一種亞胺培南雜質(zhì)B的制備方法與流程
一種亞胺培南雜質(zhì)b的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
1.本發(fā)明屬于醫(yī)藥合成領(lǐng)域，具體涉及一種亞胺培南雜質(zhì)b的制備方法。
背景技術(shù)：
2.亞胺培南(imipenem)屬于碳青霉烯類(penems)抗生素，對革蘭陽性、陰性需氧、厭氧菌具有抗菌作用。由于其具有β-內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)和較多的活性基團(tuán)，因此，在制備、儲存和使用中通過氧化和水解極易產(chǎn)生雜質(zhì)。歐洲藥典9.0中收錄了兩個亞胺培南雜質(zhì)，一個為相對保留時間0.8的雜質(zhì)a，另一個為相對保留時間0.35的一對差向異構(gòu)體雜質(zhì)b。據(jù)查證，雜質(zhì)b存在兩種結(jié)構(gòu)方式，雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體互轉(zhuǎn)且結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，難以獲得純度較高的固體，所以無雜質(zhì)對照品出售。雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體結(jié)構(gòu)如式i-1、i-2所示：
[0003][0004]
pascale taibi等人曾報道將0.5mg亞胺培南用0.05m硫酸1.0ml降解1h，用氫氧化鋇中和至7.0，濾掉沉淀物，過25*1.0cm c18反相柱，得到兩種異構(gòu)體含量1:1的雜質(zhì)b。該法降解時間長，所用制備柱較小，需長時間富集合格產(chǎn)品，難以保證雜質(zhì)b在溶液狀態(tài)的穩(wěn)定性，且酸解溶液中亞胺培南雜質(zhì)b濃度低，后續(xù)制備難度加大。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
[0005]
針對以上問題，為了獲得純度較高的雜質(zhì)b固體，以滿足結(jié)構(gòu)鑒定及工作對照品的要求。本發(fā)明提供一種亞胺培南雜質(zhì)b的制備方法。
[0006]
一種亞胺培南雜質(zhì)b的制備方法，包括以下步驟：
[0007]
1)將亞胺培南加入水中得亞胺培南懸浮液，逐滴加入濃硫酸并不斷攪拌，溶液澄清后，用堿溶液調(diào)節(jié)ph至中性，加水稀釋得亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液；
[0008]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分流出液；
[0009]
3)將目標(biāo)成分流出液凍干得亞胺培南雜質(zhì)b純品；
[0010]
[0011]
優(yōu)選地，步驟1)中所述亞胺培南懸浮液中亞胺培南與水的質(zhì)量體積比為1：40～60，其中，質(zhì)量以g計，體積以ml計。
[0012]
進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟1)中所述亞胺培南與所述濃硫酸的質(zhì)量體積比為1:0.8～1.2，其中，質(zhì)量以g計，體積以ml計。
[0013]
優(yōu)選地，步驟1)中所述堿溶液選自氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液中的一種。
[0014]
優(yōu)選地，步驟1)中所述堿溶液的濃度為0.5～5mol/l。
[0015]
優(yōu)選地，步驟2)中所述梯度洗脫的流動相a為純化水、流動相b為乙腈。
[0016]
優(yōu)選地，步驟2)中梯度洗脫使用的譜柱為漢邦dac-50動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，制備柱材質(zhì)為316l型不銹鋼。
[0017]
優(yōu)選地，步驟2)中梯度洗脫使用的譜柱中填料及規(guī)格為sepax hp c18 10μm [0018]
優(yōu)選地，步驟2)中梯度洗脫譜柱的柱溫為室溫。
[0019]
優(yōu)選地，步驟2)中梯度洗脫檢測波長為210nm。
[0020]
優(yōu)選地，步驟2)中梯度洗脫流速為50ml/min。
[0021]
優(yōu)選地，步驟2)中所述梯度洗脫按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為0％～2％；7分鐘時，流動相b體積比增加到2％～4％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％～15％增加至20～25％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50％～55％；前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在0～2％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)。
[0022]
優(yōu)選地，步驟2)中所述梯度洗脫按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為3％～4％；7分鐘時，流動相b體積比增加到5％～6％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％～15％增加至20％～25％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50％～55％；前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在3％～4％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)。
[0023]
進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟2)中所述梯度洗脫按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為3％；7分鐘時流動相b體積比增加到5％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％增加至20％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50；前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在3％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)。
[0024]
優(yōu)選地，步驟3)中所述的凍干中凍干曲線為：
[0025][0026]
進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟3)中所述的凍干中凍干曲線為：
[0027][0028]
本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)取得了以下有益效果：
[0029]
(1)反應(yīng)時間短、收率高，本發(fā)明將濃硫酸滴加入亞胺培南溶液至溶液澄清，反應(yīng)即完成，縮短了降解時間，減少了其他雜質(zhì)的含量。
[0030]
(2)制備效率高，本發(fā)明制備過程可以實現(xiàn)連續(xù)進(jìn)樣，制備花費(fèi)時間短，效率高。
[0031]
(3)純度高，本發(fā)明制備的亞胺培南雜質(zhì)b的hplc純度可高達(dá)97.6％。
附圖說明
[0032]
圖1實施例1中亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液hplc圖譜；
[0033]
圖2實施例1中亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液在線制備圖譜；
[0034]
圖3實施例1中亞胺培南雜質(zhì)b純品hplc圖譜；
[0035]
圖4實施例8中亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液在線制備圖譜；
[0036]
圖5對比例1中亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液hplc圖譜；
[0037]
圖6對比例2中亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液在線制備圖譜；
[0038]
圖7對比例2中亞胺培南雜質(zhì)b純品hplc圖譜；
具體實施方式
[0039]
現(xiàn)通過以下實施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明的有益效果，實施例僅用于例證的目的，不限制本發(fā)明的范圍，同時本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明所做的顯而易見的改變和修飾也包含在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
[0040]
參考實施例：
[0041]
亞胺培南雜質(zhì)b純度檢測hplc條件如下：
[0042]
譜柱：ymc-triart c
18
，4.6
×
150mm，3μm
[0043]
檢測波長：210nm
[0044]
流速：1.0ml/min
[0045]
柱溫：30℃
[0046]
流動相a：2.6mm磷酸二氫鈉-7.3mm磷酸氫二鈉緩沖液(磷酸調(diào)ph＝7.30):乙腈＝993:7
[0047]
流動相b：2.6mm磷酸二氫鈉-7.3mm磷酸氫二鈉緩沖液(磷酸調(diào)ph＝7.30):乙腈＝750:250
[0048]
hlpc分析檢測的梯度洗脫為：
[0049][0050]
保留時間為2.2min、2.3min的一對目標(biāo)峰對應(yīng)亞胺培南雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體。
[0051]
本發(fā)明實施例中使用的亞胺培南粗品純度高于90％。
[0052]
實施例1
[0053]
1)將1g亞胺培南粗品加入50ml純化水中得到亞胺培南混懸液，逐滴加入1ml濃硫酸并不斷攪拌，待樣品溶液變澄清，立刻滴加1m氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至7.0，加水稀釋至100ml。稀釋液經(jīng)hplc檢測，亞胺培南雜質(zhì)b的兩種差向異構(gòu)體純度分別為29.7％、38.3％，合計68.0％，hplc分析檢測圖譜見附圖1，標(biāo)號1/2的兩個峰對應(yīng)為亞胺培南雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體。
[0054]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；
[0055]
制備純化方法為：
[0056]
譜柱：漢邦dac-50動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，制備柱材質(zhì)為316l型不銹鋼
[0057]
填料：sepax hp c18 10μm
[0058]
柱溫：室溫
[0059]
檢測波長：210nm
[0060]
流速：50ml/min
[0061]
流動相a：純化水
[0062]
流動相b：乙腈
[0063]
單次進(jìn)樣量：20ml
[0064]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為3％；7分鐘時，流動相b體積比增加到5％；7-7.1分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由5％增加至10％，7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％增加至20％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在3％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。收集保留時間為9.4min附近的目標(biāo)成分，制備圖譜見附圖2。
[0065]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線為：
[0066][0067][0068]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為566mg，hplc純度為97.6％，收率56.6％，分析檢測圖譜見附圖3，標(biāo)號1/2的兩個峰對應(yīng)為亞胺培南雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體。
[0069]
實施例2
[0070]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0071]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；
[0072]
其他條件同實施例1。
[0073]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為4％；7分鐘時，流動相b體積比增加到6％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％增加至20％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在55％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在4％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。收集保留時間為7.7min附近的目標(biāo)成分。
[0074]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0075][0076]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為535mg，hplc純度為97.2％，收率53.5％。
[0077]
實施例3
[0078]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0079]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；
[0080]
其他條件同實施例1。
[0081]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為2％；7分鐘時，流動相b的體積比增加到4％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由15％增加至25％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在55％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在2％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。收集保留時間為10.9min附近的目標(biāo)成分。
[0082]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0083][0084]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為529mg，收率52.9％，hplc純度為97.0％。
[0085]
實施例4
[0086]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0087]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；
[0088]
其他條件同實施例1。
[0089]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為0；7分鐘時，流動相b體積比增加到3％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％增加至20％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在55％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比為0進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。收集保留時間為12.5min附近的目標(biāo)成分。
[0090]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0091][0092]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為521mg，hplc純度為97.3％，收率52.1％。
[0093]
實施例5
[0094]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0095]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分流出液；
[0096]
其他條件同實施例1。
[0097]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為0；7分鐘時，流動相b的體積比增加到2％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％增加至23％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在50％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比為0進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。收集保留時間為12.8min附近的目標(biāo)成分。
[0098]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0099][0100][0101]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為517mg，hplc純度為96.1％，收率51.7％。
[0102]
實施例6
[0103]
1)將1g亞胺培南粗品加入40ml純化水中得亞胺培南混懸液，逐滴加入0.8ml濃硫酸并不斷攪拌，待樣品溶液變澄清，立刻滴加0.5m氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)ph至7.0，加水稀釋至100ml。稀釋液經(jīng)hplc檢測，亞胺培南雜質(zhì)b的兩種差向異構(gòu)體純度分別為28.0％、35.9％，合計63.9％。
[0104]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；洗脫條件及洗脫梯度同實施例1。
[0105]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0106][0107]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為527mg，hplc純度為97.1％，收率52.7％。
[0108]
實施例7
[0109]
1)將1g亞胺培南粗品加入60ml純化水中得亞胺培南混懸液，逐滴加入1.2ml濃硫酸并不斷攪拌，待樣品溶液變澄清，立刻滴加5m氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至7.0，加水稀釋至100ml。稀釋液經(jīng)hplc檢測，亞胺培南雜質(zhì)b的兩種差向異構(gòu)體純度分別為26.2％、35.3％，
合計61.5％。
[0110]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；洗脫條件及洗脫梯度同實施例1。
[0111]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0112][0113]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為511mg，hplc純度為96.5％，收率51.1％。
[0114]
實施例8
[0115]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0116]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；
[0117]
其他條件同實施例1。
[0118]
按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為5％；7分鐘時，流動相b體積比增加到8％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由12％增加至30％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在50％。前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比為5％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)，共進(jìn)樣5針。該梯度不能有效分離亞胺培南雜質(zhì)b，亞胺培南雜質(zhì)b與其他雜質(zhì)分離度較差，在保留時間為5min左右流出，在線制備圖譜見圖4。
[0119]
實施例9
[0120]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0121]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；實驗條件同實施例1；
[0122]
3)將制備收集液在30℃水浴下減壓蒸餾，剩余溶液經(jīng)hplc分析檢測，hplc純度為91.6％。
[0123]
實施例10
[0124]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同實施例1；
[0125]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；實驗條件同實施例1；
[0126]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干曲線：
[0127][0128]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為552mg，合并hplc純度為92.1％，收率55.2％。
[0129]
對比例1
[0130]
將1.0g亞胺培南溶于2l 0.05m硫酸溶液中，室溫下攪拌1小時，向上述酸性溶液中逐漸加入固體硫酸鋇調(diào)節(jié)溶液ph至7，過濾，濾液用參考實施例中hplc檢測方法分析，亞胺培南雜質(zhì)b的兩種差向異構(gòu)體純度分別為23.3％、25.4％，合計48.7％，hplc分析檢測圖譜見附圖5，標(biāo)號1/2的峰對應(yīng)為亞胺培南雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體。
[0131]
濾液用hplc純化，純化條件為：vydac，c18柱，25*1.0cm，5μm，波長215nm，進(jìn)樣量：1ml，流速1.0ml/min，洗脫梯度：0-30min，乙腈體積比2～98％。收集保留時間12.6min的洗脫液。該法需多次富集，耗時長，制備效率低，僅可得到洗脫液作分析檢測用，難以工業(yè)化應(yīng)用。
[0132]
對比例2
[0133]
1)亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液的制備同對比例1。
[0134]
2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分洗脫液；洗脫條件及洗脫梯度同實施例1，在線制備圖譜見圖6。
[0135]
3)將制備收集液直接低溫凍干，凍干方法同實施例1。
[0136]
凍干后，稱重、分析檢測，亞胺培南雜質(zhì)b為399g，hplc純度為96.8％，收率39.9％。分析檢測圖譜見圖7，標(biāo)號1/2的峰對應(yīng)為亞胺培南雜質(zhì)b的兩種異構(gòu)體。
技術(shù)特征：
1.一種亞胺培南雜質(zhì)b的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)將亞胺培南加入水中得亞胺培南懸浮液，逐滴加入濃硫酸并不斷攪拌，溶液澄清后，用堿溶液調(diào)節(jié)ph至中性，加水稀釋得亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液；2)將上述亞胺培南雜質(zhì)b粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分流出液；3)將目標(biāo)成分流出液凍干得亞胺培南雜質(zhì)b純品；2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述亞胺培南懸浮液中亞胺培南與水的質(zhì)量體積比為1：40～60，其中，質(zhì)量以g計，體積以ml計。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述亞胺培南與所述濃硫酸的質(zhì)量體積比為1:0.8～1.2，其中，質(zhì)量以g計，體積以ml計。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述堿溶液選自氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液中的一種。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述堿溶液的濃度為0.5～5mol/l。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述梯度洗脫的流動相a為純化水、流動相b為乙腈。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述梯度洗脫按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為0％～2％；7分鐘時，流動相b體積比增加到2％～4％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％～15％增加至20～25％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50％～55％；前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在0～2％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)。8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述梯度洗脫按照如下梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫：前期洗脫分離和后期洗脫平衡，前期洗脫分離程序為：0分鐘時流動相b體積比為3％～4％；7分鐘時，流動相b體積比增加到5％～6％；7.1-17分鐘內(nèi)，流動相b的體積比由10％～15％增加至20％～25％，17.1-22分鐘內(nèi)，流動相b體積比維持在50％～55％；前期洗脫分離結(jié)束后，22.1-27分鐘內(nèi)，流動相b的體積比維持在3％～4％進(jìn)行后期洗脫平衡，再進(jìn)樣，前期洗脫分離，后期洗脫平衡，依次循環(huán)。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中所述的凍干的凍干曲線為：
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種亞胺培南雜質(zhì)B的制備方法，包括以下步驟：1)將亞胺培南加入水中得亞胺培南懸浮液，逐滴加入濃硫酸并不斷攪拌，溶液澄清后，用堿溶液調(diào)節(jié)pH至中性，加水稀釋得亞胺培南雜質(zhì)B粗品溶液；2)將上述亞胺培南雜質(zhì)B粗品溶液進(jìn)樣到動態(tài)軸向壓縮柱系統(tǒng)，梯度洗脫，收集目標(biāo)成分流出液；3)將目標(biāo)成分流出液凍干得亞胺培南雜質(zhì)B純品；本發(fā)明工藝(1)反應(yīng)時間短、收率高，將濃硫酸滴加入亞胺培南溶液至溶液澄清，反應(yīng)即完成，縮短了降解時間，減少了其他雜質(zhì)的含量；(2)制備效率高，本發(fā)明制備過程可以實現(xiàn)連續(xù)進(jìn)樣，制備花費(fèi)時間短，效率高；(3)純度高，制備的亞胺培南雜質(zhì)B的HPLC純度可高達(dá)97.6％。培南雜質(zhì)B的HPLC純度可高達(dá)97.6％。
