例8向10 ml反應(yīng)瓶中，加入2 ml叔丁醇，隨后加入20 mg原料二十烷二酸（結(jié)構(gòu)式為），并充分振蕩分散；隨后加入10 wt.的固定化水解酶。將反應(yīng)體系置于搖床中升溫至30℃，于200 rpm條件下反應(yīng)。對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行跟蹤，反應(yīng)19 h及43 h檢測(cè)單叔丁酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率。固定化水解酶的種類和相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表6。
52.表6實(shí)施例9向10 ml反應(yīng)瓶中，加入2 ml叔丁醇，隨后加入20 mg原料亞烷基二酸，并充分振蕩分散；隨后加入10 wt.的固定化水解酶，固定化水解酶同實(shí)施例1的 cala（novocor adl）固定化酶。將反應(yīng)體系置于搖床中升溫30℃，于200 rpm條件下反應(yīng)。反應(yīng)43 h跟蹤體系，檢測(cè)單叔丁酯產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率，測(cè)試結(jié)果和亞烷基二酸的底物種類如下表7所示。
53.表7
對(duì)比例1采用如下表8中的酶和載體制備而成的固定化酶，表中的酶均為市售商業(yè)化酶（其中牌號(hào)以asym開(kāi)頭的生產(chǎn)廠家均為凱萊英醫(yī)藥集團(tuán)），每克載體上酶的負(fù)載量為80mg，固定化酶的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例1~3，其中表中載體標(biāo)注為
“?”
的表示直接采用商業(yè)化酶，未查詢到是否包含載體或者載體種類信息，反應(yīng)條件與實(shí)施例1相同，各種酶與載體的固定化方法參見(jiàn)實(shí)施例1~3，檢測(cè)各反應(yīng)體系反應(yīng)43h后單酯的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)結(jié)果如下表。
54.表8
從以上的描述中，可以看出，本發(fā)明上述的實(shí)施例實(shí)現(xiàn)了如下技術(shù)效果：利用生物酶催化技術(shù)，采用酶將亞烷基二元羧酸類底物進(jìn)行高選擇性地轉(zhuǎn)換，獲得亞烷基二酸單酯，
這種酶催化合成方法的工藝條件穩(wěn)定，反應(yīng)條件溫和，合成過(guò)程操作簡(jiǎn)單、容易實(shí)施、污染較低，且反應(yīng)選擇性良好，能夠避免產(chǎn)生不需要的二酯副產(chǎn)物，易于分離提純。
55.以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
技術(shù)特征：
1.一種合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，在水解酶的作用下，使亞烷基二元羧酸與酯供體發(fā)生反應(yīng)，得到亞烷基二元酸單酯；所述酯供體為飽和脂肪醇和/或相應(yīng)的酯。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述亞烷基二元羧酸為單鏈亞烷基二元羧酸。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述亞烷基二元羧酸含有12~25個(gè)碳原子。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述酯供體為碳原子數(shù)為2~6的飽和脂肪醇或者相應(yīng)的酯。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述酯供體為叔丁醇、甲酸叔丁酯和乙酸叔丁酯中的任意一種或者多種。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述水解酶包括cala，所述水解酶的用量為所述亞烷基二元羧酸重量的0.13~0.8倍。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述cala選自novocor adl和merck-62287中的任意一種或者多種。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述水解酶為固定化水解酶，每克載體上所述水解酶的負(fù)載量為60mg~80mg，所述固定化水解酶的重量為所述亞烷基二元羧酸重量的2~10倍。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述固定化水解酶的所述載體選自lx109s環(huán)氧樹(shù)脂、lx1000ha樹(shù)脂、nka9大孔樹(shù)脂中的任意一種或者多種。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述反應(yīng)在溶劑中進(jìn)行，所述溶劑選自包括甲叔醚、正庚烷、叔丁醇、乙酸叔丁酯和環(huán)己烷中的任意一種或者多種，所述溶劑的體積為亞烷基二元羧酸體積的20~100倍。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的合成亞烷基二元酸單酯的方法，其特征在于，所述反應(yīng)的溫度為20~60℃，所述反應(yīng)時(shí)間為20~100h。
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種合成亞烷基二元酸單酯的方法。該方法為在水解酶的作用下，使亞烷基二元羧酸與酯供體發(fā)生反應(yīng)，得到亞烷基二元酸單酯；酯供體為飽和脂肪醇和/或相應(yīng)的酯。本申請(qǐng)利用生物酶催化技術(shù)，采用酶將亞烷基二元羧酸類底物進(jìn)行高選擇性地轉(zhuǎn)換，獲得亞烷基二酸單酯，這種酶催化合成方法的工藝條件穩(wěn)定，反應(yīng)條件溫和，合成過(guò)程操作簡(jiǎn)單、容易實(shí)施、污染較低，且反應(yīng)選擇性良好，能夠避免產(chǎn)生不需要的二酯副產(chǎn)物，易于分離提純。易于分離提純。
